利用干酪素酶法生产复合生物活性肽的方法技术

本发明专利技术提出一种利用干酪素酶法生产复合生物活性肽的方法，本发明专利技术包括用干酪素配制酶解底物，用复合酶－胰蛋白酶和中性蛋白酶进行酶解，控制水解度达到１８％～２０％，然后将水解液经灭酶，真空减压浓缩，浓缩液经喷雾干燥，即得白～乳白色粉状复合活性肽成品。本发明专利技术生产出来的产品含有活性高的复合生物活性肽，可作为健康食品的添加剂。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种。
技术介绍
用酶解法通过蛋白酶水解蛋白是获得生物活性肽产品的常用方法。CN1208565公开了一种“乳蛋白活性肽制备方法”，CN1101471C公开了一种“大豆蛋白活性肽的制备方法”，这些方法以鲜牛奶或脱脂奶粉或大豆为原料，生产成本较高，工艺也较复杂。
技术实现思路
本专利技术的目的是提出一种利用来源广泛、价廉的干酪素原料，以复合酶解法生产生物活性强、安全性高的复合生物活性肽产品的新方法。本专利技术的工艺步骤如下(1)配制酶解底物将干酪素用4～6倍于干酪素质量的纯水溶涨，再用NaOH调PH至8.0-9.0，然后将溶液置50～60℃水浴箱中加热并搅拌至干酪素溶解，再用HCl调PH值至7.0～7.3，最后用纯水将溶液定容至溶液中干酪素质量浓度为6～10％，即为所需酶解底物；(2)在酶解底物中加入胰蛋白酶和中性蛋白酶，置于50～55℃水浴中进行酶解反应，胰蛋白酶的加入量为酶解底物中干酪素质量的0.8～1.5％，中性蛋白酶的加入量为酶解底物中干酪素质量的1.0～2.0％；(3)当水解液的水解度达到18％～20％时，灭酶；(4)灭酶后的水解液经真空减压浓缩，浓缩液经喷雾干燥，即得白～乳白色粉状复合生物活性肽成品。本专利技术特别提出的优选工艺步骤如下(1)配制酶解底物将干酪素用4倍于干酪素质量的纯水溶涨，再用浓度为6mol/L的NaOH调PH至8.0-9.0，然后将溶液置60℃水浴箱中加热并搅拌至干酪素溶解，再用浓度为1mol/L的HCl调PH值至7.2，最后用纯水将溶液定容至溶液中干酪素质量浓度为8％，即为所需酶解底物；(2)在酶解底物中加入胰蛋白酶和中性蛋白酶，置于55℃水浴中进行酶解反应4～6小时，胰蛋白酶的加入量为酶解底物中干酪素质量的1％，中性蛋白酶的加入量为酶解底物中干酪素质量的1.5％；(3)当水解液的水解度达到18％～20％时，灭酶；(4)灭酶后的水解液经真空减压浓缩，浓缩液经喷雾干燥，即得白～乳白色粉状复合活性肽成品。在上述工艺步骤中，当第(2)步工艺结束时，为达到进入下一工艺步骤的条件，需要对水解液的水解度进行测定，当测定的水解度达到18％～20％时，再进入下一步骤。水解度的测定可采用如下方法用凯氏微量定氮法测定底物溶液总氮含量，用双指示剂甲醛滴定法分别测定水解底物溶液水解前后的氨基氮含量，再通过下式计算水解度 本专利技术利用干酪素通过酶解法，控制合适的水解度，生产出来的产品含有活性高的复合生物活性肽。本专利技术由于在酶解工艺中，采用复合酶法，即用胰蛋白酶和中性蛋白酶进行复合酶解，其中的微生物类蛋白酶-中性蛋白酶，具有水解能力强，效率高，且价廉的特性，而动物类蛋白酶-胰蛋白酶具有水解产物生物活性强的特点，这两种蛋白酶的有机结合，双酶不同特性互补协同作用，较好地解决了使用单酶水解效率低，成本高的难题。水解产物经浓缩干燥后，即成安全性高，生物活性强的人或动物的免疫增强剂，可作为健康食品的添加剂。本专利技术的技术方案，其生产原料来源丰富、廉价，工艺简单，条件温和，不污染环境，便于工业化生产。具体实施例方式(1)酶解底物的配制干酪素80g，加蒸馏水320ml溶涨，用6mol/L NaOH调PH至8.0-9.0，加温至60℃使干酪素溶解，再用1mol/L HCl调PH至7.2，最后定容至1000ml。(2)酶解胰蛋白酶0.8g，中性蛋白酶1.2g，均匀地溶解于制备好的底物溶液中(边加边缓慢搅拌至匀)。酶解液于55℃恒温水浴反应6小时(反应过程经常搅动水解物或自动搅拌50次/分钟)。水解结束时，对水解度测定用微量定氮法测定底物总氮。