假马齿苋总皂苷提取物的分离纯化方法及其在制备神经系统药物中的应用技术方案

本发明专利技术提供了假马齿苋总皂苷提取物的分离纯化方法：假马齿苋药材加入80％乙醇提取，合并提取液浓缩；加入95％乙醇制成药材含量为0.311g·mL

Isolation and purification of total saponins from purslane and its application in the preparation of nervous system drugs

The invention provides a method for separation and purification of total saponins from fake purslane: the extract of fake purslane is added to 80% ethanol, and the extract is concentrated. After adding 95% ethanol, the content of medicinal herbs is 0.311g mL.

【技术实现步骤摘要】
假马齿苋总皂苷提取物的分离纯化方法及其在制备神经系统药物中的应用
本专利技术涉及中药，具体涉及中药提取物，尤其涉及假马齿苋总皂苷提取物的分离纯化方法及其在制备神经系统药物中的应用。
技术介绍
假马齿苋是玄参科植物假马齿苋Bacopamonnieri(L.)Wettst的全草，又名白花猪母菜。具有清热凉血，解毒消肿之功效。临床上还可用于治疗支气管炎、气喘等呼吸系统疾病。该植物在印度阿育吠陀医药体系(Ayurvedicsystemofmedicine)中还被认为具有增强智力和改善记忆，延缓衰老、预防痴呆，镇静、催眠，抗抑郁之功效。其标准提取物制成的制剂已在印度上市，作为治疗记忆损伤和老年痴呆的辅助药物。假马齿苋中主要含有三萜皂苷类成分，假马齿苋皂苷提取物中五个主要的皂苷成分(达玛烷型三萜皂苷化合物BacopasideI(BM28)，BacosideA3(BM37)，BacopasideII(BM29)，BacopasaponinCisomer(BM35i)及BacopasaponinC(BM35)，五个皂苷成分结构式如下：神经系统药物包括抗老年痴呆症的药物和抗忧郁药物等。痴呆是一种获得性、持续性的智能障碍综合症，是由于多种神经系统变性或缺血过程而引起的，表现为多种大脑高级功能紊乱。痴呆是老年人的常见病，随着年龄增长发病率逐渐增加。研究表明，60岁痴呆的发病率为7.0％，70岁为4.1％，80岁为13.0％，90岁为32.2％。临床上常见有阿尔茨海默病、血管性痴呆和混合性痴呆三种。各种痴呆和记忆力受损患者尤其是阿尔兹海默症(Alzheimer’sdisease，AD)和血管性痴呆(Vasculardementia，VD)患者是认知减退最为常见的疾病。当前阿尔茨海默病(AD)是痴呆的主要类型，并且是导致老年人死亡的第四大原因。随着社会老龄化，VD发病率和病死率逐年上升，在世界范围内已成为继心脏病、癌症之后的威胁人类的疾病。另一方面。随着各种社会应激因素生活节奏加快以及压力增大的影响，抑郁症呈现逐年上升的趋势。西方发达国家中终身抑郁症的发病率在6％～8％之间，随着逐步的人口老龄化，在60岁以上人群中抑郁症的发病率将高达20％～50％；且在现代高强度、快节奏生活工作方式下，在年轻人中越来越集中爆发抑郁患者。抑郁症正成为一个严重的全球性问题。目前已有众多神经系统疾病的治疗药物，包括化学药和一些复方中药，但是由于化学药的不良反应以及复方中药治疗的效果等原因，人们一直致力于寻找更好的治疗药物。因此研究来源于植物的有神经系统活性天然产物，以发现高效、低毒的药物是发现新药的有效途径。近年来的药理研究证实假马齿苋皂苷提取物具有较强的神经药理活性，可用于进一步开发成抗抑郁和治疗老年痴呆症的药物。但因为这几种成分在药材中含量较低，还需进一步纯化以满足新药开发需求。大孔吸附树脂是一类新型非离子型高分子化合物，在中药有效成分的分离纯化方面应用日益广泛。采用大孔树脂纯化假马齿苋皂苷提取物，可以保留其有效成分，除去无效杂质，提高总皂苷纯度。但是假马齿苋到目前为止尚未开发成任何形式的药物。究其原因主要是对假马齿苋的基础研究不充分，不明确其药效物质基础，亦不清楚其作用途径，导致临床应用缺乏科学的理论指导，仅依赖于传统经验。因此，需要进一步研究假马齿苋提取物的有效成分，明确假马齿苋药效成份，改进其分离纯化方法，考察其在制备药物中的应用。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于克服上述不足之处，研究设计采用大孔树脂分离纯化假马齿苋皂苷提取物，提高总皂苷含量和纯度的方法，开发假马齿苋总皂苷提取物在制备药物中的应用。本专利技术提供了假马齿苋总皂苷提取物的分离纯化方法，该方法包括下列步骤：(1)取假马齿苋药材置于提取罐中，每次加入10-15倍于药材重量的80％乙醇，提取2-3次，每次1-2h，合并提取液，减压浓缩(压力-0.6Bar、60℃)至无醇味；(2)提取液加入95％乙醇调至含醇量30％，离心，抽滤，制成药材含量为0.311g·mL-1的上样液；(3)取预处理完毕的HP-20大孔树脂，湿法装柱(径高比1∶10)，取上样液(0.5kg药材/L树脂)，用浓盐酸调至pH值为2.0，以0.5BV·h-1流速上样至完全，依次用2BV的30％乙醇(pH2.0)、5BV的40％乙醇(pH2.0)除杂，流速2.5BV/h；然后用2BV15％乙醇冲洗除酸，流速2.5BV/h，再用5BV60％乙醇洗脱，流速2.5BV/；所述HP-20大孔树脂的预处理方法为用10倍于树脂重量的95％乙醇冲洗；(4)收集洗脱液，减压蒸干(压力-0.6Bar、60℃)得假马齿苋总皂苷提取物。通过分离纯化后得到的假马齿苋总皂苷提取物中主要含有bacopasideI(BM28)，BacosideA3(BM37)，BacopasideII(BM29)，BacopasaponinCisomer(BM35i)及BacopasaponinCisomer五个三萜皂苷类化合物。总皂苷的纯度为51.19％-55.67％，总皂苷转移率为76.96％-78.29％。本专利技术的另一目的是提供了假马齿苋总皂苷提取物在制备神经系统药物中的应用。本专利技术所述神经系统药物包括治疗抑郁症药物和治疗痴呆症药物。本专利技术提供了假马齿苋总皂苷提取物在制备治疗郁症药物中的应用。本专利技术提供了假马齿苋总皂苷提取物在制备治疗痴呆症药物中的应用。本专利技术所述制备治疗痴呆症药物包括制备治疗阿尔兹海默症(Alzheimer’sdisease，AD)药物和血管性痴呆(Vasculardementia，VD)药物。本专利技术人采用小鼠FST和TST实验对从假马齿苋中分离鉴定到的50余种单体进行了单一剂量的抗抑郁活性筛选，结果表明，达玛烷型三萜皂苷化合物BacopasideI(BM28)，BacosideA3(BM37)，BacopasideII(BM29)，BacopasaponinCisomer(BM35i)及BacopasaponinC均有抗抑郁活性，其中bacopasideI(BM28)具有最强的药效作用，因此，假马齿苋总皂苷提取物可用于制备治疗抑郁症药物。本专利技术人从假马齿苋药材中分离鉴定到40余种单体成分，并从中纯化得到具有较强神经保护活性的三萜皂苷类化合物bacopasideI(BM28)，BacosideA3(BM37)，BacopasideII(BM29)，BacopasaponinCisomer(BM35i)及BacopasaponinCisomer。前期药理研究结果表明BM28对谷氨酸(L-Glutamate)和过氧化氢(H2O2)诱导的嗜铬细胞瘤细胞(PC12cells)和大鼠皮层神经元损伤具有显著的保护作用，且其保护作用具有剂量依赖性，显示了其潜在的抗老年痴呆活性，因此，假马齿苋总皂苷提取物可用于制备治疗阿尔兹海默症以及血管性痴呆的药物。本专利技术所述药物为由假马齿苋总皂苷提取物为活性成分与药用辅料组成的药物组合物。本专利技术所述药物组合物为口服制剂、注射剂或经皮肤给药制剂。本专利技术提供的假马齿苋总皂苷提取物药物为临床提供了新的治疗忧郁症和痴呆症的药物，假马齿苋总皂苷提取物作为活性成分，药效好。本专利技术药物克服了化学药的毒付作用，有较大的本文档来自技高网...

