人IL-6受体的高亲和力抗体制造技术

本申请提供了人抗体或抗原结合片断，其与人ＩＬ－６受体（ｈＩＬ－６Ｒ）结合的Ｋ↓［Ｄ］为约５００ｐＭ或更小，封闭ＩＬ－６活性的ＩＣ↓［５０］为２００ｐＭ或更小。所述抗体或抗体片断与ｈＩＬ－６Ｒ结合的亲和力比与猴ＩＬ－６Ｒ的结合高至少两倍。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】专利说明人IL-6受体的高亲和力抗体 相关领域的说明 白细胞介素-6(IL-6)是由免疫细胞和非免疫细胞产生的多向性细胞因子，在免疫反应、急性期反应和造血作用的调控中起至关重要的作用。其与可溶的和细胞膜结合的IL-6R(α链)相结合，形成二元复合物，此复合物能够与细胞膜结合的gp130(β链)相互作用，诱导信号传导复合物的形成，其包含IL-6、IL-6R和gp130各两个。 US 5,670,373、5,795,965、5,817,790、6,410,691和EP 409 607B1中描述了hIL-6R的抗体。US 5,888,510和6,723,319中描述了治疗方法。 专利技术概述 第一方面，本专利技术提供了与人白细胞介素-6受体(hIL-6R)特异性结合的人抗体，优选重组人抗体。这些抗体的特征在于，与hIL-6R以高亲和力和低解离动力学结合，且能够中和IL-6的活性。抗体可为全长(例如，IgG1或IgG4抗体)，或可能仅包含抗原结合部分(例如，Fab、F(ab’)2或scFv片断)，可能被修饰以影响功能性，例如，消除残留的效应功能(Reddy等人，(2000)J.Immunol.1641925-1933)。在优选实施方案中，本专利技术提供抗体或其抗原结合片断，与人IL-6受体(SEQ ID NO1)结合的KD为约500pM或更小，KD用表面等离子体共振测量。在更具体的实施方案中，抗体或抗原结合片断的KD小于300pM，或小于200pM，或甚至小于100pM。在多种实施方案中，抗体或其抗原结合片断封闭hIL-6活性的IC50为250pM或更小，IC50用荧光素酶生物测定法测量。在更具体的实施方案中，抗体或其抗原结合片断显示IC50为150pM或更小。 在相关方面，本专利技术的抗体或抗原结合片断与hIL-6R结合，比其与猴IL-6R结合的亲和力高至少两倍。在更优选的实施方案中，抗体或抗原结合片断与hIL-6R蛋白(SEQ ID NO1)结合，比其与猴IL-6R(食蟹猴(Macaca fascicularis)胞外域，如SEQ ID NO251所示)结合的亲和力高约达三倍。 在一个实施方案中，本专利技术抗体或抗体的抗原结合部分包含重链可变区(HCVR)，选自SEQ ID NO3、227、19、231、35、51、67、83、99、115、131、147、239、241、163、179、235、195和211，或与这些基本上相似的序列。在更具体的实施方案中，抗体或其抗原结合片断还包含轻链可变区(LCVR)，选自SEQ ID NO11、229、27、233、43、59、75、91、107、123、139、155、171、187、237、203和219，或与这些基本上相似的序列。在具体实施方案中，抗体或其抗原结合片断包含HCVR/LCVR对，选自SEQ ID NO3/11；227/229；19/27；231/233；35/43；51/59；67/75；83/91；99/107；115/123；131/139；147/155；239/155；241/155；163/171；179/187；235/237；195/203；和211/219，或与这些基本上相似的序列。 第二方面，本专利技术提供分离的核酸分子，其编码本专利技术的抗体或抗体的抗原结合片断。在一个实施方案中，本专利技术的核酸分子编码包含上述HCVR的抗体或其片段。在具体实施方案中，编码HCVR的核酸分子选自SEQ ID NO2、226、18、230、34、50、66、82、98、114、130、146、238、240、162、178、234、194和210，或与这些基本上相同的序列。在相关方面，本专利技术提供分离的核酸分子，其编码上述的LCVR。