链球菌荚膜多糖的纯化制造技术

一种无乳链球菌荚膜多糖的纯化方法，其中首先用醇类和钙盐的水性混合物处理糖，然后用阳离子去污剂沉淀。该方法可在３天内完成，产率约为６０％。其无需ＤＮＡ酶、ＲＮＡ酶和／或蛋白酶处理。该方法获得的糖中蛋白质污染极低并且２８０ｎｍ的吸光度极低。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及纯化细菌荚膜多糖的领域，特别是无乳链球菌(Streptococcusagalactiae)的那些荚膜多糖，特别是制备疫苗所用的荚膜多糖。
技术介绍
细菌荚膜糖已用于抗有荚膜细菌的疫苗多年。然而，由于糖是不依赖T细胞的抗原，它们的免疫原性不佳。与运载体缀合能将不依赖T的抗原转化成依赖T的抗原，从而增强记忆反应并产生保护性免疫力。因此，最有效的糖疫苗以糖缀合物为基础，原型缀合物疫苗能抵御乙型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)(“Hib”)。 已描述其缀合物疫苗的另一种细菌是无乳链球菌，也称为“B群链球菌”，或简称为“GBS”。Dennis Kasper及同事从事了该项工作的大部分，见例如参考文献1-9的文件。 糖疫苗的起点是糖自身，它通常纯化自靶细菌。参考文献2和10详述了纯化GBS糖的Kasper方法，该方法包括细菌培养后的以下基本步骤过滤除菌；用10kDa截断值的膜超滤；加入乙醇至含量为30％以沉淀污染物；将乙醇含量增加至80％过夜沉淀GBS糖；收集干燥沉淀物；依次用RNA酶、DNA酶和链霉蛋白酶处理；用氢氧化钠处理；透析；DEAE本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种纯化无乳链球菌荚膜多糖的方法，包括以下步骤：（ａ）用水性金属阳离子和醇类处理含有链球菌蛋白、核酸和荚膜多糖的混悬液以沉淀核酸和蛋白质；（ｂ）分离沉淀的物质与水性物质；和（ｃ）用阳离子去污剂处理水性物质以沉淀荚膜多糖。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：P科斯坦蒂诺，
申请(专利权)人：诺华疫苗和诊断有限公司，
类型：发明
国别省市：IT[意大利]