肽、抗肽抗体以及用它们来诊断和治疗淀粉样蛋白相关疾病的方法技术

本发明专利技术提供具有至少２个氨基酸并且不多于１５个氨基酸的肽。所述肽包含氨基酸序列Ｘ－Ｙ或Ｙ－Ｘ，其中Ｘ是芳香族氨基酸，Ｙ是除甘氨酸以外的任何氨基酸。本发明专利技术还提供含有这样的肽的药物组合物和试剂盒，以及通过这些来诊断和治疗淀粉样蛋白相关疾病的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】肽、抗肽抗体以及用它们来诊断和治疗 淀粉样蛋白相关疾病的方法M舰鍵B月錢本专利技术涉及可用于诊断、预防和治疗淀粉样蛋白相关疾病，如n 型糖尿病和阿尔茨海默病的肽和抗该肽的抗体.淀粉样物质沉积(也称作淀粉样斑块形成)是多种不相关的病理 状况，包括阿尔茨海默病、朊病毒相关脑病、n型糖尿病、家族性淀 粉样变性和轻链淀粉样变性的主要特征.淀粉样物质由坚硬的、不分支的长度不定的蛋白原纤维的致密网 络系统组成，蛋白原纤维直径从约8oA到ioo A.淀粉样原纤维含有 反平行或平行P-折叠排列的多肽链核心结构，所述核心结构的长轴垂直于原纤维的长轴.已经在体内筌定出大约二十种淀粉样原纤维蛋白并且这些蛋白和 特定疾病相关.这些蛋白间很少有或没有序列同源性，然而淀粉样原 纤维的核心结构基本相同.淀粉样原纤維的这种共有的核心结构以及 淀粉样蛋白沉积物中共有物质的存在提示表征淀粉样物质的特定形式 的数据也可以与淀粉样物质的其它形式相关，那么所述数据就可以用 于开发抗淀粉样蛋白相关疾病如II型糖尿病、阿尔茨海默氏痴呆或 病和朊病毒相关脑病的药物的模板设计.而且，淀粉样沉积在体内看起来并不是静止不变的，而是动态地 更替，如杲原纤维形成停滞，淀粉样沉积甚至能够消退.那么，针对抑制淀粉样多肽的生成或者抑制淀粉样变性而设计的 疗法可能有助于治疗淀粉样蛋白相关疾病.抑制淀粉样多肽生成-直接抑制淀粉样多肽的生成例如可以通过 使用反义寡核苷酸来实现，如应用抗人胰岛淀粉样多肽信使RNA (mRNA)的反义寡核苷酸.在体外实验中，反义寡核苷酸的引入或抗胰岛淀粉样多肽mRNA的反义互补DNA的表达能提高细胞中胰乌素mRNA和蛋白 质含重，这证明了这种方法的潜在有效性Kulkarni etal. (1996) J. Endocrinol. 151:341—Novials et al. (1998) Pancreas 17:182-6].然而，还没有实验结果已经证明这种反义分子在体内的 有效性.抑制淀粉样原纤维形成-淀粉样蛋白，包括胰烏淀粉样蛋白，含 有潜在的穗定或保护性物质，例如血清淀粉样蛋白P成分、栽脂蛋白 E和基底膜蛋白聚糖.阻断它们与发展中的淀粉样原纤维结合能够抑 制淀粉样蛋白生成,如 同能用抗致淀粉样蛋白生成(a迈yloidogenic)蛋白某些部分的特异 性抗体来治疗[Solomon et al. (1997) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94:4109-12.如下总结了对工程化去淀粉样结构稳定性的药物当前所做的尝试.去穗定化合物-硫酸肝素已被认为是所有淀粉样蛋白中的一种成 分，并且参与炎症相关的淀粉样蛋白诱导的最早阶段.Kisilevsky及 其同事(Nature Med. 1: 143-148, 1995 )描述了低分子量阴离子橫 酸或硖酸化合物来干扰硫酸肝素与炎症相关的淀粉样前体和阿尔茨海 默病(AD)的p-肽间相互作用的用途.硖酸肝素特异地影响可溶性淀 粉样蛋白前体(SAA2)采用更多的p-折叠结构，而这种结构是淀粉样 蛋白折叠模式的特征.经电子显微镜监测，这些折离子磺酸或碟酸化 合物表现出可以抑制肝素引起的A(3-纤维加速形成并且能够在体外解 离预先形成的原纤维.而且，在急性和慢性模型中，这些化合物基本 体内抑制了小鼠脾炎症相关的淀粉样进展.然而，最强效的化合物[即 聚橫酸乙酹表现出急性毒性.在另一种化合物IDOX(蒽环类抗生素4， -硖-4，-脱氣-阿審素)中也观察到相似毒性，免疫球蛋白轻链淀粉样 变性(AL)患者中观察到它能诱导淀粉样蛋白的重吸收〖Merlini et al. (1995) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92:2959-63.