在具体实施方案中，编码LCVR的核酸分子为这样的核苷酸序列，其选自SEQ IDNO10、228、26、232、42、58、74、90、106、122、138、154、170、186、236、202和218，或与这些基本上相同的序列。 第三方面，本专利技术提供这样的抗体或抗原结合片断，其包含重链互补决定区3(CDR3)结构域和轻链CDR3结构域，其中 重链CDR3结构域包含下式的氨基酸序列X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13-X14-X15-X16-X17-X18-X19(SEQ IDNO247)，其中X1＝Ala，X2＝Lys，X3＝Gly，X4＝Arg，X5＝Asp，X6＝Ser或Ala，X7＝Phe，X8＝Asp；X9＝Ile，X10＝Pro或缺失，X11＝Phe或缺失，X12＝Val或缺失，X13＝Tyr或缺失，X14＝Tyr或缺失，X15＝Tyr或缺失，X16＝Gly或缺失，X17＝Met或缺失，X18＝Asp或缺失，X19＝Val或缺失；和 轻链CDR3结构域包含下式的氨基酸序列X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9(SEQ ID NO250)，其中X1＝Gln，X2＝Gln或His，X3＝Ala，X4＝Asn或Tyr，X5＝Ser，X6＝Phe，X7＝Pro，X8＝Pro，X9＝Thr。 在更具体的实施方案中，抗体或抗原结合片断还包含 重链CDR1结构域，其包含下式的氨基酸序列X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8(SEQ ID NO245)，其中X1＝Gly或Arg，X2＝Phe，X3＝Thr，X4＝Phe，X5＝Asp，X6＝Asp，X7＝Tyr，X8＝Ala； 重链CDR2结构域，其包含下式的氨基酸序列X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8(SEQ ID NO246)，其中X1＝Ile或Val，X2＝Ser，X3＝Trp，X4＝Asn，Xs＝Ser，X6＝Gly，X7＝Ser，X8＝Ile； 轻链CDR1结构域，其包含下式的氨基酸序列X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8(SEQ ID NO248)，其中X1＝Gln，X2＝Gly，X3＝Ile，X4＝Ser，X5＝Ser，X6＝Trp；和 轻链CDR2结构域，其包含下式的氨基酸序列X1-X2-X3(SEQ IDNO249)，其中X1＝Gly或Ala，X2＝Ala，X3＝Ser。 第四方面，本专利技术提供抗体或抗原结合片断，其包含 重链CDR3结构域，选自SEQ ID NO25、153、9、185、41、57、73、89、105、121、137、169、201和217；和 轻链CDR3结构域，选自SEQ ID NO33、161、17、193、49、65、81、97、113、129、145、177、209和225。 在更具体的实施方案中，抗体或抗原结合片断还包含 重链CDR1结构域，选自SEQ ID NO21、149、5、181、37、53、69、85、101、117、133、165、197和213； 重链CDR2结构域，选自SEQ ID NO23、151、7、183、39、55、71、87、103、119、135、167、199和215； 轻链CDR1结构域，选自SEQ ID NO29、157、13、189、45、61、77、93、本文档来自技高网...

【技术保护点】
抗体或其抗原结合片断，其与人白细胞介素－６受体（ｈＩＬ－６Ｒ）特异性结合的ＫＤ为约５００ｐＭ或更小，为３００ｐＭ或更小，其中ＫＤ由表面等离子体共振测定。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：S史蒂文斯，TT黄，JH马丁，JL费尔赫斯特，A拉菲克，E史密斯，KJ波博斯基，NJ帕帕佐普洛斯，JP凡德尔，G陈，M卡罗，
申请(专利权)人：瑞泽恩制药公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]