抗生素6270的制备方法技术

一种生产抗生素６２７０的方法，抗生素６２７０的熔点为１１５－１１８℃，元素分析为Ｃ：６２．７２％，Ｈ：９．４９％Ｏ：２７．７８％，颜色反应：在香草醛－硫酸反应和Ｄｒａｇｅｎｄｏｒｆｆ反应中呈阳性：在茚三酮反应中呈阴性：带有Ｉ－［２］气体的颜色，包括培养一种产生抗生素６２７０的，属于诺卡氏放线菌（Ｎｏｃａｒｄｉｏｐｓｉｓ）属的微生物，并从培养产物中分离出抗生素６２７０．（*该技术在2005年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术是一种新的抗生素6270及其制备方法，以及它作为一种抗球虫病剂或作为一种加速家畜或家禽生长的饲料添加剂的应用。为了寻找新的抗生素和研究那些由所分离的微生物产生的抗生素起见，本专利技术者已经从各种土壤中分离了许多微生物。因此，他们已经发现在一个合适的培养基中从日本北海道，网走市(Abashiri)采集的土壤中分离出的属于诺卡氏放线菌(Nocardiopsis)属的微生物时，在培养基中就积累了一种对革兰氏阳性细菌具有高度抗菌活性的抗生素。该抗生素得到了分离且理化性质及生物学特性得到了检验，从而已作为一种新的抗生素得到进一步证实被命名为抗生素6270。本专利技术是以这个发现为基础的，并提供这种新的抗生素6270及其制备方法，该方法包括培养属于诺卡氏放线菌(Nocardiopsis)属的产生抗生素6270的微生物和从培养物中分离抗生素6270。此外，本专利技术提供一种含有作为活性成分的抗生素6270的抗球虫病剂，和一种防治家畜和家禽球虫病的方法，该方法包括给家畜和家禽吃有效的抗生素6270。另外，本专利技术提供一种家畜和家禽的生长加速和饲料功效增强剂，其含有作为活性成分的抗生素6270，并提供一种加速家畜和家禽生长及增强其饲料功效的方法，该方法包括给家畜和家禽吃有效数量的抗生素6270。因此，本专利技术提供一种家畜和家禽的饲料，这种饲料含有有效数量的抗生素6270。在这方面的有效数量通常是从0.5到200ppm，从1到100ppm则更好。现在，将详细叙述本专利技术并给出最佳实施例。在附图中，图1是用溴化钾压片法测定的抗生素6270的红外吸收光谱。图2是在重质氯仿中通过用四甲基硅烷作为内标准所测定的抗生素6270的1H-核磁共振光谱。图3是在重质氯仿中通过用四甲基硅烷作为内标准所测定的抗生素6270的13C-核磁共振波谱。可用来生产抗生素6270的微生物可能是属于诺卡氏放线菌(Nocardiopsis)属的任何微生物，只要它能够产生抗生素6270。不过，最好选用由本专利技术者重新分离的诺卡氏放线菌(Nocardiopsis)种的6270品系(作为FERM BP-717被存放在日本的发酵研究所里)。在本专利技术中所用的诺卡氏放线菌(Nocardiopsis)种的6270品系具有分支的菌丝体，并在空气中延伸的气生菌丝被分裂而形成长的孢子链。从整个细胞的水解产物中，内消旋-二氨基庚二酸(mesodiaminopimeric acid)和作为糖成分的半乳糖和核糖被发现了。然而，阿拉伯糖和madurose未被发现。此外，也没发现霉菌酸。维生素K2类合成物含有作为主要成分的MK-9(H6)和(H8)并且发现了作为痕量成分的MK-9(H4)。基内菌丝的宽度约为0.5微米。根据前述的特性，确定6270菌株是一种属于放线菌中诺卡氏放线菌(Nocardiopsis)属的菌株。诺卡氏放线菌(Nocardiopsis)种6270菌株具有下列微生物学特性。Ⅰ.形态学特征基内菌丝充分生长并分裂，从而每个菌丝的宽度约为0.4微米。