一种检测石斑鱼肠道微孢子虫的试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种用于检测石斑鱼肠道微孢子虫的引物对，所述引物对序列如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示。本发明专利技术还公开了一种用于检测石斑鱼肠道微孢子虫的试剂盒及其检测方法。本发明专利技术的试剂盒具有良好的特异性，且批内、批间重复性试验结果的变异系数均小于2%，具有良好的重复性；而且灵敏度大大提高，最小检出浓度为1.64×10

A kit for detection of Microspore in the intestinal tract of grouper and its detection method

【技术实现步骤摘要】
一种检测石斑鱼肠道微孢子虫的试剂盒及检测方法
本专利技术涉及微生物分子检测领域，具体涉及一种检测石斑鱼肠道微孢子虫的试剂盒及检测方法。
技术介绍
石斑鱼肠道微孢子虫(Microsporidiumsp.KR263870)，是一种细胞核内寄生虫，寄生在石斑鱼幼鱼鱼体的肠道上皮细胞中，被寄生的鱼厌食，沉于水底，鱼体严重消瘦，在肛门处可见白色粪便，经解剖后可见肠道水肿和肠壁透明。虫体暴发时引起石斑鱼幼鱼死亡率高达90％。石斑鱼肠道微孢子虫单细胞很小，仅有1.3–1.5×1.6–2.4μm，需要在高倍镜下镜检至少要1000倍左右才能看清楚，单凭肉眼无法判断。目前建立的诊断方法有电镜法、聚合酶链式反应法(PCR)等，其中电镜法仅能判断微孢子虫的有无，且操作复杂；聚合酶链式反应法(PCR)在DNA含量低的情况下不能被检测出，检测效率低，且检测结果容易出现假阳性，影响实际结果判断。上述两种检测方法都只能进行定性分析不能进行定量检测。荧光定量PCR是近年快速发展起来的一种病原分子检测技术，其优点是所需模板少，经济、快速、简便，灵敏度高以及特异性好，被广泛应用于多种疾病的检测。专利技术内容专利技术目的：本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测石斑鱼肠道微孢子虫的引物对，其特征在于，所述引物对序列如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示。

【技术特征摘要】
1.一种用于检测石斑鱼肠道微孢子虫的引物对，其特征在于，所述引物对序列如SEQIDNO：1和SEQIDNO：2所示。2.一种用于检测石斑鱼肠道微孢子虫的试剂盒，其特征在于，含有权利要求1所述的引物对的试剂盒。3.根据权利要求2所述的用于检测石斑鱼肠道微孢子虫的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括：（1）SYBRgreenI、ddH2O及权利要求1所述的引物对的混合液；（2）标准品；（3）阴性对照物。4.根据权利要求3所述的用于检测石斑鱼肠道微孢子虫的试剂盒，其特征在于，所述标准品是含有石斑鱼肠道微孢子虫基因片段的质粒载体。5.根据权利要求4所述的用于检测石斑鱼肠道微孢子虫的试剂盒，其特征在于，该基因片段的序列如SEQIDNO:3所示。6.权利要求2~4任一项所述的用于检测石斑鱼肠道微孢子虫的试剂盒在石斑鱼肠道微孢子虫的检测方面的应用。7.一种石斑鱼肠道微孢子虫的检测方法，其特征在于，所述检测方法是实时荧光定量PCR方法。8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，所述检测方...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐力文，罗丹，刘广峰，章晋勇，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院南海水产研究所，
类型：发明
国别省市：广东,44