脆壁克鲁维酵母的高效转化系统技术方案

本发明专利技术涉及一种新的脆壁克鲁维酵母基因－２６ＳｒＲＮＡ基因片断序列；利用该序列构建的重组多核苷酸载体；可被该载体转化的脆壁克鲁维酵母受体菌株以及脆壁克鲁维酵母完整细胞的高效转化方法。以上内容构成脆壁克鲁维酵母的高效转化系统，它可以利用缺陷基因功能补偿作为转化子筛选的手段，因而具有操作简便、费用低廉、转化率高的优点。作为本发明专利技术的例子是用于在脆壁克鲁维酵母的典型菌株或其ｕｒａ３突变菌株中高效获得稳定的抗氨基葡糖苷Ｇ４１８或尿嘧啶合成基因功能补偿的转化菌株。（*该技术在2017年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种脆壁克鲁维酵母高效转化系统，包括适合于高效转化的脆壁克鲁维酵母受体菌株、用于该菌株的重组多核苷酸载体以及将该载体引入脆壁克鲁维酵母受体菌株的高效方法。其特征在于：１）．所述的受体菌株为脆壁克鲁维酵母的典型菌株Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｅｃ ｆｒａｇｉｌｉｓ ＣＢＳ ３９７和其突变菌株Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｅｃｓ ｆｒａｇｉｌｉｓ ＨＫＹ００３９ （ＣＣＴＣＣ编号为Ｎｏ．Ｍ９７００３）。２）．所述的重组多核苷酸载体为带有脆壁克鲁维酵母２６Ｓ ｒＲＮＡ基因片断序列的ｐＰｒｕ１ ６（Ｘ１）（ＣＣＴＣＣ Ｎｏ．Ｍ９７００５）和ｐＧＥｒ－１１（ＣＣＴＣＣ Ｎｏ．Ｍ９７００４）之任一种。３）．所述的转化方法是利用上述重组多核苷酸载体转化脆壁克鲁维酵母典型菌株Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｅｃｓ ｆｒａｇｉｌｉｓ ＣＢＳ ３９７ 或其突变菌株Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｅｃｓ ｆｒａｇｉｌｉｓ ＨＫＹ００３９（ＣＣＴＣＣ编号为Ｎｏ．Ｍ９７００３）并得到转化菌株的方法。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：霍克克，唐南筠，袁汉英，王琼庆，李育阳，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]