一种植物碱性蛋白酶的提取方法技术

本发明专利技术涉及一种从植物中提取的新蛋白酶种及其提取方法。用丝兰属（ＹＵＣＣＡ）植物叶片作原料，将叶表栅状组织直接干燥成粗酶制剂；亦可用硫酸铵分级盐析成精酶制剂。丝兰蛋白酶适应ｐＨ范围在７～１２．５、ｐＨ１２时活性最高。该酶可用于洗涤剂、果汁澄清等方面。（*该技术在2011年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种从植物中提取的新蛋白酶种及其提取方法。酶制剂在工业生产上有广泛的用途。植物蛋白酶一般具有资源来源丰富。价格低廉的特点，因而易被大量开发。市场上销售的植物蛋白酶如木瓜蛋白酶，菠萝蛋白酶，无花果蛋白酶等，就广泛应用在蚕丝脱胶，皮革脱毛，啤酒澄清、肉类嫩化及医药等方面。蛋白酶所具有的不同特殊的性质，决定了它们自身的应用价值。目前市售的植物蛋白酶，都是中酸性蛋白酶。在PH中性偏酸性条件下比较稳定。在碱性条件下就容易丧失活力。本专利技术的目的在于寻找一种用简单的提取工艺制备出。在PH碱性条件下酶活力稳定的新植物蛋白酶种。本专利技术是采用百合科(LILACEAE)丝兰属(YUCCA)植物叶片为原料。将叶片洗净凉干，刮取绿色栅状组织，直接将栅状组织用热风干燥后粉碎成粗酶。也可按上述工艺刮取栅状组织后榨汁。加入是汁量一倍的水，静置10分钟，离心去除悬浮物。清液按8%的重量加入硫酸铵静置约4小时后离心去除沉淀，上清补足硫酸铵50%饱和度，静置12小时后离心收集沉淀，抽真空冻于成酶制剂。本专利技术采用丝兰属植物作酶提取原料，其品种是filame-ntosa，金边丝兰、光边丝兰和gloroiosa、经用DHT-Casain法测上述4种植物酶活性、gloroiosa品种活性最高。gloroiosa品种的叶片中。酶主要存在于正常展开、生长正常的健康叶中，而未张开的白色嫩叶及枯萎的老叶含酶量极少。用本专利技术方法提取制备的丝兰植物蛋白酶，适应PH范围在PH7～12.5，PH12时酶活性最高。该酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳证明为两个蛋白酶组分，簿层等电聚焦电泳证实这两个组分等电点各为PH9.77和9.61。丝兰植物蛋白酶可用于洗涤剂、果汁澄清等方面。实施例1取gloroiosa成熟健康的叶片30.05千克，刮取绿色栅状组织12.6千克，刮取物置-网眼为1×1(mm)的网袋中，在热风干燥房中于55℃下干燥至水份＜7%时，取干燥物用球磨机粉碎得粗酶粉3.94千克，用DHT-酪蛋白法测活性为15718μ/克。实施例2取成熟健康的金边丝兰叶片15千克，刮取绿色栅状组织6.1千克，按实施例1方法得粗酶粉1.87千克，活性为8700μ/克。实施例3取成熟健康的光叶丝兰叶片17千克，刮取绿色栅状组织7.0千克，按实施例1方法得粗酶粉2.03千克，活性为9500μ/克。实施例4取成熟健康的丝兰麻叶片3.2千克，刮取绿色栅状组织0.97千克，榨取汁410毫升。汁水离心(2000转/分)，取上清水加一倍无离子水后，称取汁水量8%的硫酸铵，慢慢加入汁水中搅拌至溶，并继续搅拌10分钟，室温静置4小时后离心(2000转/分)，取上清水再加到50%饱和度的硫酸铵盐析，静置12小时离心(2000转/分)，收集沉淀物得酶糊0.082千克。酶糊经真空冷冻干燥得精酶0.043千克，用DHT-酪蛋白法测活性为51300μ/克。权利要求1.一种植物蛋白酶。其特征在于采用丝兰属植物叶片为原料。按下例步骤提取经上述步骤提取的丝兰植物蛋白酶。活性适应PH范围在7～12.5、PH12时酶活性最高。2.按权利要求1所述的提取步骤，其特征在于是用filamentosa，金边丝兰，光边丝兰和gloroiosa作原料，以gloroiosa品种酶活性最高。3.按权利要求1、2所述的提取步骤，其特征在于采用正常展开，生长正常的健康叶片。4.按权利要求1所述的提取步骤，其特征在于加入汁液一倍量的水。5.按权利要求1所述的提取步骤，其特征在于将硫酸铵按汁水量8%的比例加入汁水后静置4小时离心去除沉淀。6.按权利要求1所述的提取步骤，其特征在于将上清液补足硫酸铵50%饱和度静置12小时离心取沉淀。全文摘要本专利技术涉及一种从植物中提取的新蛋白酶种及其提取方法。用丝兰属(YUCCA)植物叶片作原料，将叶表栅状组织直接干燥成粗酶制剂；亦可用硫酸铵分级盐析成精酶制剂。丝兰蛋白酶适应pH范围在7～12.5、pH12时活性最高。该酶可用于洗涤剂、果汁澄清等方面。文档编号C12N9/50GK1066469SQ9110316公开日1992年11月25日 申请日期1991年5月9日 优先权日1991年5月9日专利技术者叶启腾, 陈强, 李春香 申请人:广西热带作物研究所本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种植物蛋白酶。其特征在于采用丝兰属植物叶扯为原料，按下列例步骤提取：割叶→洗净→凉干→刮取栅状组织干燥→粉碎→粗酶压汁→加水→离心→盐析离心→二次盐析、离心→干燥→精酶经上述步骤提取的丝兰植物蛋白酶，活性适应ＰＨ范围在７～１２．５、ＰＨ１２时酶活性最高。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：叶启腾，陈强，李春香，
申请(专利权)人：广西亚热带作物研究所，
类型：发明
国别省市：45[中国|广西]