一种海参胶原蛋白活性肽的制备方法，其特征在于将海参去除内脏和内壁肌肉层，洗净，粉碎；加入４０－８０％酒精水溶液浸提３－７ｄ；离心，所得沉淀物用清水反复洗涤；加入０．０５－０．３Ｍ ＮａＯＨ水溶液浸泡１０－４８ｈ；离心，所得沉淀物用清水反复洗涤至ｐＨ中性；向沉淀物中加入去离子水，在搅拌下，加入复合风味蛋白酶酶解２－６ｈ，酶解温度为４５－５５℃，ｐＨ为７－８，然后灭酶；酶解液经过离心后，上清液采用超滤膜分离；收集分子量≤６ＫＤａ的组分进行脱色，脱盐，真空浓缩，冷冻干燥。本发明专利技术的工艺步骤简单，所述海参胶原蛋白活性肽具有强抗氧化活性，可用于制备美容功能食品、美容饮料或化妆品。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种海参加工技术，尤其是涉及一种海参胶原蛋白活性肽的制备方法和在制 备美容功能食品、美容饮料或化妆品中的应用。
技术介绍
水产动物胶原蛋白的丌发和应用已引起了广泛重视，从鱼皮、鱼鳞中制备胶原蛋白及其 制品已申请了多项专利技术专利(CN 1749296A; CN 1629192A; CN 1749275A; CN 1814782A ; CN 1629191A; CN 1560270A; CN 1582771A; CN 101061827A)。另外，中国专利技术专利CN 1740199A和CN 101003827A还公开了利用海星壳和鱿鱼皮制备胶原蛋白肽的方法。通过蛋白 酶定向水解得到的胶原蛋白活性肽，具有特殊的生理功效，主要体现在免疫调节、抗氧化、 降血压、降血脂、抑制肿瘤、促进皮肤代谢和胶原蛋白合成等方面。海参是重要的海洋食物和药物资源。全世界有1000多种海参，其中40多种可供食用。 近年来，我国海参养殖业发展极快，海参年产量已超过6万吨。因此，亟待进一步开发海参 的高值化加工技术。海参体壁含有结构独特的活性物质如海参胶原蛋白、海参多糖、海参皂 苷等。药理实验证明，海参具有抗肿瘤、提高免疫功能、降血脂、抗凝血、抗动脉粥样硬化 等多种生理活性。目前，国内外对海参活性成分的研究和开发主要集中在海参多糖和海参皂 苷等方面。海参胶原蛋白含量占海参体壁粗蛋白的60%以上，有关海参胶原蛋白类型和理化 性质的研究已有报道(Comp Biochem Physiol, 1995, 112A:463—478; Food Chemistry and Toxicology, 2002, 67(4): 1319-132:水产学报，2006, 4:549—553),中国专利技术专利CN 101215315A 也公开了一种在低温下(0-25'C)利用胃蛋白酶促溶提取海参胶原蛋白的方法。与胶原蛋， 相比，胶原蛋白肽具有更易吸收和高生理活性等特点。有关海参多肽的研究已有报道，目前 已公开的专利技术专利有CN 1858222A和CN 101191139A。这些研究中所述的海参多肽是一种至 少包括海参皂苷、蛋白多肽和胶原多肽等活性物质的混合物。有关海参胶原蛋白活性肽尚未 见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种海参胶原蛋白活性肽的制备方法及其在制备美容功能食品、 美容饮料或化妆品中的应用，以填补已有海参加工技术的上述不足。一种海参胶原蛋白活性肽的制备方法，其特征在于将海参去除内脏和内壁肌肉层，洗净，粉碎；在室温下，加入体积百分数为40-80%酒精水溶液浸提3-7d;离心，所得沉淀物用清 水反复洗涤；加入0. 05-0. 3M NaOH水溶液浸泡10-48h;离心，所得沉淀物用清水反复洗涤 至pH中性；向沉淀物中加入去离子水，在搅拌下，加入复合风味蛋白酶酶解2-6h,酶解温 度为45-55。C， pH为7-8;然后，在90-IOO'C下灭酶4-10min;酶解液经过离心后，上清液 采用超滤膜分离；收集分子量《6 KDa的组分进行脱色，脱盐，真空浓縮，冷冻干燥，得到 海参胶原蛋白活性肽粉末。上述的海参胶原蛋白活性肽在制备美容功能食品、美容饮料或化妆品中的应用。 本专利技术的海参胶原蛋白活性肽制备方法的优点在于利用乙醇和强碱溶液处理海参，有 效地去除了海参脂质和杂蛋白，制得的海参胶原蛋白活性肽纯度高；采用兼具内切酶和外切 酶作用特点的复合风味蛋白酶酶解海参体壁，操作简单，制得的海参胶原蛋白活性肽中3-15 肽为90-98% (重量百分数)，具有显著的抗氧化性，且可溶性好，吸收性高，无异味和苦味。另外，本专利技术还提供了一种可供综合提取海参生物活性物质的途径海参的酒精浸提液可用 于制备海参皂苷；利用超滤膜得到的分子量大于6kDa的酶解液可用于制备海参多糖。