甘蔗细胞悬浮液制备方法技术

技术编号:1736987 阅读:545 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
甘蔗细胞悬浮液制备方法,以甘蔗新叶作为外植体,采用三次固体培养基培养得到颗粒状甘蔗愈伤组织,甘蔗愈伤组织接种到N6液体培养基中,在转速为120rpm/min、温度为28℃的摇床上振荡培养12天后,将培养液中的悬浮液转接到离心管中,在转速为5000rpm的转速下离心20分钟,去除上清液;留下的离心沉积物转接到N6液体培养基中,在转速为120rpm/min、温度为28℃的摇床上振荡培养48小时,即可得到分散均匀的甘蔗细胞悬浮液;本发明专利技术简化了液体培养过程中多次更换液体培养基以达到细胞数量增殖的操作过程,缩短了液体振荡培养周期,不需要多次更换液体培养基,降低了材料因多次更换液体培养基导致污染的风险。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种甘蔗细胞悬浮液制备方法,其特征在于:以甘蔗新叶作为外植体,采用三次固体培养基培养得到颗粒状甘蔗愈伤组织,第一次培养时间15~20天,第二次和第三次培养时间各为25~30天;颗粒状甘蔗愈伤组织接种到N6液体培养基中,在转速为120rpm/min、温度为28℃的摇床上振荡培养12天后,将培养液中的悬浮液转接到离心管中,在转速为5000rpm的转速下离心20分钟,去除上清液;留下的离心沉积物转接到N6液体培养基中,在转速为120rpm/min、温度为28℃的摇床上振荡培养48小时,即可得到分散均匀的甘蔗细胞悬浮液。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:赵培方陈学宽侯朝祥刘新龙催杰吴才文刘家勇赵俊杨坤
申请(专利权)人:云南省农业科学院甘蔗研究所
类型:发明
国别省市:53[中国|云南]

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