在某些培养基，例如蔗糖-硝酸盐琼脂培养基(Difco.Czapeck溶液琼脂)，淀粉琼脂培养基(ISP-4，Difco-无机盐淀粉琼脂)燕麦片琼脂培养基(ISP-8)或葡萄糖-天冬酰胺琼脂培养基中，气生菌丝充分地生长。气生菌丝或直或弯，并且作为一个整体来看，它们构成网状。成熟时，气生菌丝的宽度从0.4到0.6微米。从培养开始到结束的10天中，气生菌丝经过分裂并形成许多长的孢子链，每一孢子链至少含有10个孢子。孢子链不是螺旋形的，孢子的表面是光滑的且形状是圆筒形的。其大小约为0.4×1.2微米。未观察到孢子囊，菌核或菌丝束。Ⅱ.培养特点按照E.B.Shirling等人所报道的试验方法(系统细菌学国际杂志，16，313-340(1966))进行了试验。另外，使用了已知的培养基和试验方法。使用颜色调和手册，第4版(1958)作为颜色标准在氙灯的标准光源下测定了颜色。当看到相应的颜色标记时，它首先通过普通的名称显示出来，然后在圆括号中显示出颜色标记的代号。当同样的颜色重复出现时，就只显示出颜色标记的代号。除另有规定外，下列资料表示在一个琼脂平板基上，在280℃下培养三个星期的生长状况。(a)项表示生长;(b)项表示气生菌丝的状态;(c)项表示一种可溶色素;(d)项表示其他特性。(1)蔗糖-硝酸盐培养基(Difco-Czapeck溶液琼脂)a良好，接近灰色(2ba)b白色，粉状的c无(2)葡萄糖-天冬酰胺培养基a良好，淡琥珀色(3ic)到米色(3ge)b接近灰色(3ba)c无(3)甘油-天冬酰胺培养基a不好，2bab细长形c无(4)淀粉琼脂培养基a极好，3ic到贡岩(3ca)b粉状的，白色c无d淀粉的水解，阴性(5)酪氨酸琼脂培养基a不好，3geb无c无(6)营养琼脂培养基(Difco.Bacto营养琼脂)a不好，淡白色(2ea)b无c无(7)酵母-麦芽提取物琼脂培养基a极好，裂缝，黄玉色(3ne)b白色c无(8)燕麦片培养基a良好，剥落的(2ca)b2bac无Ⅱ、生理学特点(1)生长温度范围(斜面淀粉琼脂培养基，温度梯度细菌培养器)6.5-38℃(在5℃以下或39.5℃以上未观察到生长)最适温度27℃-38℃。(2)葡萄糖-蛋白胨-明胶的液化穿刺培养阳性。(3)淀粉的水解物阴性。(4)凝固蛋白胨化脱脂乳没有凝固和显著的蛋白胨化(37℃)。(5)黑色素的形成ISP-酪氨酸琼脂培养基阴性。ISP-triptone-酵母提取物肉汤培养基ISP-蛋白胨-酵母-铁琼脂培养基阴性。(6)氯化钠耐受性在4%或更高的浓度下不生长。(7)黄 呤次黄 呤，腺 呤的溶解度阴性。Ⅵ、碳源利用(Pridham和Gottlieb基础培养基)阳性D-葡萄糖，L-阿拉伯糖，D-木糖，水杨苷。弱阳性D-果糖，蔗糖。阴性肌醇，L-鼠李糖，棉子糖，D-甘露醇。已经鉴定6270菌株是属于放线菌中(Nocardiopsis)Meyer1976的一种菌株，因为在上述的各种特点中，它在气生菌丝上形成长的孢子链，并且整个细胞的水解产物含有内消旋-二氨基庚二酸(meso-diamiaopimericacid)和半乳糖，但不含阿拉伯糖和madurose，此外未发现霉菌酸。在实现本专利技术的过程中，产生抗生性6270的微生物可按照培养已知放线菌的常规方法进行培养。然而，从工业观点看，使用通气-搅动的培养方法是有利的。作为生产用的培养基，可使用通常用于放线菌培养的物质。即，各种碳源，氮源和有机或无机盐，如果必要的话还有消沫剂，可用适宜的合成形式。例如，作为碳源，可使用葡萄糖，淀粉，甘油，糊精，蔗糖以及动物或植物油。作为氮源，可使用黄豆粉，玉米浆、麦芽，和氨。此外，若有必要，可加入象碳酸钙，氯化钠、氯化钾，和磷酸盐这样的无机盐。