去穗定抗体-抗P-淀粉样蛋白的羊克隆抗体已显示可在体外有效 地解聚P-淀粉样斑块并能阻止p-淀粉样斑块形成(U.S. Pat. No. 5, 688, 561 ).然而，还没有实验结果证明这种抗体在体内的有效性.去稳定肽-加入破坏(3-折叠结构的合成肽("p-折叠破坏肽"("p-sheet breaker"))能解离原纤维并且能阻止淀粉样变性[Soto et al. (1998) Nat. Med. 4: 822-61 ，这一发现从临床角度来看是 极有发展前景的.筒言之，具有五个残基的肽在体外抑制淀粉样(3-蛋 白原纤维生成、解离预先形成的纤维并在细胞培养中阻止原纤维诱导 的神经元死亡.此外，所述(3-折叠破坏肽在体内能显著减少淀粉样P-蛋白沉积并且可以完全阻断大鼠淀粉样变性脑模型的淀粉样原纤维形 成.小分子-结合淀粉样多肽的小分子穂定该蛋白的天然折叠，其潜 在用途已经在运甲状腺素蛋白(TTR)的实例中进行尝试[Peterson (1998) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95:12965-12960; Oza (1999) Bioorg. Med. Chem. Lett. 9:1-6〗.目前为止，已经证明分子如甲 状腺素和氣灭酸能够阻止导致淀粉样蛋白形成的构象改变.然而，所 述化合物在动物模型中的应用还没有被证实，而且除TTR以外，血液 中还存在能结合这些配体的其它蛋白，使其应用大打折扣.抗氣化物提出的另一种治疗是摄入抗氣化物以遊免氣化应激并维 持淀粉样蛋白在其还原状态(即单体和二聚体).亚硖酸盐的应用 表现为在体外和体内都能导致更加稳定的TTR单体[AUland (1999) Neurogenetics 2: 183-188.然而，还没有对抗氣化作用的完全表 征，而且对可能的治疗策略的结果进行解释仍然存在困难.当本专利技术付诸实践时，本专利技术人证明与Kapurniotu的U.S. Pat. No. 6, 359, 112的解释相反，肽聚集成淀粉样原纤维受芳香相互作用控 制.此发现使得可以有效并且准确地设计用于诊断和治疗淀粉样蛋白 相关疾病的肽.
技术实现思路
根据本专利技术的一方面，提供包含氨基酸序列X-Y或Y-X的肽， 其中X是芳香族氨基酸，Y是除甘氨酸以外的任何氨基酸，所述肽的 长度为至少2个且不多于15个氨基酸.根据本专利技术的另一方面，提供包含选自SEQ ID NOs. 4, 12-19, 27-45, 112-123, 125和127的氨基酸序列的肽，所迷肽的长度为至 少2个且不多于15个氛基酸.根据本专利技术的另一方面，提供包含选自SEQ ID NOs. 4, 12-19, 27-45, 112-123, 125和127的氨基酸序列的肽，所述肽的长度为至少2个且不多于15个氨基酸.根据本专利技术的另一方面，提供包含选自SEQ ID NOs. 4， 12-19, 27-45， 112-123， 125和127的氨基酸序列的肽.根据本专利技术的另一方面，提供治疗或预防个体中淀粉样蛋白相关 疾病的方法，所述方法包括向个体提供治疗有效量的包含氨基酸序列 X-Y或Y-X的肽，其中X是芳香族氨基酸，Y是除甘氨酸以外的任何 氨基酸，所述肽的长度为至少2个且不多于15个氨基酸.根据下面所述本专利技术优选实施方案的另外的特性，所述肽是药物 组合物中的活性成分，所述药物组合物还包含生理学可接受的栽^^.根据所述优选实施方案的另外的特性，所述肽是由本文档来自技高网...

【技术保护点】
包含氨基酸序列Ｘ－Ｙ或Ｙ－Ｘ的肽，其中Ｘ是芳香族氨基酸，Ｙ是除甘氨酸以外的任何氨基酸，所述肽的长度为至少２个且不多于１５个氨基酸。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：E加齐特，
申请(专利权)人：特拉维夫大学未来科技开发有限公司，
类型：发明
国别省市：IL[以色列]