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含乳铁蛋白全蚕粉的生产方法技术

技术编号:1744422 阅读:248 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了含乳铁蛋白全蚕粉的生产方法,它是以杆状病毒为载体,用家蚕为生物反应器生产含乳铁蛋白全蚕粉的。应用本发明专利技术方法生产含乳铁蛋白全蚕粉,产率高,在生产和使用过程中对人畜安全无毒,适宜大批量生产和使用。以此方法生产的含乳铁蛋白全蚕粉因含有杀菌抗病毒的乳铁蛋白,故作为饲料添加剂在补充饲料蛋白的同时可起到抗病防病的作用,而且动物不会产生抗药性,可部分或全部替代饲料中的抗生素。(*该技术在2023年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及。
技术介绍
乳铁蛋白(Lactoferrin简称LF),1960年从牛乳中分离获得,它是一种铁结合性糖蛋白,分子量80KDa左右,LF具有转运铁离子和杀菌抗病毒的功效,它在乳腺中的表达量最高。其独特的作用机理引起人们的高度重视,并将其从牛奶中分离纯化后加入婴儿奶粉。全蚕粉营养价值丰富,具有一些特殊的功效,是一种优良的蛋白源,但是含有乳铁蛋白的全蚕粉目前尚无相关报导。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种能生产含乳铁蛋白全蚕粉的方法。本专利技术的包括以下步骤1)取泌乳1-21天母畜乳房乳腺腺泡,液氮冷冻研磨成粉末,提取总RNA并通过反转录得到LF-cDNA,根据乳铁蛋白基因特征设计一对各带一个酶切位点的引物,利用RT-PCR技术得到DNA,PCR产物割胶纯化后,用引物中对应的两个内切酶双酶切,定向连接入以上两个酶切过的pGEM-3Z载体,转化大肠杆菌TG-1,蓝白斑筛选阳性克隆,再接种3ml液体LB培养基,37℃摇床200rpm振荡培养至少8小时;2)将以上培养的TG-1抽提质粒,对应双酶切,割胶回收目的片段,定向克隆进转移载体pVL1393,得到重组转移载体pVL本文档来自技高网...

【技术保护点】
含乳铁蛋白全蚕粉的生产方法,其特征是包括以下步骤: 1)取泌乳1-21天母畜乳腺腺泡,液氮冷冻研磨成粉末,提取总RNA并通过反转录得到LF-cDNA,根据乳铁蛋白基因特征设计一对各带一个酶切位点的引物,利用RT-PCR技术得到DNA,PCR产物割胶纯化后,用引物中对应的两个内切酶双酶切,定向连接入以上两个酶切过的pGEM-3Z载体,转化大肠杆菌TG-1,蓝白斑筛选阳性克隆,再接种3ml液体LB培养基,37℃摇床200rpm振荡培养至少8小时; 2)将以上培养的TG-1抽提质粒,对应双酶切,割胶回收目的片段,定向克隆进转移载体pVL1393,得到重组转移载体pVL1393-LF,同时...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:汪以真许梓荣黄海青
申请(专利权)人:浙江大学
类型:发明
国别省市:86[中国|杭州]

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