The present invention relates to the field of Animal Microbiology preparation method, provides a calf intestinal toxemia of Clostridium perfringens beta 2 toxin toxoid vaccine, the vaccine with Clostridium perfringens and sterilized liquid white oil adjuvant added by the ratio of 1:1 to C. porringers fungus toxin in culture solution and emulsion 2 toxin toxoid culture, made of Clostridium perfringens beta 2 toxin toxoid vaccine, the vaccine has good treatment effect, immune ability, and non-toxic side effects, can be used for pregnant cows and immune newborn calves, can prevent calf intestinal toxemia.
【技术实现步骤摘要】
一种犊牛肠毒血症产气荚膜梭菌β2毒素类毒素疫苗的制备方法
本专利技术涉及动物细菌学领域，本专利技术提供了一种犊牛肠毒血症产气荚膜梭菌β2毒素类毒素疫苗的制备方法。
技术介绍
产气荚膜梭菌是一种广泛存在于自然界的革兰氏阳性厌氧菌，可产生多达17种外毒素，其中主要的有α、β1、β2、ε等毒素，根据所产毒素分为A、B、C、D、E5种毒素型。在A、B、C、D型产气荚膜梭菌中均发现了β2毒素，越来越多的研究表明：牛的肠毒血症尤其是犊牛的肠毒血症与产β2毒素的产气荚膜梭菌有关。由产气荚膜梭菌引起的牛肠毒血症的致病机理在于：牛肠道内的产β2毒素的产气荚膜梭菌大量增殖从而产生大量的β2毒素，该毒素对小肠粘膜上皮细胞具有强烈的细胞毒性，破坏肠壁，引起毒血症。因此预防该病应以控制β2毒素为重点。类毒素疫苗是用失去毒性而保留免疫原性的毒素所制成的疫苗，其可以有效的针对产气荚膜梭菌外毒素引起的疾病。然而，目前还没有针对产气荚膜梭菌β2毒素制备的类毒素疫苗，
技术实现思路
本专利技术针对现有技术存在的空白，提供了一种犊牛肠毒血症产气荚膜梭菌β2毒素类毒素疫苗及其制备方法，该疫苗以产气荚膜梭菌β...
【技术保护点】
一种犊牛肠毒血症产气荚膜梭菌β2毒素类毒素疫苗的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)、将标准菌株接种2‑5μL于血琼脂基础平板培养基上，41℃复苏36h，复苏后挑取血平板上的单菌落接种于7mL液体硫乙醇酸盐培养基，39℃增菌厌氧培养12h，得到产气荚膜梭菌菌液；将7mL产气荚膜梭菌菌液加入到100mL Gordon汤产毒培养基中，厌氧环境下43℃培养6h高效产毒，然后4℃8000rpm离心30min，取上清，用孔径0.22μm的蔡氏滤器过滤除菌，得到含β2毒素的产气荚膜梭菌外毒素培养液；(2)、在上述获得的β2外毒素培养液中加入体积比0.3％的甲醛，充分振荡混匀后置于...
【技术特征摘要】
1.一种犊牛肠毒血症产气荚膜梭菌β2毒素类毒素疫苗的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)、将标准菌株接种2-5μL于血琼脂基础平板培养基上，41℃复苏36h，复苏后挑取血平板上的单菌落接种于7mL液体硫乙醇酸盐培养基，39℃增菌厌氧培养12h，得到产气荚膜梭菌菌液；将7mL产气荚膜梭菌菌液加入到100mLGordon汤产毒培养基中，厌氧环境下43℃培养6h高效产毒，然后4℃8000rpm离心30min，取上清，用孔径0.22μm的蔡氏滤器过滤除菌，得到含β2毒素的产气荚膜梭菌外毒素培养液；(2)、在上述获得的β2外毒素培养液中加入体积比0.3％的甲醛，充分振荡混匀后置于37℃持续灭活5天，...
【专利技术属性】
技术研发人员：蔡玉梅，高晟斌，宋志刚，王晓宇，李庆雷，
申请(专利权)人：山东农业大学，
类型：发明
国别省市：山东,37
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