【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于从微生物的培养介质中分离微生物的方法(国际专利分类号为C12N1/02)。L-多巴(L-Dopa)是预防、治疗帕金森氏病、震颤性麻痹综合症、一氧化碳中毒、锰中毒等病症的有效药物。现在，可以从野生植物藜豆中提取、化学合成等途径制取此药。但这些方法原料来源有限、工艺复杂、产率低、成本高。用微生物发酵催化L-酪氨酸合成L-多巴，其优越性是工艺简单，经济合算，适于工业化大生产，因此，必须获得高产L-多巴的菌株，但用常规方法分离筛选产L-多巴菌株，不仅手续繁杂，时间长，而且很难得到产L-多巴的菌株。本专利技术的目的是创造一种快速、简便的方法，能分离、筛选到产L-多巴的菌株。为达上述目的，本专利技术的技术解决方案是，采取十字花科植物的根系土壤，将所采土壤与适量的无菌生理盐水混匀，然后再用无菌生理盐水按10倍稀释，取上述处理好的样品涂布在选择培养基上，在24℃～30℃温度下培养3～7天，得到单个菌落。该选择培养基的组成如下蛋白胨 10～20克NaCl 2～5克CaCl20.1～0.5克吐温80(或吐温60，或土温20) 10～20毫升蔗糖 1～4克琼脂 15克水 1，000毫升该选择培养基的pH值为7.0，15磅20分钟灭菌。选择革兰氏阴性，有沉淀环的单个黄色菌落，对所选菌落进行产L-多巴的检测。首先进行定性检测，然后再进行定量检测。定性检测和定量检测的检测方法是已知的。定性检测将菌落用无菌生理盐水稀释，涂布在检测培养基上(葡萄糖20克，蛋白胨10克，L-酪氨酸2克，(NH4)2SO45克，MgSO4·7H2O 0.2克，...
【技术保护点】
一种分离、筛选产Ｌ－－多巴（Ｌ－－Ｄｏｐａ）菌株的方法，其特征在于：ａ、土壤样品取自十字花科植物的根系土壤ｂ、土壤样品经处理后采用选择培养基分离菌种ｃ、选择菌落的指标为：革兰氏阴性、有沉淀环的单个黄色菌落ｄ、分离：筛选工艺流 程为：取十字花科植物的根系土壤，将该土壤适量与一定量的无菌生理盐水混匀，再用无菌生理盐水按１０倍稀释，取上述处理好的样品涂布在选择培养基上培养３～７天，培养温度为２４℃～３０℃，选择革兰氏阴性、有沉淀环的单个黄色菌落，对所选菌落首选进行产Ｌ－－多巴的定性检测，然后进行产Ｌ－－多巴的定量检测。
【技术特征摘要】
1.一种分离、筛选产L-多巴(L-Dopa)菌株的方法，其特征在于a、土壤样品取自十字花科植物的根系土壤b、土壤样品经处理后采用选择培养基分离菌种c、选择菌落的指标为革兰氏阴性、有沉淀环的单个黄色菌落d、分离筛选工艺流程为取十字花科植物的根系土壤，将该土壤适量与一定量的无菌生理盐水混匀，再用无菌生理盐水按10倍稀释，取上述处理好的样品涂布在选择培养基上培养3...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。