抗Axin的抗体C8的制备方法技术

抗Ａｘｉｎ的抗体Ｃ８的制备方法，涉及一种抗Ａｘｉｎ的抗体Ｃ８的制备方法。提供一种效价高、特异性强、能用于进行内源Ａｘｉｎ的免疫印迹、免疫沉淀分析的抗Ａｘｉｎ的抗体Ｃ８制备方法。先用ＰＧＲ方法扩增出挪威鼠表达Ａｘｉｎ　　７５１－８３２氨基酸序列ＤＮＡ片段，并连接到原核表达载体ｐＧＳＴ　　ｐａｒａｌｌｅｌ中构建重组质粒，再转化到大肠杆菌ＢＬ２１菌株中，通过ＩＰＴＧ诱导，表达出融合有ＧＳＴ的Ａｘｉｎ片断ＧＳＴ－Ａｘｉｎ７５１－８３２；用谷胱甘肽－琼脂糖树脂纯化该抗原蛋白片断，４次免疫新西兰兔后，采血，纯化抗体血清。能快速大量获得抗原蛋白，抗体纯化方法独特，成本低，过程简单。其抗体效价高，特异性强。能检测到细胞内含量极其稀少的内源Ａｘｉｎ。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
抗Ａｘｉｎ的抗体Ｃ８的制备方法，其特征在于其步骤为：首先用ＰＣＲ的方法扩增出挪威鼠编码Ａｘｉｎ７５１－８３２氨基酸序列的ＤＮＡ片段，将该片段连接到原核表达载体ｐＧＳＴｐａｒａｌｌｅｌ中构建重组质粒，转化到大肠杆菌ＢＬ２１菌株中，通过ＩＰ ＴＧ诱导，表达出融合有ＧＳＴ的Ａｘｉｎ片断ＧＳＴ－Ａｘｉｎ７５１－８３２；然后用谷胱甘肽－琼脂糖树脂纯化该抗原蛋白片断，４次免疫新西兰兔后，采血，纯化抗体血清，得到抗Ａｘｉｎ的多克隆抗体。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：骆晶晶，贺颖，陈明谅，林圣彩，
申请(专利权)人：厦门大学，
类型：发明
国别省市：92[中国|厦门]