【技术保护点】
假马齿苋总皂苷提取物的分离纯化方法，其特征在于，该方法包括下列步骤：(1)取假马齿苋药材置于提取罐中，每次加入10‑15倍于药材量的80％乙醇W/V，提取2‑3次，每次1‑2h，合并提取液，减压浓缩，‑0.6Bar、60℃至无醇味；(2)提取液加入95％乙醇调至含醇量为30％，离心，抽滤，制成药材含量为0.311g·mL

【技术特征摘要】
1.假马齿苋总皂苷提取物的分离纯化方法，其特征在于，该方法包括下列步骤：(1)取假马齿苋药材置于提取罐中，每次加入10-15倍于药材量的80％乙醇W/V，提取2-3次，每次1-2h，合并提取液，减压浓缩，-0.6Bar、60℃至无醇味；(2)提取液加入95％乙醇调至含醇量为30％，离心，抽滤，制成药材含量为0.311g·mL-1的上样液；(3)取预处理完毕的HP-20大孔树脂，湿法装柱，径高比1∶10，取上样液0.5kg药材/L树脂，用浓盐酸调至pH值为2.0，以0.5BV·h-1流速上样至完全，依次用2BV的30％乙醇pH2.0、5BV的40％乙醇pH2.0除杂，流速2.5BV/h；然后用2BV15％乙醇冲洗除酸，流速2.5BV/h，再用5BV60％乙醇洗脱，流速2.5BV/；所述HP-20大孔树脂的预处理方法为用10倍于树脂重量的95％乙醇冲洗；(4)收集洗脱液，减压浓缩，-0.6Bar、60℃，得假马齿苋总皂苷提取物。2.根据权利要求1所述的假马齿苋总皂苷提取物的分离纯化方法，其特征在于，所述分离得到的假马齿苋总皂苷提取物中含有bacopasid...

【专利技术属性】
技术研发人员：张卫东，孙青，
申请(专利权)人：山东颐正达医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37