哺乳动物疾病的成肌细胞治疗方法技术

用成肌细胞和／或其自然的、遗传工程的、化学的衍生物治疗哺乳动物疾病的组合物和方法。将正常的或遗传工程或表型改变的生肌细胞培养并移植到不正常和／或退化的组织或器官，以减轻遗传性、退变性、致弱性、不良的和／或致死性疾病。治疗这些疾病不限于利用生肌细胞的机械、电学或物理特性，而且包括利用生肌细胞分泌／释放的生化物质。本发明专利技术公开了利用正常成肌细胞将全部正常基因组用于基团修复，或改善组织或器官的大小或功能。遗传工程改变的通过基因转导得到的生肌细胞可以较好地用于某些疾病，细胞系转变的细胞可以较好地用于其他疾病。用内源生化物质控制成肌细胞之间或与其他类型细胞融合。还公开了通过一次运行即可得到非常大量（大于１０００亿）的正常或基因型或表型改变的生肌细胞的，位于细胞库中的自动细胞处理器。（*该技术在2015年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
相关申请本申请是1994年12月13日提交的美国专利申请No.08/354,944的部分延续。该参考文献在此引入作为参考。本专利技术的背景本专利技术的领域本专利技术涉及治疗致弱的、致死性的、遗传性的、退化性的和/或不良的哺乳动物疾病的组合物和方法。具体地说，本专利技术涉及将正常的、或遗传工程转导的、或细胞系转换(cytocline-converted)的生肌细胞移植到功能障碍的和/或退化的组织或器官。现有技术的描述成肌细胞特性在哺乳动物中，成肌细胞是唯一的一种分布广泛、可迁移、自然融合形成合胞体、融合后迅速失去其主要组织相容性一级抗原(MHC-1)、并发展至占人体50％体重的细胞。这些特性使得成肌细胞可以理想地用于基因转移和体细胞治疗(SCT)。成肌细胞治疗是体细胞治疗和基因治疗的结合。成肌细胞治疗虽然成肌细胞/卫星细胞在肌肉生成和肌肉再生中的作用可追溯到20世纪六十年代初(Konigsberg，I.R.，科学，1401273(1963)。Mauro，A.J.，Biophys.Biochem.Cytol.，9493-495(1961))，但其用于动物的治疗直到1978年才见报道(Law，P.K.，Exp.Neurol.，60231-243 1978))。1990年2月15日，首例成肌细胞转移治疗(MTT)一位患杜兴氏肌营养障碍(DMD)的男孩，标志着人类基因转移的首例临床试验。已报道其成功(Law.P.K.等人，Lancet，336114-115(1990)；Kolata，G.纽约时报，星期天，(1990年6月3日))。骨髓移植严格地以正常细胞取代遗传异常的细胞，与之不同，成肌细胞转移治疗通过自然的细胞融合实际上将供体成肌细胞核内的所有正常基因插入到营养障碍肌纤维中而修复它。此外，供体的成肌细胞之间也相互融合，形成遗传正常的肌纤维以取代退化的部分。这样，通过再生的自然发展过程，全部正常基因被整合到异常细胞和异常器官中。美国专利局1992年7月14日给本专利技术人授予了名为“治疗肌肉退化及虚弱的组合物和方法”的专利(#5,130,141)。1993年10月，食品及药物管理局(FDA)正式地开始管理体细胞治疗(SCT)，将之定义为“经繁殖、扩增、筛选、药物处理、或通过间接体外生物学特征筛选的自体固有的、异常发生的、或异体的细胞，用于人体预防、处理、治疗、诊断、或减轻疾病或损伤”。(联邦注册，5853248-53251(1993))。成肌细胞转移治疗(MTT)属于体细胞治疗(SCT)的范围，成肌细胞及其自然的、遗传工程的或化学的衍生物成为潜在治疗哺乳动物疾病的生物学方法。1994年5月25日，FDA准予细胞治疗研究基金会(CTRF)对每个患者收费63806美元。CTRF是由本专利技术人于1991年创建的一个非赢利的研究基金会。FDA批准CTRF向这些临床试验患者收取治疗费用，对于建立MTT和CTRF应得到的科学可信度是极为重要的，引用1994年6月17日Memphis健康治疗新闻的一段话“很少批准允许为一项研究性产品付费”，FDA发言人Monica Revelle说，“申请人必须经过许许多多的过程，而且必须有在一系列近于科学幻想的研究之后看来似乎可行的产品。这主要用于支持对小公司的有前途的技术进行试验”。这是关于CTRF研究的描述。现在，CTRF正在进行第一项、也是唯一的FDA批准的申请MTT的研究中新药(IND)的人体临床试验。这对于认识CTRF已经和FDA在用于遗传细胞治疗的该IND的批准过程中为建立标准和政策进行了密切的合作，是极为重要。