猪繁殖与呼吸综合征二价重组腺病毒疫苗及其制备方法技术

本发明专利技术公开了猪繁殖与呼吸综合征二价重组腺病毒疫苗及其制备方法，属于生物疫苗制备技术领域。该疫苗可通过在ＰＲＲＳＶ　ＧＰ５和Ｍ蛋白之间插入一具有自我裂解的ＦＭＤＶ　２Ａ基因相连接，构建成ＧＰ５－２Ａ－Ｍ融合蛋白基因，并与腺病毒骨架载体ｐＡｄＥａｓｙ－１同源重组，经酶切后，转染ＨＥＫ－２９３Ａ细胞，得重组腺病毒ｒＡｄ－ＧＰ５－２Ａ－Ｍ，经纯化、扩增等工艺、步骤制备成二价重组腺病毒疫苗而获得。本发明专利技术构建的聚合蛋白ＧＰ５－２Ａ－Ｍ在表达后即自我裂解为ＧＰ５和Ｍ蛋白，发挥出ＧＰ５的病毒中和与Ｍ蛋白的免疫功能；其疫苗效价稳定，毒价在１０↑［１０．４３］ＴＣＩＤ↓［５０］／１．０ｍｌ，兼有常规弱毒疫苗的复制特性和灭活疫苗的安全性；可在猪繁殖与呼吸综合征的防治工作中推广应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物疫苗
，尤其属于对猪繁殖与呼吸综合征进行免疫保 护的二价重组腺病毒疫苗及其制备方法。
技术介绍
猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的，以妊娠母猪流产、死胎、 弱仔等繁殖障碍及仔猪的呼吸道征状和高死亡率为特征的传染病。自1987年在北美首次报道以来，至今几乎扩散到全球所有养猪业发达的国 家和地区，给养猪业及其产品贸易造成了巨大的经济损失，已成为养猪业的主 要病毒性疾病之一。我国于1995年底爆发该病，随后迅速蔓延到全国大部分省 份。近年来PRRS疫情又有加重趋势，且混合感染和持续性感染状况严重。目前 用于预防PRRS的疫苗主要是传统疫苗一弱毒苗和灭活疫苗。尽管弱毒苗能提供 较好的免疫保护，但存在毒力返强和散毒的危险；而灭活苗诱导产生的抗体水平 很低，且极不稳定。因此，研制更安全、更有效的疫苗来预防和控制该病的发 生与流行已迫在眉睫。PRRSV是一种单股正链的RNA病毒，属于套式病毒目(Nidovirales)动脉 炎病毒科(Ar本文档来自技高网...

【技术保护点】
猪繁殖与呼吸综合征二价重组腺病毒疫苗，其特征在于：该疫苗可通过在ＰＲＲＳＶ　ＧＰ５和Ｍ蛋白之间插入一具有自我裂解的ＦＭＤＶ　２Ａ基因相连接，构建成ＧＰ５－２Ａ－Ｍ融合蛋白基因，并与腺病毒骨架载体ｐＡｄＥａｓｙ－１同源重组，将重组病毒ＤＮＡ经酶切，转染ＨＥＫ－２９３Ａ细胞后，得重组腺病毒ｒＡｄ－ＧＰ５－２Ａ－Ｍ，经腺病毒纯化、扩增等工艺、步骤，制备成二价重组腺病毒疫苗而获得。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘光清，云涛，倪征，余斌，陈柳，华炯钢，李双茂，
申请(专利权)人：浙江省农业科学院，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]