一种利用酵母生产β-环糊精的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用酵母生产β－环糊精的方法，即利用基因工程技术将环糊精糖基转移酶表达固定在酿酒酵母细胞表面，然后利用表面固定有环糊精糖基转移酶的酿酒酵母细胞发酵生产β－环糊精，在分离纯化产品β－环糊精时，只需要离心去除菌体细胞和剩余底物，然后浓缩反应上清液就可得到相当纯度的β－环糊精产品。本发明专利技术的方法在固定化过程中酶活性不下降，制得的固定化酶稳定性高，可以重复利用，省去了纯化步骤；而且在生产环糊精的同时酒精的产生以及酵母对葡萄糖和麦芽糖的消耗都促进了环糊精的产生，提高了产率。本发明专利技术中所使用的酿酒酵母作为一种已经被广泛应用于食品生产的微生物，所生产的β－环糊精具有不容置疑的安全性。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种利用酵母生产β－环糊精的方法，由下述步骤组成：（１）重组表达载体的构建：克隆环糊精糖基转移酶基因，经ＥｃｏＲＩ和ＸｈｏＩ酶切后插入酵母表达载体ｐＹＤ１，命名为ｐＹＤ１／ｃｇｔ；（２）重组酵母菌株的构建：将 表达载体ｐＹＤ１／ｃｇｔ在转化效价高的大肠杆菌中扩增后，用电转化的方法将其转入酵母菌中，构建重组酵母菌株；在不含色氨酸的ＹＮＢ－葡萄糖平板上长出的菌落为阳性克隆工程菌株；（３）环糊精糖基转移酶诱导表达：将上述阳性克隆工程菌株 ，接种于ＹＮＢ－ＣＡＡ葡萄糖培养基中，２５－３２℃培养２０－３０小时，摇...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：祁庆生，王占坤，王鹏，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：88[中国|济南]