一种难溶水产胶原蛋白源ACE抑制肽的制备方法技术

本发明专利技术公开的一种难溶水产胶原蛋白源ＡＣＥ抑制肽的制备方法，将新鲜海洋生物低温下切块粉碎，加入苛性钠低温搅拌，除去上清液，清洗沉淀物并加入有机酸溶液和酸性蛋白酶，低温搅拌，高速离心分离得到高分子胶原蛋白和难溶胶原蛋白，采用高温高压使难溶性胶原蛋白变性，形成可溶性胶原蛋白溶液，获得可溶性胶原蛋白粉末；加入氢氧化钠溶液和蛋白酶，在适宜温度下搅拌，得到酶解蛋白肽溶液，离心分离该溶液，收集上清液，冻结干燥，制得难溶水产胶原蛋白源ＡＣＥ抑制肽。本发明专利技术方法充分利用提取高分子胶原蛋白后的生产残渣，获得热水可溶性胶原蛋白，然后通过酶解获得胶原肽，制备出可食用的ＡＣＥ抑制肽产品，提高了高分子胶原蛋白的生产率。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种难溶水产胶原蛋白源ＡＣＥ抑制肽的制备方法，采用高压高温使难溶性胶原蛋白变性，获得可溶性胶原蛋白，并使用金属酶或碱性酶对该可溶性胶原蛋白进行水解，进而提取具有胶原蛋白功效的ＡＣＥ抑制肽，该方法按以下步骤进行：　步骤１：制备沉淀物　 　选取新鲜海洋生物扇贝外套膜，清洗，在２℃～４℃的温度条件下切块，然后，在２℃～４℃条件下粉碎成浆，经高速离心分离，得到沉淀物；　步骤２：除去胶原蛋白以外的蛋白质　取当量浓度为０．１Ｎ的苛性钠溶液，加入步骤１得到的沉淀物中，控 制苛性钠溶液与该沉淀物的质量比为１５～２０∶１，在温度为２℃～４℃的环境中，搅拌１２小时～４８小时，然后，高速离心除去上清液，用蒸馏水清洗沉淀，高速离心除去上清液，得到沉淀物原料；　步骤３：分离高分子胶原蛋白和难溶胶原蛋白　分别 取摩尔浓度为０．２Ｍ～０．５Ｍ的有机酸溶液和酸性蛋白酶，混合后，加入步骤２得到的沉淀物原料中，形成混合溶液，该混合溶液中，有机酸溶液与沉淀物原料的质量比为１０～１５∶１，酸性蛋白酶的基质比为０．２％～２％的，在温度为２℃～４℃的环境中，以２０转／分～５０转／分的速度搅拌１２小时～２４小时，然后，以３００００ｒｐｍ～１０００００ｒｐｍ的转速离心分离，分别得到上清液和剩余物质，该上清液为高分子胶原蛋白，剩余物质为难溶胶原蛋白；　步骤４：分解难溶胶原蛋白质　将步骤３得到 的难溶胶原蛋白，用蒸馏水清洗后，再加入蒸馏水稀释，形成悬浮溶液，取当量浓度为２Ｎ的氢氧化钠溶液，加入该悬浮溶液中，调节悬浮溶液的ｐＨ值为７．０，然后，在压力为１．０～２．１ｋｇ／ｃｍ２、温度为１２０～１３２℃的条件下，煮沸１小时～２小时，冷却至室温，过滤，将得到的滤液冻结干燥，制得可溶性胶原蛋白粉末；　步骤５：取蒸馏水，将步骤４制得的可溶性胶原蛋白粉末加入该蒸馏水中，控制每毫升蒸馏水中加入１０毫克～３０毫克的可溶性胶原蛋白粉末，得到可溶性胶原蛋白溶液；　步骤６：制 备酶解蛋白肽溶液　分别取氢氧化钠溶液和蛋白酶，将氢氧化钠溶液加入步骤５得到的可溶性胶原蛋白溶液中，根据所用蛋白酶的活性作用条件，调节该可溶性胶原蛋白溶液的ｐＨ值，然后，加入蛋白酶，控制溶液中蛋白酶的基质比为０．２％～２％，并在温度为３ ０℃～６０℃的条件下，搅拌酶解８小时～４８小时，之后，在温度为９８℃～１１５℃条件下，加热１０分钟～１５分钟，使蛋白酶失去活性...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：申铉日，易美华，李从发，
申请(专利权)人：海南大学，
类型：发明
国别省市：66[中国|海南]