水解结束时，用凯氏微量定氮法测定底物溶液总氮含量，用双指示剂甲醛滴定法分别测定底物溶液中水解前后氨基氮的含量，再通过下式计算水解度。 当水解液的水解度为18～20％时为合格，即可进入下一步骤。(3)灭酶将反应温度升至80℃，维持20分钟灭酶活，再冷却。(4)灭酶后的水解液经真空减压浓缩，浓缩液经喷雾干燥，即得白～乳白色粉状复合活性肽成品。权利要求1.一种，其特征在于工艺步骤如下(1)配制酶解底物将干酪素用4～6倍于干酪素质量的纯水溶涨，再用NaOH调PH至8.0-9.0，然后将溶液置50～60℃水浴箱中加热并搅拌至干酪素溶解，再用HCl调PH值至7.0～7.3，最后用纯水将溶液定容至溶液中干酪素质量浓度为6～10％，即为所需酶解底物；(2)在酶解底物中加入胰蛋白酶和中性蛋白酶，置于50～55℃水浴中进行酶解反应，胰蛋白酶的加入量为酶解底物中干酪素质量的0.8～1.5％，中性蛋白酶的加入量为酶解底物中干酪素质量的1.0～2.0％；(3)当水解液的水解度达到18％～20％时，灭酶；(4)灭酶后的水解液经真空减压浓缩，浓缩液经喷雾干燥，即得白～乳白色粉状复合活性肽成品。2.根据权利要求1所述的，其特征在于所述的工艺步骤为(1)配制酶解底物将干酪素用4倍于干酪素质量的纯水溶涨，再用浓度为6mol/L的NaOH调PH至8.0-9.0，然后将溶液置60℃水浴箱中加热并搅拌至干酪素溶解，再用浓度为1mol/L的HCl调PH值至7.2，最后用纯水将溶液定容至溶液中干酪素质量浓度为8％，即为所需酶解底物；(2)在酶解底物中加入胰蛋白酶和中性蛋白酶，置于55℃水浴中进行酶解反应4～6小时，胰蛋白酶的加入量为酶解底物中干酪素质量的1％，中性蛋白酶的加入量为酶解底物中干酪素质量的1.5％；(3)当水解液的水解度达到18％～20％时，灭酶；(4)灭酶后的水解液经真空减压浓缩，浓缩液经喷雾干燥，即得白～乳白色粉状复合活性肽成品。3.根据权利要求1或2所述的，其特征在于在第(2)步工艺结束时，先对水解液的水解度进行测定，当测定的水解度达到18％～20％时，再进入下一步骤，水解度的测定方法如下用凯氏微量定氮法测定底物溶液总氮含量，用双指示剂甲醛滴定法分别测定水解底物溶液水解前后的氨基氮含量，再通过下式计算水解度全文摘要本专利技术提出一种，本专利技术包括用干酪素配制酶解底物，用复合酶—胰蛋白酶和中性蛋白酶进行酶解，控制水解度达到18％～20％，然后将水解液经灭酶，真空减压浓缩，浓缩液经喷雾干燥，即得白～乳白色粉状复合活性肽成品。本专利技术生产出来的产品含有活性高的复合生物活性肽，可作为健康食品的添加剂。文档编号C12P21/00GK1814777SQ20051010190公开日2006年8月9日 申请日期2005年12月7日 优先权日2005年12月7日专利技术者许国焕, 吴月嫦, 舒美艳 申请人:广东省微生物研究所本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用干酪素酶法生产复合生物活性肽的方法，其特征在于工艺步骤如下：　　　　（１）配制酶解底物：将干酪素用４～６倍于干酪素质量的纯水溶涨，再用ＮａＯＨ调ＰＨ至８．０－９．０，然后将溶液置５０～６０℃水浴箱中加热并搅拌至干酪素溶解，再用ＨＣｌ调ＰＨ值至７．０～７．３，最后用纯水将溶液定容至溶液中干酪素质量浓度为６～１０％，即为所需酶解底物；　　　　（２）在酶解底物中加入胰蛋白酶和中性蛋白酶，置于５０～５５℃水浴中进行酶解反应，胰蛋白酶的加入量为酶解底物中干酪素质量的０．８～１．５％，中性蛋白酶的加入量为酶解底物中干酪素质量的１．０～２．０％；　　　　（３）当水解液的水解度达到１８％～２０％时，灭酶；　　　　（４）灭酶后的水解液经真空减压浓缩，浓缩液经喷雾干燥，即得白～乳白色粉状复合活性肽成品。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：许国焕，吴月嫦，舒美艳，
申请(专利权)人：广东省微生物研究所，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]