也可加入那些具有促进微生物生长，从而促进抗生菌6270产生的有机或无机盐。培养温度通常在25到30℃范围内，最好在30℃左右。培养时间依条件的不同而不同。然而，所产生的抗菌素6270，通常在72到148小时之内达到最大积累值。抗生素6270可以从培养基中分离，并利用其理化特性，通过常规的方法，如利用杂质溶解度不同的方法，利用对离子交换树脂或各种吸收剂的吸收作用不同本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种产生抗生素６２７０及其盐类的方法，其特征在于，抗生素６２７０具有以下理化性质：（１）无色针状结晶；酸性物质（２）熔点：１１５—１１８℃（３）元素分析（发现物％）：Ｃ：６２．７２％，Ｈ：９．４９％，Ｏ：２７．７８％（４ ）比旋度：＊—１１．５°（浓度１．０，甲醇）（５）紫外吸收光谱：最大吸收带在２１０ｎｍ或更远处没有观察到，这是在甲醇溶液中测定的。（６）在红外吸收光谱中的特征吸收（ｃｍ↑〔－１〕）（用溴化钾压片法进行）：３４７０，２９８０， ２９４５，２８９０，１７３５，１４６０，１３８０，１３１５，１１６５，１１０２，１０７５，９８７，９８０（７）溶解度：溶于甲醇，乙醇，乙酸乙酯，氯仿，乙醚，丙酮，和苯，水溶于水，（８）颜色反应：在香草醛—硫酸反应中和Ｄｒａｇｅｎｄｏ ｒｆｆ反应中呈阳性；在茚三酮反应中呈阴性；带有Ｉ↓〔２〕气体的颜色。（９）薄层层析（使用Ｍｅｒｃｈ公司制造的硅酸ＧＦ↓〔２５４〕′）：溶剂系统，Ｒｆ值氯仿—甲醇（２０∶１），０．４９正己烷—乙酸乙酯（１∶１），０．０８苯 —乙酸乙酯（１∶１），０．０４溶溶系统，Ｒｆ值苯—丙酮（１∶１），０．５３氯仿—丙酮（２∶１），０．３６正己烷—乙酸乙酯（１∶３），０．１３乙酸乙酯，０．２２（１０）↑〔１〕Ｈ一核磁共振波谱：在δｐｐｍ３．３９（３Ｈ ），３．４９（６Ｈ）下观察到三个甲氧基的存在，这是在重质氯仿中在１００ＭＨｚ下用四甲基硅烷作为内标准测定的，该方法包括培养一种产生抗生素６２７０的，属于诺卡氏放线菌（Ｎｏｃａｒｄｉｏｐｓｉｓ）属的微生物，并从培养产物中分离出抗生素６２７ ０。...

【技术特征摘要】
1.一种产生抗生素6270及其盐类的方法，其特征在于，抗生素6270具有以下理化性质(1)无色针状结晶；酸性物质(2)熔点115-118℃(3)元素分析(发现物%)C62.72%，H9.49%，O27.78%(4)比旋度[a]200-11.5°(浓度1.0，甲醇)(5)紫外吸收光谱最大吸收带在210nm或更远处没有观察到，这是在甲醇溶液中测定的。(6)在红外吸收光谱中的特征吸收(Cm-1)(用溴化钾压片法进行)3470，2980，2945，2890，1735，1460，1380，1315，1165，1102，1075，987，980(7)溶解度溶于甲醇，乙醇，乙酸乙酯，氯仿，乙醚，丙酮，和苯，不溶于水，(8)颜色反应在香草醛-硫酸反应中和Dragendorff反应中呈阳性；在茚三酮反应中呈阴性；带有I2气体的颜色。(9)薄层层析(使用Merch公司制造的硅酸GF254′)溶剂系统 Rf值氯仿-甲醇(20∶1) 0.49正己烷-乙酸乙酯(1∶1) 0.08苯-乙酸乙酯(1∶1) 0.04溶溶系统 Rf值苯-丙酮(1∶1) 0.53氯仿-丙酮(2∶1) 0.36正己烷-乙酸乙酯(1∶3) 0.13乙酸乙酯 0.22(10...

【专利技术属性】
技术研发人员：日下部洋子，高桥信子，清野昭雄，岩个谷康男，
申请(专利权)人：科研制药株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]