纯化蛋白质的方法技术

描述了一种用于释放可溶性或膜缔合胞内感兴趣的蛋白（ＰＯＩ）的方法，所述方法包括以下步骤：提供包含可溶性或膜缔合胞内ＰＯＩ的细胞；使所述细胞与膜提取组合物接触；并且使得所述ＰＯＩ在足以特异性地释放所述ＰＯＩ的条件下以可溶性形式从所述细胞中释放出来。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于释放胞内感兴趣的蛋白质(POI)的方法。具体地说，本专利技术涉及采用有助于释放可溶性或膜缔合胞内感兴趣的蛋白质(POI)的膜提取组合物来释放所述POI的方法。
技术介绍
回收胞内POI(例如一种酶)的传统方法一直是应用机械破碎法(Naglak等1990)，例如玻珠研磨机或以弗氏压碎器原理操作的细胞匀浆器。然而，这些机械破碎法有缺点，它们是生产能力低的耗能方法，而机械破碎所需的细胞匀浆器或相似的设备对于购买者而言是昂贵的。另外，机械方法使细胞暴露并且因此也使所提取的POI暴露于非常严酷的条件，尤其是因为大多数蛋白质将因所产生的热而变性，除非所述机械装置和/或匀浆可被有效地冷却。此外，某些细胞例如酵母细胞(例如来自汉逊酵母属(Hansenula)的酵母)难以机械破碎，因而需要经受细胞匀浆器的不止一个冲程。细胞匀浆也可能含有细胞壁碎片和DNA，这导致高粘度。这意味着将细胞碎片与所述POI分开，可能证明是困难的操作。另外，所产生的无细胞匀浆可能不仅含有胞内POI，而且也含有大量(有时为数千种)不同的胞内蛋白质和与一般细胞代谢有关的酶。这意味着所产生的无细胞匀浆可能不仅难以本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于从细胞中释放可溶性或膜缔合胞内感兴趣的蛋白（ＰＯＩ）的方法，所述方法包括以下步骤：提供包含可溶性或膜缔合胞内ＰＯＩ的细胞；使所述细胞与膜提取组合物接触；并且使得所述ＰＯＩ在足以特异性地释放所述ＰＯＩ的条件下以可溶性形式从所述细胞中释放出来。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：CL约翰森，S克耶鲁尔夫，SM马德里，H彼得森，CH普尔森，MR扎加希，
申请(专利权)人：丹尼斯科有限公司，
类型：发明
国别省市：DK[丹麦]