降血糖组合物及其制备方法、用途技术

本发明专利技术涉及医药技术领域，涉及从中国波状网翼藻Dictyopteris undulata Holmes中提取分离得到的、具有降血糖功能的天然组合物，该组合物为新甾体类化合物网翼藻素D(dictyopterisin D)和网翼藻素E(dictyopterisin E)的质量比为3:4的组合物。体外PTP1B抑制试验表明，该组合物对蛋白络氨酸酯酶1B(PTP1B)具有显著抑制活性，其活性强于阳性对照药物齐墩果酸，因此可制成药物制剂作为PTP1B抑制剂，用于治疗糖尿病、肥胖症及其并发症，也可以制造有益于糖尿病患者或肥胖患者的保健食品。

Hypoglycemic composition and its preparation methods and uses

The present invention relates to the technical field of medicine, which relates to the extraction of natural hypoglycemic functional compositions isolated from Chinese, Dictyopteris undulata wavy wing algae Holmes, the composition is a new steroid hormone D net wing algae (dictyopterisin D) and E (dictyopterisin wing algae E) quality the composition ratio of 3:4. PTP1B showed that in vitro inhibition test, the composition of protein tyrosine phosphatase 1B (PTP1B) has significant inhibitory activity, its activity is stronger than the positive control drug of oleanolic acid, so it can be made into a pharmaceutical preparation as a PTP1B inhibitor for the treatment of diabetes, obesity and its complications, health food can also benefit to patients with diabetes or obesity patients.

【技术实现步骤摘要】
降血糖组合物及其制备方法、用途
本专利技术涉及医药
，具体涉及从中国波状网翼藻DictyopterisundulataHolmes中提取分离得到的、具有降血糖功能的新天然组合物。
技术介绍
糖尿病(diabetesmellitus)是一组由遗传和环境因素相互作用而引起的临床综合症。目前，一般将糖尿病分为两类，I-型糖尿病(胰岛素依赖型糖尿病，insulin-dependentdiabetesmellitus，IDDM)与II-型糖尿病(非胰岛素依赖型糖尿病，non-insulin-dependentdiabetesmellitus，NIDDM)。糖尿病中90％以上是II-型糖尿病。II-型糖尿病的特点是胰岛素敏感组织如骨骼肌、肝、脂肪组织对胰岛素作用的抵抗。蛋白酪氨酸磷酸酯酶(PTPases)在平衡细胞内胰岛素作用通路中相关蛋白酪氨酸磷酸化水平中的作用越来越受到重视，成为治疗II-型糖尿病的新途径。PTPase包括一大族跨膜(受体型)和胞内(非受体型)酶，参与调控一系列重要生命过程。目前，对PTPase在胰岛素通路中受体或受体后环节影响正常胰岛素作用的研究，主要集中在LAR-PTPase、SHPTP-2、PTP1B。PTP1B是第一个被鉴定的蛋白酪氨酸磷酸酯酶(proteintyrosinephosphatase),通过PTP1B剔除的老鼠实验表明,PTP1B通过对胰岛素受体的脱磷酰化，进而在调节胰岛素敏感性和脂肪代谢过程中起着非常重要的作用。因而，选择性的、高活性的PTP1B抑制剂在II-型糖尿病、肥胖症及其并发症的治疗中有重要的价值。
技术实现思路
本专利技术是从中国波状网翼藻(D.undulata)中提取分离得到的、具有降血糖作用的新甾体类化合物网翼藻素D(dictyopterisinD)和网翼藻素E(dictyopterisinE)的质量比为3:4的组合物。经药理试验研究表明，该组合物对蛋白络氨酸磷酸酯酶1B(PTP1B)具有显著抑制活性，其活性强于阳性对照药齐墩果酸。本专利技术的目的之一是提供新的甾体类化合物网翼藻素D(dictyopterisinD)和网翼藻素E(dictyopterisinE)的质量比为3:4的组合物。本专利技术的目的之二是提供所述网翼藻素D(dictyopterisinD)和网翼藻素E(dictyopterisinE)的质量比为3:4的组合物的制备方法。本专利技术的目的之三是提供所述网翼藻素D(dictyopterisinD)和网翼藻素E(dictyopterisinE)的质量比为3:4的组合物的用途。具体地说，所述网翼藻素D(dictyopterisinD)和网翼藻素E(dictyopterisinE)的质量比为3:4的组合物在制备蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B(PTP1B)抑制剂的药物中的应用，进一步在制备治疗糖尿病、肥胖症及其并发症的药物或保健食品中的应用。根据本专利技术的第一个目的，本专利技术首次从波状网翼藻中发现了网翼藻素D(dictyopterisinD)和网翼藻素E(dictyopterisinE)的质量比为3:4的组合物，其化学结构如下所示：dictyopterisinDR1＝H,R2＝OCH3dictyopterisinER1＝OCH3,R2＝H。根据本专利技术的第二个目的，本专利技术提供所述网翼藻素D(dictyopterisinD)和网翼藻素E(dictyopterisinE)的质量比为3:4的组合物的制备方法，它是从波状网翼藻中分离得到的，具体步骤如下：1)制备提取物浸膏将冷冻的波状网翼藻(D.undulata)用乙醇按常规渗漉提取，得提取液，将提取液减压浓缩回收乙醇，得粗浸膏；2)分离纯化(1)将上述粗浸膏分散于水中成混悬液，将混悬液用乙醚萃取，所得萃取液浓缩得到乙醚提取浸膏；(2)将乙醚浸膏进行硅胶柱层析，依次以石油醚/丙酮和二氯甲醇/甲醇梯度洗脱，根据TLC显色合并相似流份得到12个组分(A–L)；其中组分G即石油醚/丙酮体积比8:2洗脱部分经SephadexLH-20凝胶柱层析，以二氯甲烷/甲醇体积比1:1洗脱；根据TLC显色合并相似流份得到4个组分(G1-G4)，组分G2(即二氯甲烷/甲醇体积比1:1洗脱体积为75～90mL洗脱部分)再经硅胶柱层析，以石油醚/丙酮体积比8:2洗脱，最后经半制备型HPLC，以甲醇/水85:15体积比洗脱，得到本专利技术化合物网翼藻素D(dictyopterisinD)和网翼藻素E(dictyopterisinE)的质量比为3:4的组合物。在上述制备方法中，在制备提取物浸膏步骤中，所述提取采用的乙醇为95％乙醇。在上述制备方法中，在分离步骤中，石油醚/丙酮梯度洗脱的浓度依次为体积比100:0、90:10、80:20、70:30、50:50和40:60。二氯甲醇/甲醇梯度洗脱的浓度依次为体积比70:30、60:40和50:50。在上述制备方法中，在分离步骤中，所述半制备型HPLC的色谱柱的填料为RP-18。根据本专利技术的第三个目的，本专利技术提供了所述网翼藻素D(dictyopterisinD)和网翼藻素E(dictyopterisinE)的质量比为3:4的组合物在制备PTP1B抑制剂、糖尿病药物、肥胖症药物的用途。以及制备用于糖尿病患者或肥胖患者保健食品的用途。为了达到应用目的，可以制成片剂、胶囊、颗粒剂、口服液、缓释制剂、控释制剂、纳米制剂或注射剂等形式。本专利技术对所得网翼藻素D(dictyopterisinD)和网翼藻素E(dictyopterisinE)的质量比为3:4的组合物进行了体外PTP1B抑制试验，结果表明该化合物对PTP1B有明显的抑制活性。因此，可用来制备PTP1B抑制剂，用于治疗糖尿病、肥胖症及其并发症。附图说明图1为PTP1B抑制活性测试原理图。具体实施方式在如下的实施例中所指网翼藻素D(dictyopterisinD)和网翼藻素E(dictyopterisinE)的质量比为3:4的组合物的化学结构式(结构式中的阿拉伯数字是化学结构中碳原子的标位)：dictyopterisinDR1＝H,R2＝OCH3dictyopterisinER1＝OCH3,R2＝H。实施例1：所述网翼藻素D(dictyopterisinD)和网翼藻素E(dictyopterisinE)的质量比为3:4的组合物的制备1.制备波状网翼藻提取物浸膏(1)制备提取液将冷冻的中国波状网翼藻(D.undulata)(采自广东湛江沿海)1.8kg(湿重)分别用5L95％乙醇渗漉提取三次，每次渗漉2天，合并提取液；(2)制备提取物浸膏将上述提取液在温度≤45℃减压浓缩回收乙醇，得粗浸膏174.5g；2.分离纯化1)将上述粗浸膏分散于2L水中成混悬液，将混悬液用乙醚(1.5L)萃取四次，所得萃取液减压浓缩得到乙醚提取浸膏(54.3g)；2)将乙醚浸膏进行硅胶柱层析，依次以石油醚/丙酮和二氯甲醇/甲醇梯度洗脱；石油醚/丙酮梯度洗脱的浓度依次为体积比100:0、90:10、80:20、70:30、50:50和40:60，二氯甲醇/甲醇梯度洗脱的浓度依次为体积比70:30、60:40和50:50。根据TLC显色合并相似流份得到12个组分(A–L)；3)组分G即石油醚/丙酮体本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有降血糖作用的甾体类化合物网翼藻素D(dictyopterisin D)和网翼藻素E(dictyopterisin E)的质量比为3:4的组合物，其特征在于：具有如下化学结构：

