重组人源酪蛋白巨肽制备方法技术

本发明专利技术采用ＤＮＡ重组技术，根据大肠杆菌偏爰密码，设计、合成了人源酪蛋白巨肽（ｈＣＭＰ）编码基因并由ＢａｍＨ　　Ｉ和Ｓａｃ　　Ｉ定向克隆进ｐＥＴ２８ａ（＋）。筛出阳性克隆之后，挑取一个单菌落对其发酵条件和产物分离纯化工艺进行优化处理。当菌体密度ＯＤ↓［６００］在１．０左右，加入诱导剂ＩＰＴＧ达０．５ｍＭ／Ｌ，３０℃。诱导８小时目标蛋白合成达到高峰，且多数定位于细胞周质和细胞质中，包含体内仅有少量。粗蛋白采用Ｎｉ－螯合亲和层析进行初分，ＤＥＡＥ－ｓｅｐｈｅｒｏｓｅ离子交换柱纯化，经重组肠激酶酶切后获得ｒｈＣＭＰ。由于它富含支链氨基酸和必需氨基酸，适合作为各种肝病、肝癌以及老弱体虚者的营养液以及用作运动员等的口服液。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种重组人源酪蛋白巨肽的制备方法，其特征在于，采用基因工程菌发酵法生产，而不是从天然存在的酪蛋白中酶切制取。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈劲春，刘方杰，廖亮，
申请(专利权)人：北京化工大学，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]