牛焦虫苗的生产工艺制造技术

技术编号:1736249 阅读:248 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术是一种生产预防牛环形泰勒焦虫病特效疫苗的新的生产工艺.其技术特征在于:改变原培养液成分来提高细胞的生长繁殖率;改转瓶生产为发酵罐搅拌悬浮生产,简化操作手续,节约了培养液.提高了细胞的产率.(*该技术在2006年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】
本专利技术是一种预防牛环形泰勒焦虫病的特效疫苗新的生产工艺,属于兽医生物药品制造
,该工艺以病牛的血源白细胞为原料,采用搅拌悬浮培养的生产方法生产牛焦虫病疫苗。曾请北京大学图书馆用计算机查从1973年至1985年的有关悬浮培养法的资料,共查到1600篇,其中搅拌悬浮培养细胞的资料有20篇,用于培养焦虫细胞苗的没有,有一篇牛焦虫的静置悬浮培养(附电算机检索文件一份)。查专利文献查到一篇中国专利局专利文献,申请号85100848。现已有的培养泰勒焦虫细胞苗的方法是静置单层和静置悬浮培养法;慢速和快速转瓶培养法。这些方法的共同点是在传代扩大再生产时,细胞有一部分贴于瓶壁生长,不易脱落,静置培养和慢速转瓶培养法还需用威尔逊液脱落,细胞产率低,即使细胞贴壁较少的快速转瓶培养法,其生产分瓶率也只有1∶2,需扩大再生产时,细胞悬液需要离心,去弃旧液,加入新营养液进行培养、费工、费时,疫苗产量低,生产成本高。该专利技术的任务是提供一种新的生产工艺,解决以往各种工艺方法的不足,以达到操作简便、细胞生长繁殖快、耗用培养液、化学药品少,成本低,疫苗产量高的目的。其解决方案是改变原培养液(伊格氏液40%+40%水解乳蛋白+牛血清20%)的成份,在原培养液的基础上加入必需的氨基酸、维生素,用时再临时加入少量谷氨胺液和“三素”液(含青霉素、链霉素和卡那霉素的混合液),配好后用碳酸氢钠液将培养液的PH值调节到7.2~7.4。改转瓶生产为发酵罐搅拌悬浮生产。首先用静置单层培养的含焦虫传代细胞经悬浮驯化培养,再接种到发酵罐进行悬浮培养,48小时后,取出2/3的细胞液制苗,将新的培养液倒入余下的1/3的细胞液中继续培养,进行再生产。1982年10月制定了“牛环形泰勒焦虫病血源高代细胞苗的制作规程”,规定该苗制造为七个步骤1.种子细胞的保存;2.种子细胞的复苏;3.细胞的培养和传代;4.胶胨细胞苗的配制;5.无菌检验;6.安全和效力检验;7.胶胨细胞苗的使用。根据该规程,可生产出成本低、产量高的合格的疫苗。实施例1986年2月,该研究小组用新的生产工艺进行了大批量疫苗生产,每毫升培养液生产细胞250万个,比原产量(100万个/毫升)细胞产率提高了150%,使疫苗产量提高了大约4倍,而使用的培养液仅为原用量的20%,成本降低了60%,操作简便,适于大规模的生产。本文档来自技高网...

【技术保护点】
牛环形泰勒焦虫病血源高代细胞苗的制造工艺流程为:a、种子细胞的保存,b、种子细胞的复苏,c、细胞的培养和传代,d、胶胨细胞苗的配制,e、无菌检验,f、安全和效力检验,g、胶胨细胞苗的使用。其特征在于:在上述工艺流程的细胞培养和传代中改变培养液成份,即在原培养液中增加必需的氨基酸和维生素。

【技术特征摘要】
1.牛环形泰勒焦虫病血源高代细胞苗的制造工艺流程为a、种子细胞的保存,b、种子细胞的复苏,c、细胞的培养和传代,d、胶胨细胞苗的配制,e、无菌检验,f、安全和效力检验,g、胶胨细胞苗的使用。其特征在于在上述工艺流程的细胞培养和传代中改变培养液成份,即在...

【专利技术属性】
技术研发人员:赵巨奎
申请(专利权)人:新疆维吾尔自治区畜牧科学院兽医研究所
类型:发明
国别省市:65[中国|新疆]

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