同时， 提取完生物活性物质后的海参也可用于制备海参胶原蛋白活性肽，可使海参得到充分的高值 化加工利用。附图说明附图1为本专利技术制得的海参胶原蛋白活性肽分子量分布的HPLC图谱。附图2为光老化模型对照小鼠皮肤的组织学结构图。附图3为使用本专利技术制得的海参胶原蛋白活性肽的光老化模型小鼠皮肤的组织学结构图。具体实施例方式将lKg新鲜海参除去内脏和内壁肌肉层，并洗净泥沙，粉碎。在室温条件下，加入5L80M (体积百分数，下同)的酒精水溶液浸泡5d，浸泡期间每天换液l次，以除去包括海参皂苷 在内的脂质成分。5000转/min离心30min，除去上清液，将所得沉淀物用清水反复洗涤。加 入6倍体积的0. 1M NaOH水溶液搅拌24h，以除去杂蛋白。5000转/min离心30min，除去上 清液,将所得沉淀物用清水反复洗涤至pU中性。向沉淀物中加入20倍体积的去离子水，并预 热至5(TC，在恒温搅拌下，加入10g复合风味蛋白酶酶解4h。然后，加热反应体系，在95 °C下灭酶5 min。将酶解液冷却至室温，8000转/min离心30min，收集上清液。将上清液 通过截留分子量为6 KDa的超滤膜超滤，收集分子量《6 KDa的组分进行脱色、脱盐、真空 浓縮、冷冻干燥，得到16.6g海参胶原蛋白活性肽粉末。经分析，本海参胶原蛋白活性肽的 分子量为200-1700Da (见附图l)，氨基酸组成中疏水性氨基酸总量占总氨基酸量的56%。本实施例中，所述的新鲜海参可改为干海参、提取完生物活性物质后的海参，均能得到 类似的效果。通过本专利技术制备的海参胶原蛋白活性肽得率为1-25%，分子量为200-1800Da， 氨基酸组成中疏水性氨基酸含量为55-70% (重量百分数)。本专利技术中所述的80%的酒精水溶液浸泡5d可改用40-80%的酒精水溶液浸泡3-7d ;所 述加入6倍体积的0. 1M Na0H水溶液搅拌24h,可改用加入5-40倍0. 05-0. 3 M Na0H水溶液 或0. 05-0. 3 M K0H水溶液搅拌10-48h;所述向沉淀物中加入20倍体积的去离子水，可改为 加入6-30倍体积的去离子水；所述的复合风味蛋白酶用量为海参重量的1-5%，酶解时间为 2-6 h，酶解温度均为45 — 50。C， pH为7. 0_8. 0，在90-10(TC下灭酶4-10rain;所述的离心 速度为5000_ 10000转/min,离心时间为20-60min。本专利技术制得的海参胶原蛋白活性肽可作为美容活性成份，与其他辅料制成美容功能食品、 美容饮料或化妆品。一.海参胶原蛋白活性肽的美容和护肤作用皮肤衰老是由内源性和外源性等多种因素引起的复杂过程。其中紫外线的作用是最主要 和最突出的，称为光老化。紫外线辐照可在皮肤内产生多种自由基，自由基攻击生物膜中的 多不饱和脂肪酸引发脂质过氧化作用，并形成脂质过氧化物。脂质过氧化物使胶原蛋白多肽 链间共价交联程度增加，透明质酸解聚，导致胶原蛋白溶解度降低，胶原蛋白含量减少，皮 肤出现松弛、皱缩、粗糙、无光泽衰老现象。因此，减少自由基的生成能延缓皮肤衰老，起 到美容护肤作用。黑色素在防御紫外线对皮肤损伤的过程中起了重要作用。但细胞中黑色素生成过度或大 量累积，将引起皮肤出现雀斑、老年斑和其他色素沉着。黑色素的生成过程与自由基途径相 偶联。因此，清除自由基可下调紫外线对黑色素生成的诱导作用，起到美白本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种海参胶原蛋白活性肽的制备方法，其特征在于将海参去除内脏和内壁肌肉层，洗净，粉碎；在室温下，加入体积百分数为４０－８０％酒精水溶液浸提３－７ｄ；离心，所得沉淀物用清水反复洗涤；加入０．０５－０．３Ｍ ＮａＯＨ水溶液浸泡１０－４８ｈ；离心，所得沉淀物用清水反复洗涤至ｐＨ中性；向沉淀物中加入去离子水，在搅拌下，加入复合风味蛋白酶酶解２－６ｈ，酶解温度为４５－５５℃，ｐＨ为７－８；然后，在９０－１００℃下灭酶４－１０ｍｉｎ；酶解液经过离心后，上清液采用超滤膜分离；收集分子量≤６ＫＤａ的组分进行脱色，脱盐，真空浓缩，冷冻干燥，得到海参胶原蛋白活性肽粉末。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王静凤，薛长湖，李兆杰，薛勇，王玉明，王奕，
申请(专利权)人：中国海洋大学，
类型：发明
国别省市：95[中国|青岛]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。