基因工程制备菠菜叶绿体三糖磷酸酯异构化酶的方法技术

本发明专利技术涉及基因工程制备菠菜叶绿体三糖磷酸酯异构化酶的方法。通过设计合成的寡核苷酸引物，经过反转录聚合酶链式反应ＲＴ－ＰＣＲ获得了菠菜叶绿体三糖磷酸酯异构体酶ＴＰＩ基因后使之克隆入质粒并置于用计算机辅助设计的基因表达调控顺序的蛋白质生物合成引发区域的特定顺序控制下，在大肠杆菌中可使得目的蛋白ＴＰＩ的表达最高达菌体总蛋白的３６％，经分离纯化后可获得纯度达９５％以上的活性ＴＰＩ。该基因工程所得ＴＰＩ与天然分离的ＴＰＩ区别在于该基因工程酶的高纯度，不沾污植物中共生的其他相关酶，适于特殊的生物医学研究对纯品之需求。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种基因工程制备菠菜叶绿体三糖磷酸酯异构化酶的方法，其特征在于获得天然ＴＰＩ基因后，通过计算机辅助设计对该基因进行改造得到相应的克隆质粒及表达质粒，然后在大肠杆菌中表达出菠菜叶绿体三糖磷酸酯异构化酶。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈海宝，唐功利，
申请(专利权)人：中国科学院上海有机化学研究所，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]