生产来自不同个体的配子的非人大型哺乳动物或鱼类的制作方法技术

本发明专利技术公开了一种即使在大动物中也可进行敲除个体的稳定性的量产的新型手段。本发明专利技术的方法是生产来自不同个体的配子的非人大型哺乳动物或鱼类(非人动物)的制作方法，该方法包括：向来自第1非人动物的、具有nanos3基因功能被抑制的基因组的卵裂期的胚中移植来自第2非人动物的至少1个多能细胞以调制嵌合胚，产生该嵌合胚，得到个体。作为来第2非人动物的多能细胞，使用具有敲除了所期望的基因的基因组的多能细胞时，在第1非人动物中可以制作敲除了所期望的基因的生殖细胞，因此通过这样的非人动物的交配可以容易地量产敲除非人动物。

The production of nonhuman large mammals or fish from gametes from different individuals

The invention discloses a new means of measuring the stability of an individual even in a large animal. The method of the invention is the production of gametes from different individuals of the large mammals or non-human fish (non-human animal) manufacturing method, the method includes: from first nonhuman animal, has the function of nanos3 gene suppressed genome cleavage stage embryo transplantation from at least second nonhuman animal 1 pluripotent cells by modulation the chimeric chimeric embryo, embryo, individual. As to the second nonhuman animal pluripotent cells, with knock out the desired gene of the genome of pluripotent cells, in first in a non-human animal can produce the desired gene knock in germ cells, therefore by mating such a non-human animal can easily measure the production of knockout non-human animal.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】生产来自不同个体的配子的非人大型哺乳动物或鱼类的制作方法
本专利技术涉及生产来自不同个体的配子的非人大型哺乳动物或鱼类的制作方法。
技术介绍
为了正确地分析生物的基因功能，敲除(KO)了目标基因的生物的量产是必不可少的。基因KO小鼠是重要的模型生物。通常，通过将发生了同源重组的胚性干细胞(以下记作ES细胞)注入胚泡中，会比较容易地制作KO小鼠。但是，使用未建立ES细胞的牛或猪等制造KO动物时，需要体细胞核移植(SCNT)技术。迄今为止，进行了与羊、小鼠、牛、山羊、猪和马等多种的SCNT动物制作相关的研究(非专利文献1～5)，但由于以高频率发生低受孕、流产、死产和出生后立即死亡等，因此使得KO大动物的稳定性的量产处于非常困难的状况。现有技术文献专利文献专利文献1：日本专利第5686357号公报专利文献2：日本专利第5688800号公报专利文献3：日本特开2014-121329号公报非专利文献非专利文献1：Wilmut,I.等人,Viableoffspringderivedfromfetalandadultmammaliancells.Nature385,810-813(1997).非专本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种生产来自不同个体的配子的非人大型哺乳动物或鱼类的制作方法，该方法包括：向来自第1非人大型哺乳动物或鱼类的、具有nanos3基因功能被抑制的基因组的卵裂期的胚中移植来自第2非人大型哺乳动物或鱼类的至少一个多能细胞以调制嵌合胚，产生该嵌合胚，得到个体。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.04.08 JP 2015-0789371.一种生产来自不同个体的配子的非人大型哺乳动物或鱼类的制作方法，该方法包括：向来自第1非人大型哺乳动物或鱼类的、具有nanos3基因功能被抑制的基因组的卵裂期的胚中移植来自第2非人大型哺乳动物或鱼类的至少一个多能细胞以调制嵌合胚，产生该嵌合胚，得到个体。2.权利要求1所述的方法，其中，nanos3基因功能的抑制是通过同源重组敲除nanos3基因来进行的。3.权利要求1或2所述的方法，其中，上述卵裂期为二细胞期～胚泡期。4.权利要求1～3中任一项所述的方法，该方法制作生产来自具有所期望的遗传性特性的不同个体的配子的非人大型哺乳动物或鱼类，其中，上述多能细胞是来自具有所期望的遗传性特性的第2非人大型哺乳动物或鱼类的细胞。5.权利要求4所述的方法，其中，所期望的遗传性特性是人为的遗传性修饰。6.权利要求5所述的方法，其中，人为的遗传性修饰是所期望的基因的敲除。7.权利要求1～6中任一项所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：出田笃司，小西正人，千代丰，山下司朗，山口辽作，相马茉莉绘，
申请(专利权)人：全国农业协同组合连合会，
类型：发明
国别省市：日本,JP