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编码新型生物合成胰岛素前体的DNA序列以及胰岛素的制备方法技术

技术编号:1749337 阅读:186 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及编码式B-Pg-A胰岛素前体的DNA序列,其中B和A分别表示B-和A-链,Pg表示经修饰的C-肽或含有至少一个糖基化位点的任何数目的氨基酸,本发明专利技术也涉及通过培养被含有编码式中所示胰岛素前体的序列的载体转化的适当细胞,优选真菌细胞以制备胰岛素的方法,本发明专利技术进一步涉及编码药用肽和蛋白质的DNA序列,其中N-糖基化位点被引入任何间隔区的非一必需位点以高水平表达和分泌蛋白质。(*该技术在2015年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及编码新型生物合成胰岛素前体的DNA序列以及通过培养含有这种DNA序列的经转化细胞的胰岛素的制备。胰岛素是一种激素,它主要的作用是控制葡萄糖从血流中转运到它代谢的细胞中。胰岛素含有两条氨基酸链;A链含有21个氨基酸,而B链含有30个氨基酸,它们通过两个二硫键互相连接,在A链中发现有第三个二硫键。胰岛素分子的主要形式被合成为称作前胰岛素原的新生多肽链,它含有信号肽和胰岛素原,信号肽指引新生链穿过内质网,多肽链一穿过膜,内质网腔区域的前胰岛素原就变成胰岛素原。胰岛素原包括一含有35个氨基酸链的多肽链,此链在胰岛素中不存在。此连接肽或C—肽连接将来的胰岛素分子B链的C—末端和A链的N—末端。从内质网腔起,胰岛素原还要路过高尔基体,其中连接肽的蛋白水解开始,连接肽或C肽被类似于胰蛋白酶/羧肽酶B系统的酶系统切割出去,此酶作用于两个连续的碱性氨基酸序列,胰岛素因而得以产生(Steiner et al,Cell Bid,24,(1984)121—130)。C—肽的重要性在于它连接B—链和A—链以使适当结构的二硫键存在于胰岛素分子中(Bell et al.,Nature 284(本文档来自技高网...

【技术保护点】
含有编码式B-Pg-A胰岛素前体序列的DNA序列,其中B和A分别表示人胰岛素的B-和A-链,Pg表示经修饰的C-肽或含有至少一个N-糖基化一致位号的任何数目的氨基酸,而Pg通过蛋白水解加工信号或特异的化学裂解位点连接B-和A-链。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员:S米斯特里奇PJ普特R瓦里尼格尔CAMJJ范登霍德尔
申请(专利权)人:普利瓦药物化学食品化妆品工业公司
类型:发明
国别省市:HR[克罗地亚]

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