一种转糖基α-半乳糖苷酶基因制造技术

本发明专利技术公开了一种转糖基α－半乳糖苷酶基因，所述基因由短双歧杆菌（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　　ｂｒｅｖｅ）基因组ＤＮＡ借助ＰＣＲ扩增获得高保守ＤＮＡ片段，然后进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交获得。该基因核苷酸序列全长２２２６碱基，编码７４１个氨基酸。由该基因表达的重组酶特征为：酶为双亚基蛋白，聚合体分子量约为１６０ｋＤ，单亚基分子量约为８０ｋＤ；酶对对硝基苯酚α－Ｄ－半乳糖苷的Ｋ↓［ｍ］为０．１７ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｖ↓［ｍａｘ］为４．４３μｍｏｌ／（Ｌ.ｍｉｎ）；酶最适反应温度为３７℃，最适反应ｐＨ为５．５～６．０；酶在水解蜜二糖或棉子糖的反应体系中具有转糖基活性，反应中有转糖基产物生成；酶广泛的受糖体底物特异性，可用以合成多种α－半乳糖基寡糖及α－半乳糖苷糖缀合物。酶基因的获得，可用于基因改造获得α－半乳糖苷合成酶，从根本上提高α－半乳糖基寡糖及糖缀合物的合成效率。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种转糖基α－半乳糖苷酶基因，具有如下特征：　　　　（１）具有如ＳＥＱ　　ＩＤ　　Ｎｏ．１所示核苷酸序列，全长２２２６碱基；　　　　（２）由于遗传密码的简并性，具有不同于ＳＥＱ　　ＩＤ　　Ｎｏ．１所示核苷酸序列但与ＳＥＱ　　ＩＤ　　Ｎｏ．１所编码的氨基酸序列相同的核苷酸序列；　　　　（３）该基因编码７４１个氨基酸，序列如ＳＥＱ　　ＩＤ　　Ｎｏ．１所示。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：肖敏，赵晗，王勤鹏，王鹏，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：88[中国|济南]