一种在莲藕中检测苹果茎沟病毒的试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种莲藕中苹果茎沟病毒的检测试剂盒及检测方法，其包括引物ASGVF4641和ASGVR5784、ASGVF4791和ASGVR5609，M‑MLV反转录酶、M‑MLV酶反应缓冲液、dNTPs、Taq DNA聚合酶、Mg

A kit and detection method for detection of Apple stem gully virus in lotus root

The invention discloses a lotus root of Apple stem grooving virus detection kit and method, which includes ASGVR5784, ASGVF4791 and primers ASGVF4641 and ASGVR5609, M MLV reverse transcriptase and M enzyme reaction buffer, MLV dNTPs, Taq DNA polymerase, Mg

【技术实现步骤摘要】
一种在莲藕中检测苹果茎沟病毒的试剂盒及检测方法
本专利技术涉及植物病毒检测
，具体涉及莲藕中苹果茎沟病毒的检测试剂盒及检测方法。
技术介绍
莲藕(Nelumbonucifera)是睡莲科莲属多年生大型水生草本植物，原产中国和印度，有三千多年的栽培历史，生产上可分为藕莲、籽莲和花莲。莲藕富含淀粉、蛋白质、维生素、矿物质等多种营养成分，是我国南方地区的主要水生蔬菜，其栽培面积近33.3万hm2。苹果茎沟病毒(Applestemgroovingvirus，ASGV)属于乙型线状病毒科(Betaflexiviridae)发样病毒属(Capillovirus)，是常见的潜隐性植物病毒之一，可通过嫁接、种子、汁液摩擦等方式传播，能够危害蔷薇科、百合科、豆科、茄科、禾本科等多种作物。本研究首次在莲藕中分离得到ASGV的基因组序列，该序列ORF1与已报道的ASGV其他分离物的相似性在78.2-90.7％，属于一种新株系。由于目前ASGV莲藕株系无特异性抗血清，无法利用酶联免疫吸附法(ELISA)检测。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供一种莲藕中苹果茎沟病毒的检测试剂盒及检测方法。为了实现本专利本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种莲藕中检测苹果茎沟病毒的试剂盒，其特征在于，包括4条特异性引物：ASGVF4641：5’‑TTAGGTGAGAGGCTTTACAC‑3’；ASGVR5784：5’‑TGCAAAGAAGAAGGTAAAGCTC‑3’；ASGVF4791：5’‑CTATCGTCAACGTCAACC‑3’；ASGVR5609：5’‑TTCAATTCTAGCCGAGAG‑3’。

【技术特征摘要】
1.一种莲藕中检测苹果茎沟病毒的试剂盒，其特征在于，包括4条特异性引物：ASGVF4641：5’-TTAGGTGAGAGGCTTTACAC-3’；ASGVR5784：5’-TGCAAAGAAGAAGGTAAAGCTC-3’；ASGVF4791：5’-CTATCGTCAACGTCAACC-3’；ASGVR5609：5’-TTCAATTCTAGCCGAGAG-3’。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括M-MLV反转录酶、M-MLV酶反应缓冲液、dNTPs、TaqDNA聚合酶、Mg2+、PCR反应缓冲液。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括标准阳性模板。4.一种莲藕中苹果茎沟病毒的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）采用多糖多酚植物组织的裂解法提取待测样品总RNA（2）设计并合成引物，包括4条特异性引物：ASGVF4641：5’-TTAGGTGAGAGGCTTTACAC-3’；ASGVR5784：5’-TGCAAAGAAGAAGGTAAAGCTC-3’；ASGVF4791：5’-CTATCGTCAACGTCAACC-3’；ASGVR5609：5’-TTCAATTCTAGCCGAGAG-3’；（3）巢式RT-PCR①反转录合成cDNA以莲藕叶片总RNA为模板，以ASGVR5784引物，通过反转录酶为MLV，合...

【专利技术属性】
技术研发人员：贺振，陈春峰，刘娴，李良俊，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32