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RNA循环逆转录反应方法技术

技术编号:1733559 阅读:365 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术属生物工程技术领域,是一种循环逆转录反应方法。其过程为对待扩增的RNA模板加热变性后,将RT引物结合到RNA链上,由逆转录催化酶催化RT引物延伸合成cDNA,形成RNA-DNA杂合双链,重复变性-复性-延伸,循环反应几十次,随后根据需要可偶联PCR扩增或直接用于cDNA文库克隆。本发明专利技术可有效提高RNA分析和检测灵敏度,技术设计简单易行,操作简便,成本低。本发明专利技术可应用在一切RT应用领域。特别适应于RNA相关的临床检测和分析。(*该技术在2018年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
由一份RNA模板循环逆转录得到多倍份的cDNA的反应方法,其特征在于,反应体系在热循环仪上进行热变性-复性-延伸等3个步骤的循环反应过程,每个循环过程控制每步骤的温度和时间参数为:变性,温度条件:89~95℃,保温时间:5~120秒; 复性,温度条件:55~68℃,保温时间:5~90秒;延伸,温度条件:60~70℃,保温时间:60~180秒。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:毛裕民陈燃唐榕
申请(专利权)人:复旦大学
类型:发明
国别省市:31[中国|上海]

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