一种快速从抗辐射菌中提取总RNA的方法技术

本发明专利技术涉及一种快速从抗辐射菌中提取总ＲＮＡ的方法，该方法包括以下步聚：１）材料：指数生长期的抗辐射菌Ｄｅｉｎｏｃｏｃｃｕｓ　ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ；２）提取总ＲＮＡ：裂解：加入５００μＬ细胞裂解液，涡旋混匀；加入１２０－２００μＬ　５０ｍｇ／ｍＬ溶菌酶，５０℃保温１５分钟；抽提：加入１ｍＬ　Ｅｚｏｌ，室温裂解１５分钟；加入２００μＬ氯仿，离心，取上清，然后加入１．５－２．５倍的异丙醇沉淀；样品的清洗和保存：清洗ＲＮＡ样品后加入ＤＥＰＣ水溶解，在－８０℃下保存；３）ＲＮＡ质量的检检测：根据所得数据和电泳结果，表明所得总ＲＮＡ的纯度高、产率高、完整性好。本发明专利技术有益的效果：本发明专利技术实验过程快速、简洁、重复性好。该方法也适合于细胞壁结构复杂的细菌的总ＲＮＡ的提取。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
中提取RNA的方法，主要是一种快速从抗辐射菌中提取总RNA的方法，适用 于此类细胞壁结构复杂的细菌的总RNA的提取。
技术介绍
抗辐射菌"ey/wcocc^ ^^2'o^^朋s是一种革兰氏阴性的非孢子菌，对电离辐射、干燥、紫外线、强 氧化剂和一些化学诱变剂有着极强的抗性。自从抗辐射菌被发现以来，就受到生物、医学和环境工程等领 域的极大关注，纷纷从基因组学、蛋白组学水平对其进行研究。当前对小分子RNA的研究是生物学界的一 项热点，要从这方面研究抗辐射菌Zfe/'"ococciW raA'ofl^i^/ ^,如何提取高质量的总RNA是关键。当前提取组织样本中的总RNA (核糖核酸)的基本方法主要有Trizol (RNA提取试剂)试剂盒、SDS (十二烷基硫酸钠)法、异硫氰酸胍法、CTAB (十六垸基三甲基溴化铵)法、苯酚法等。要提取组织样品中的总RNA,如何充分裂解组织样品的细胞壁是关键。对于动植物组织样本， 一般采取液氮研磨的方式来帮助裂解组织；而对于一般的细胞和细菌样本，则采用直接加入Trizol等RNA提取剂提取。抗辐射菌"w7wcocc"s ra^o本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种快速从抗辐射菌中提取总ＲＮＡ的方法，其特征在于：包括以下步骤：　１）材料：指数生长期的抗辐射菌；　２）ＲＮＡ的提取：裂解：加入５００μＬ细胞裂解液，涡旋混匀；加入１２０－２００μＬ　５０ｍｇ／ｍＬ溶菌酶，５０℃保温１５分钟；抽提：加入１ｍＬ　Ｅｚｏｌ，室温裂解１５分钟；加入２００μＬ氯仿，离心，取上清，然后加入１．５－２．５倍的异丙醇沉淀过夜；样品的清洗和保存：清洗ＲＮＡ样品后加入ＤＥＰＣ水溶解，在－８０℃下保存。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王星星，郭江峰，丁先锋，徐根明，
申请(专利权)人：浙江理工大学，郭江峰，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]