一种侵染烟草的亚细胞定位试剂盒及其应用制造技术
A subcellular location reagent kit for infecting tobacco and its application
The invention provides a subcellular localization kit for infecting tobacco, including buffer reagent A1, reducing plant immune reaction bacteria A2, nuclear localization Agrobacterium A3 and Agrobacterium mediated A4. The kit inhibited the plant's autoimmunity by using plant resistance response inhibiting protein, enhanced the infection efficiency of Agrobacterium and enhanced the expression of exogenous target genes, making the fluorescence signal stronger and easier to observe. At the same time, because the kit contains nuclear localization control group, it can avoid contacting with toxic carcinogens in the process of DAPI nuclear dyeing, and reduce the cost of test and reduce environmental pollution.
【技术实现步骤摘要】
一种侵染烟草的亚细胞定位试剂盒及其应用
本专利技术属于农业生物技术专利
，具体涉及一种侵染烟草的亚细胞定位试剂盒及其应用。
技术介绍
植物在与外源微生物的长期斗争中，进化出了不同的防卫机制来抵御外源微生物的攻击。植物依赖包括FLS2和EFR在内的受体激酶感应细菌的入侵并激活免疫反应，包括氧爆发、MAPK级联、胼胝质的沉积、防卫反应基因的表达等等，来抵御病原物入侵。当农杆菌侵染时引起宿主自身的病原抗性反应，并且这种病原抗性反应又将是影响农杆菌转化的重要因素，一旦内源免疫反应过于强烈，转化效率就会大大降低，并且外源基因的表达量也会受到抑制。因此降低植物的内在免疫反应，将显著提高农杆菌的侵染效率，增强外源蛋白的表达。
技术实现思路
解决的技术问题：本专利技术针对烟草亚细胞定位中，采用农杆菌侵染烟草，宿主免疫反应强烈，致使侵染效率低，侵染后目的基因表达量少，在激光共聚焦显微镜下观察不明显等问题提供一种高效侵染烟草的亚细胞定位试剂盒，该试剂盒能显著提升侵染效率，增强目的基因的表达，荧光亮度强，且实验操作简单、安全。技术方案：一种侵染烟草的亚细胞定位试剂盒，包括缓冲试剂A1...
【技术保护点】
一种侵染烟草的亚细胞定位试剂盒，其特征在于：包括缓冲试剂A1、降低植物免疫反应菌液A2、核定位农杆菌菌液A3和农杆菌感受态A4。
【技术特征摘要】
1.一种侵染烟草的亚细胞定位试剂盒，其特征在于：包括缓冲试剂A1、降低植物免疫反应菌液A2、核定位农杆菌菌液A3和农杆菌感受态A4。2.根据权利要求1所述的侵染烟草的亚细胞定位试剂盒，其特征在于：所述缓冲试剂A1包括MgCl2、MES和乙酰丁香酮。3.根据权利要求2所述的侵染烟草的亚细胞定位试剂盒，其特征在于：所述缓冲试剂A1包括100mMMgCl2、100mMMES和150mM乙酰丁香酮，其中100mMMES的pH值为5.6。4.根据权利要求1所述的侵染烟草的亚细胞定位试剂盒，其特征在于：所述降低植物免疫反应菌液A2为含有FLS2和EFR沉默载体的农杆菌菌株。5.根据权利要求1所述的侵染烟草的亚细胞定位试剂盒，其特征在于：所述核定位农杆菌菌液A3为含有组蛋白Histone融合RFP的表达载体，在550nm-580nm的激发光下显红色。6.根据权利要求1所述的侵染烟草的亚细胞定位试剂盒，其特征在于：包括以下组分：缓冲试剂A150mL，其中包括25mL100mMMgCl2、25mL100mMMES和250μL150...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘同坤，任海波，陈丽，李林，张昌伟，李英，侯喜林，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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