深海沉积物总基因组的抽提方法技术

深海沉积物总基因组的抽提方法，包括样品的处理和ＤＮＡ的抽提。用无菌人工海水基本盐溶解离心收集的深海沉积样品，向实验样品中加入高浓度细胞裂解液，在沸水浴中裂解细胞，加入酚／氯仿／异戊醇混合液离心，重复抽提，收集上清液；上清液用无水乙醇沉淀，离心收集沉淀；用乙醇洗涤沉淀物，沉淀物经真空干燥，溶解沉淀，即为基因组ＤＮＡ提取液。本发明专利技术运用微生物学、生物化学、分子生物学、物理学和化学的原理，以解决针对生境特殊的深海微生物的总基因组ＤＮＡ提取过程中存在的效率低、通用性差、产率低、花费高、样品耗量大等问题，从而提高深海样品中ＤＮＡ的产率和种类数量，使其分子生态学研究结果更全面，更准确。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
深海沉积物总基因组的抽提方法，其特征在于：包括：１）样品的处理：用无菌人工海水基本盐溶解收集的深海沉积样品，混匀后收集上清液，对沉积物重复溶解洗涤，收集上清液；上清液置于离心机中高速离心，收集菌体等颗粒物质；菌体用灭菌磷酸盐缓冲液洗 涤、离心除去杂质，收集到的沉积物为样品；２）ＤＮＡ的抽提：①向样品中加入高浓度细胞裂解液，充分混匀，放入沸水浴中８－１５ｍｉｎ；②转入５５－６２℃水浴中水浴３０ｍｉｎ以上；③随后转入７２℃水浴中水浴３０ｍｉｎ以上；④加入酚／氯仿／异 戊醇混和液，混匀，在室温下静置１０ｍｉｎ左右，离心，重复抽提，收集上清液；⑤上清液用－２０℃至４℃的无水...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：黄菊芳，曾乐平，童建斌，杨宇，邱冠周，
申请(专利权)人：中南大学，
类型：发明
国别省市：43[中国|湖南]