微流控微滴检测和分选制造技术

本发明专利技术涉及微流控领域，并且具体涉及用于检测微流控微滴和微滴内的颗粒，以及分选所述微滴的方法。这些方法允许将所述微滴内颗粒的特性和活动量化。为此，本发明专利技术提供了包含适当标记的颗粒的微流控微滴。本发明专利技术还提供了微流控装置和系统，其具有使其特别适用于本发明专利技术方法的特性。

Microfluidic micro drop detection and sorting

The present invention relates to the field of microfluidic control, and specifically to a method for detecting particles in microfluidic droplets and microdroplets, and the separation of the microdroplets. These methods allow the quantification of the properties and activities of the particles in the micro droplets. To this end, the present invention provides a microfluidic droplet containing an appropriate mark of a particle. The invention also provides a microfluidic device and a system, which has the characteristics to make it especially suitable for the invention.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】微流控微滴检测和分选
本专利技术涉及微流控领域，并且具体涉及用于检测微流控微滴(microfluidicdroplet)和微滴内的颗粒，以及分选微滴的方法。这些方法允许量化微滴内颗粒的特性和活动。为此，本专利技术提供了包含适当标记的颗粒的微流控微滴。本专利技术还提供了微流控装置和系统，其具有使其特别适用于本专利技术的方法的特性。
技术介绍
基于微滴的微流控具有用于高通量筛选应用的巨大潜力。将单细胞包封在微滴中允许以非常高的通量(例如，达每天数十万个样品)筛选细胞产物如抗体。例如，可以将单个抗体分泌细胞(例如，杂交瘤细胞或B细胞)和目标重组药物靶标(例如酶)一起包封在微滴中。然后添加酶的荧光底物将揭示哪些微滴包含释放抑制酶活性的抗体的细胞并促进这些抗体的特异性分选。然而，对于许多筛选应用，共包封(除抗体分泌细胞之外)另外的报道细胞而非重组酶将是非常有用的。该报道细胞可以根据抗体的期望效果例如在G蛋白偶联受体(GPCR)的抗体结合时刺激或抑制细胞途径，调节荧光信号(例如，在微滴中可以容易地检测的报道酶的表达；如β-Gal)。GPCR是大多数最畅销药物和所有处方药物中约40％的靶标。这种筛本文档来自技高网...

【技术保护点】
微流控微滴，其包含与一定量的第一可检测标记相关联的单第一颗粒和与一定量的第二可检测标记相关联的潜在颗粒结合配偶体，其中所述第一可检测标记的量是已知的和/或基本上等同于与包含在另外的微流控微滴中的另外的单颗粒相关联的所述第一可检测标记的量，其中所述第一可检测标记与所述第二可检测标记不同，并且其中所述另外的微流控微滴包含在多个微流控微滴中，所述多个微流控微滴还包含含有所述单第一颗粒的所述微流控微滴。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.04.30 EP 15165915.81.微流控微滴，其包含与一定量的第一可检测标记相关联的单第一颗粒和与一定量的第二可检测标记相关联的潜在颗粒结合配偶体，其中所述第一可检测标记的量是已知的和/或基本上等同于与包含在另外的微流控微滴中的另外的单颗粒相关联的所述第一可检测标记的量，其中所述第一可检测标记与所述第二可检测标记不同，并且其中所述另外的微流控微滴包含在多个微流控微滴中，所述多个微流控微滴还包含含有所述单第一颗粒的所述微流控微滴。2.根据权利要求1所述的微流控微滴，其中所述第一颗粒通过与所述潜在颗粒结合配偶体结合而与所述第二标记相关联。3.根据权利要求1或2中任一项所述的微流控微滴，其中所述第一颗粒和另外的颗粒选自细胞、病毒、珠、蛋白质和纳米颗粒。4.根据权利要求3所述的微流控微滴，其中所述潜在颗粒结合配偶体选自抗体、抗体衍生物、抗体模拟物、噬菌体、mRNA-多肽复合物、mRNA-核糖体-多肽复合物、细胞、病毒、肽、蛋白质、核酸、适配体和小分子。5.根据权利要求1至4中任一项所述的微流控微滴，其中所述微流控微滴还包含与一定量的第三可检测标记相关联的(i)颗粒非结合剂或(ii)不结合所述潜在颗粒结合配偶体的第二颗粒。6.用于量化根据权利要求1至5中任一项所述的微流控微滴中颗粒与潜在颗粒结合配偶体之间结合的方法，其包括以下步骤：(i)测量所述第一可检测标记的信号，(ii)测量所述第二可检测标记的信号，以及(iii)使用所述第一可检测标记的信号将所述第二可检测标记的信号归一化，其中所述第二可检测标记的归一化信号表示所述颗粒与所述潜在颗粒结合配偶体之间结合的量。7.用于检测包含在微流控微滴中的一种或更多种颗粒的方法，其包括以下步骤：(a)将包含一种或更多种颗粒的微流控微滴进样到包含检测点的检测通道中，(b)相比于具有球形形状时的同一微流控微滴，至少在所述检测通道中的检测点处限制所述微流控微滴内颗粒的至少垂直移动，以及(c)在所述检测点处检测包含在所述微流控微滴中的至少一种颗粒。8.根据权利要求7所述的方法，其还包括步骤(d)：基于所述颗粒的所述检测，在所述检测通道下游的包含分选接合部的分选通道中分选所述微流控微滴。9.根据权利要求8...

【专利技术属性】
技术研发人员：克里斯托夫·A·梅尔滕，胡红星，大卫·尤斯塔斯，
申请(专利权)人：欧洲分子生物学实验室，
类型：发明
国别省市：德国,DE