【技术特征摘要】
1.一种具有降血糖作用的甾体类化合物网翼藻素D(dictyopterisinD)和网翼藻素E(dictyopterisinE)的质量比为3:4的组合物，其特征在于：具有如下化学结构：dictyopterisinDR1＝H,R2＝OCH3dictyopterisinER1＝OCH3,R2＝H。2.根据权利要求1所述的网翼藻素D(dictyopterisinD)和网翼藻素E(dictyopterisinE)的质量比为3:4的组合物，其特征在于：所述的组合物是从网地藻科褐藻波状网翼藻中分离得到，波状网翼藻学名是DictyopterisundulataHolmes。3.根据权利要求所述降血糖化合物网翼藻素D(dictyopterisinD)和网翼藻素E(dictyopterisinE)的质量比为3:4的组合物，其特征在于：制备方法包括步骤如下：1)制备提取物浸膏将冷冻的波状网翼藻(D.undulata)用乙醇按常规渗漉提取，得提取液，将提取液减压浓缩回收乙醇，得粗浸膏；2)分离纯化(1)将上述粗浸膏分散于水中成混悬液，将混悬液用乙醚萃取，所得萃取液浓缩得到乙醚提取浸膏；(2)将乙醚浸膏进行硅胶柱层析，依次以石油醚/丙酮和二氯甲醇/甲醇梯度洗脱，根据TLC显色合并相似流份得到12个组分(A–L)；其中组分G即石油醚/丙酮体积比8:2洗脱部分经SephadexLH-20凝胶柱层析，以二氯甲烷/甲醇体积比1:1洗脱；根据TLC显色合并相...

【专利技术属性】
技术研发人员：毛水春，冯美堂，李佳，郭跃伟，
申请(专利权)人：南昌大学，
类型：发明
国别省市：江西,36