用病毒载体介导的基因治疗用于人类神经肌肉疾病还没有通过FDA批准。用成肌细胞进行细胞治疗细胞是所有生命的基本单位。生命正是由这些无数的小实体形成的。用人类的巨大智慧和知识，我们还不能从非生命的成分，如DNA、离子和生化物质生产出活的细胞。细胞培养是已知的人类能够体外复制细胞的唯一方法。用适当的技术和预防措施，可以培养正常细胞或转化细胞至足够量以修复和代替退化和损伤的组织。细胞移植弥补体外和体内系统间的间隙，并使得“新生命”能在已有遗传缺陷或机体损伤的生命体内的退化组织或器官繁殖。细胞融合将细胞核内所有正常的基因，象送去一个修理盒一样，转移到异常细胞内。为了正确安装及进一步操作，染色体上的软件还需要其它细胞器作为硬件来操作，认识到这一点非常重要。细胞融合后，基因缺陷的修正自发地发生在细胞水平。全部80,000个正常基因的自然整合、调控和表达，将正常表型传递给异核体。因为宿主基因组具有遗传缺陷，宿主基因组不能产生的蛋白质或因子是由供体的正常基因组产生的。来源于其它基团表达的不同辅因子证实了正常表型的恢复。用成肌细胞进行基因治疗本专利技术人在用成肌细胞作为基因转移的载体方面已经作了广泛研究。在哺乳动物中，成肌细胞是唯一的一种分布广泛、可迁移的、自然融合形成合胞体，融合后迅速失去MHC-1抗原，并发展至占人体50％体重的细胞。这些复合特性使其可理想地用于基团转移。正常细胞核的自然转导确保DMD患者的营养障碍蛋白(dystrophin)和相关蛋白质在细胞水平的有序取代。这种理想的基因转移过程对于肌肉而言是独有的。毕竟在人体内只有成肌细胞能够融合并且唯有肌纤维是多核的。正是利用了这些固有的特征，MTT才能转移所有正常基因以有效地进行基因修复。在MTT中供体的成肌细胞间相互融合，形成正常肌纤维，肌肉也从加入遗传正常细胞获益。成肌细胞治疗是未来医学健康是所有人体细胞处理良好状态。在遗传性或退化性疾病中，病态细胞需要修复，死亡细胞需要取代，以保持健康。细胞培养是产生新的、活的细胞，使之移植到人体后能够存活、发展、并具正常功能、取代失去功能的退化细胞的唯一途径。成肌细胞是人体内唯一能够进行自然细胞融合的细胞。自然细胞融合使全部正常基因转移至遗传缺陷细胞，通过弥补缺陷进行有效的表型修复。DMD的MTT治疗法是第一个安全、有效的人类基因治疗法。用MTT转移其它基因及其启动子/增强子用以治疗其它疾病的工作正在进行。成肌细胞是有效、安全、通用的基因转移载体，因为它对于机体是内源性的。由于外源性基因总能在细胞内发挥其作用，细胞治疗将永远是通向健康的常用途径。毕竟细胞是生命的基础。DMD疾病示例DMD是一种遗传的、退化的、使人衰弱的、致死的和不良的哺乳动物疾病。它以进行性肌肉退化和力量减弱为特征。这些症状开始于3岁或更小并贯穿整个病程。每3300名男性人口中有1人由于DMD而衰弱并死亡，DMD是居第二位的人类最常见的致死性遗传疾病。典型的DMD患者在12岁靠轮椅代步，75％的患者在20岁前死亡。由于伴有呼吸肌退化，不能吸入足够氧气和排除肺部感染，肺炎通常是DMD的急性死因。10％的DMD患者在青春期中段发展至心肌病症状。18岁前，所有DMD患者发展为心肌病，但心衰很少是原发死因。1950年前，对80多种化合物进行了评价并报道有33种可能有效(Milhorat.A.T.，哥伦比亚地区医学年鉴，2315(1954))。没有一种现在仍在使用(Wood，D.S.，InKakulas，B.A.and Mastaglia，F.L.，eds.杜兴氏和贝氏肌营养障碍的病理和治疗。New YorkRavenPress；85-9本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗哺乳动物遗传性、退变性、致弱性、致死性或不良的疾病的方法，其步骤包括：培养正常的、遗传工程转导的或表型转换的生肌细胞，该生肌细胞包括成肌细胞、肌管、新生肌纤维和转变的细胞类型；向宿主施用有效剂量的免疫抑制剂；然后从上述培养物中筛选并向宿主施用有效剂量的生肌细胞或由生肌细胞转变的细胞，籍此，组织／器官的大小、形状和／或功能得到加强，和／或病情得到控制、减轻或消除。２．权利要求１的方法，其中病情的处理不仅限于利用所述生肌细胞的机械的、电的或物理的特性，而且包括其生化分泌物／释放物的应用。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：彼得K罗，
申请(专利权)人：彼得K罗，
类型：发明
国别省市：US[美国]