一种植酸酶多个基因改良的家族改组技术体系制造技术

本发明专利技术涉及一种通过多个相关植酸酶基因的合成并与体外定向分子进化相结合的植酸酶改造体系。该体系中按甲醇酵母偏爱密码子设计并合成４个不同种类的植酸酶基因，多个基因参与的家族改组，能够获得比单个基因改组突变更大的突变潜力。通过基因家族改组及高通量的筛选体系，开展植酸酶的定向分子进化研究，推动我国植酸酶的市场化进程。植酸酶能够促进动物营养物质的利用，降低磷排出，减少环境污染的潜力是巨大的，具有极大的生态效益。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种植酸酶基因改良家族改组突变库体外定向分子进化技术体系包括如下步骤：　（１）对甲醇酵母偏爱密码子设计合成Ｕ５９８０４，ＡＹ１５０８０６，ＡＢ０２２７００，ＡＪ３１０６９６四个植酸酶基因；　（２）分别以上述四个植酸酶基因为模板， 分别加入引物ＡＹ１３６６３１Ｚ１、ＡＹ１３６６３１Ｆ１；ＡＦ５４７２２４Ｚ１、ＡＦ５４７２２４Ｆ１；ＡＦ５４２２３５Ｚ１、ＡＦ５４２２３５Ｆ１和ＡＹ１３７１９８Ｚ１、ＡＹ１３７１９８Ｆ１进行ＰＣＲ扩增；　（３）上述四个植酸酶基因扩增产 物等比例混合后，用ＤＮＡ酶降解为小片段基因；　（４）小片段基因进行无引物ＰＣＲ扩增；　（５）再取无引物ＰＣＲ扩增的产物为模板加入引物进行ＰＣＲ扩增获得的扩增产物即植酸酶家族改组突变体库。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：付晓燕，高峰，李贤，彭日荷，田永生，熊爱生，薛永，姚泉洪，赵伟，
申请(专利权)人：上海市农业科学院，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]