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一种永生化猪肝细胞大规模培养的方法技术

技术编号:1737785 阅读:238 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种永生化猪肝细胞大规模培养的方法,包括将收集的永生化猪肝细胞接种至转瓶中,经三层转瓶培养系统中旋转培养,用1.5-2.0%浓度的海藻酸钠溶液调整永生化猪肝细胞的浓度为1-2.5×10↑[6]个/mL;再调整浓度后得到的永生化猪肝细胞,采用一步法海藻酸-壳聚糖制备永生化猪肝细胞微囊;本发明专利技术还公开了一种微囊化永生化猪肝细胞。本发明专利技术提供的微囊化永生化猪肝细胞,可作为肝细胞源应用于生物型人工肝或肝细胞移植,本发明专利技术制备出的抗HCMV gBn1抗体,其优点为特异性强、灵敏度高。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种永生化猪肝细胞大规模培养的方法,其特征依次包括以下步骤: (1)将收集的永生化猪肝细胞接种至含有10%胎牛血清的180-250ml DMEM的Bellco转瓶中,置于37℃、5%CO↓[2]的3L三层转瓶培养系统中旋转培养,转速为1转/分;待细胞长满汇合后,永生化猪肝细胞经过消化、收集、离心、弃上清后,制成细胞悬液,计数细胞活率;用1.5-2.0%浓度的海藻酸钠溶液调整永生化猪肝细胞的浓度为1-2.5×10↑[6]个/mL,冰浴中备用; (2)在无菌环境下进行,用步骤(1)中调整浓度后得到的永生化猪肝细胞,采用一步法海藻酸-壳聚糖制备永生化猪肝细胞微囊;将永生化猪肝细胞微囊转移至Bellc...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:李兰娟潘小平杜维波喻成波吕国良虞晓鹏章益民
申请(专利权)人:浙江大学
类型:发明
国别省市:86[中国|杭州]

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