治疗前列腺癌的TNF-β-样蛋白,相关的核酸分子,药物组合物和方法技术

重组蛋白质，所述蛋白质当在适当条件下与雄激素非依赖型前列腺癌细胞接触时可选择性地抑制所述细胞的增殖，所述蛋白质的氨基酸序列含有图４所示氨基酸序列或其功能衍生物。（*该技术在2017年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
,相关的核酸分子,药物组合物和方法
本专利技术涉及可用于治疗患有雄激素非依赖型前列腺癌受试者的蛋白质，本专利技术还涉及用于治疗患有此病的受试者的核酸分子，药物组合物和方法。专利技术背景在本申请上下文中，提到多篇文献。这些文献所公开的内容通过参考文献引入本文以更完整地描述本专利技术所涉及的现有技术。前列腺癌是最常见的恶性肿瘤类型之一，50岁或50岁以上的男人中，30％人的前列腺中具有癌症的病灶，但每年仅有1％患此病的男人被正确地诊断为前列腺癌，尸检时揭示出的高发病率和临床上揭示出的很低的发病率相比显示出鲜明的差异。1992年，美国有134,000个男人被诊断为前列腺癌，32,000的患者死于此病。在临床上被诊断为此病的所有男人中，尽管接受了治疗，但一半以上在10年内死亡，三分之二以上遭受局部或全身性的病痛折磨。最近，对血清中前列腺-特异性抗原(PSA)的检测能做到较早地测定，但仍不清楚PSA升高但无大肿瘤负担的患者中该疾病的自然进程如何。对于局限于前列腺的癌症而言，初级放射疗法或彻底地切除术的效力大致相当。对于初期外科手术而言，放射疗法可治疗疾病的复发，而对于初级放射疗法而言，用外科手术治疗疾病的复发较困难。前列腺损害大多转移至骨，通过降低受试者的雄激素水平可治疗这种转移。通过用药物阻断肾上腺和性腺雄激素的产生可在化学上做到这一点，或通过去势(摘除睾丸，实际上未阻断肾上腺产生)可在外科手术上做到这一点。患者对这种激素处理仅反应6个月左右然后即恶化的事实表明转移的前列腺损害可能变为雄激素-非依赖型的。经培养的前列腺癌细胞系中含有混合克隆这一发现支持了上述观点。这些混合的克隆有3种类型雄激素-依赖型，仅在外源雄激素的存在下存活；雄激素-敏感型，在无雄激素时可存活，但需有雄激素的存在才能增殖；和雄激素-非依赖型，在缺乏雄激素时可存活也可增殖。在患有前列腺癌的受试者中，不少群体在临床上显示出雄激素非依赖性，即甚至在治疗除去雄激素之后仍可继续增殖的前列腺癌细胞的存在。除去前列腺肿瘤块的外科手术经常导致雄激素非依赖型细胞以及其它类型的细胞的去除。然而，在此方面仅靠外科手术很少有效，因为至少有些雄激素依赖型细胞仍然存在。因此，存在一个强烈的(和不合适的)需求，即需要使用特异性抑制雄激素非依赖型癌细胞增殖的药剂来治疗前列腺癌的方法。专利技术简述本专利技术提供了重组蛋白质和分离的蛋白质，当它们在适当条件下与雄激素非依赖型前列腺癌细胞接触时，可选择性地抑制所述细胞的增殖，其氨基酸序列含有图2所示的氨基酸序列或其功能衍生物。本专利技术还提供了治疗患有雄激素非依赖型前列腺癌之受试者的药物组合物，所述组合物含有本专利技术蛋白质之一和药物可接受的载体。本专利技术还提供了基本上由编码图4之氨基酸序列的核酸序列或其功能衍生物组成的核酸分子，所述分子包括但不限于适用于治疗患有雄激素非依赖型前列腺癌之受试者的基因疗法的核酸分子。本专利技术还提供了治疗患有雄激素非依赖型前列腺癌之受试者的药物组合物，所述组合物含有适于用作基因疗法之载体的本专利技术的核酸分子和药物可接受的载体。本专利技术提供了当在适当条件下与雄激素非依赖型前列腺癌细胞接触时，可选择性地杀死所述细胞的物质组合(composition of matter)，该物质组合含有本专利技术的蛋白质和能有效地与之粘附的毒性组分。本专利技术也提供了治疗患有雄激素非依赖型前列腺癌之受试者的药物组合物，所述组合物含有本专利技术的物质组合和药物可接受的载体。最后，本专利技术提供了治疗患有雄激素非依赖型前列腺癌之受试者的方法，所述方法包括给受试者施用治疗有效量的一种本专利技术的药物组合物。附图简述附图说明图1描述了GF-2H的DNA序列。图2A描述了成熟的GF-2H蛋白(被鉴定为“ACTIVE2H2”)的氨基酸序列和TGF-β家族其它成员之氨基酸序列之间的比较。图2B描述了未成熟的GF-2H蛋白的氨基酸序列。图3A描述了GF-2H的纯化方案。图3B描述了rGF-2H的纯化方案。图4描述了成熟的GF-2H的氨基酸序列。图5描述了编码GF-2H的mRNA在不同组织中的表达。图6描述了成熟的GF-2H对前列腺癌细胞系PC-3的调节。图7描述了成熟的TGF-β对前列腺癌细胞系PC-3的调节。专利技术详述β型转化生长因子(TGF-β)是具有多种活性的多功能因子大家族的代表。TGF-β是生长，分化和形态发生因子超家族的原型，所述因子如抑制素，活化素，穆勒氏抑制物，decapentaplegic产物，和TGF-β2，这些因子在结构上都与TGF-β相关。另外，这些因子和与TGF-β相关的其它因子似乎参与组织发育和修复的很多过程(J.Massague,Ann.Rev.Cell.Biol.,1990,6:597-641)。由于这些多种多样的作用，一组TGF-β-样蛋白可能具有用作特别地治疗增殖性疾病之治疗剂的潜力。然而，缺乏进一步的实验资料，不可能预测具有已知氨基酸序列的TGF-β-样蛋白是否对导致特殊疾病的增殖中的细胞具有抑制作用，同时在临床上也不会导致不可接受的副作用。本专利技术的蛋白质根据其一级结构为TGF-β-样蛋白，它能特异性地抑制雄激素非依赖型前列腺癌细胞的增殖。然而，在缺乏进一步的实验资料的情况下，仅根据氨基酸序列不能预测这种特异性。因此，本专利技术TGF-β-样蛋白特异性的抗前列腺癌的活性是最出乎意料的。更具体地，本专利技术提供了当在适当条件下与雄激素非依赖型前列腺癌细胞接触时，可选择性地抑制所述细胞增殖的重组蛋白质，其氨基酸序列含有图4所示的氨基酸序列或其功能衍生物(“第一蛋白质”)。在一个实施方案中，第一蛋白质选自下文讨论的，被称为“rGF-2H”，“重组GF-2H”，或“重组的成熟GF-2H”的蛋白质。在优选的实施方案中，第一蛋白质是成熟的GF-2H。本专利技术还提供了当在适当条件下与雄激素非依赖型前列腺癌细胞接触时，可选择性地抑制所述细胞增殖的分离的蛋白质，其氨基酸序列由图4所示的氨基酸序列或其功能衍生物组成(“第二蛋白质”)。在一个实施方案中，第二蛋白质选自下文讨论的“GF-2H”和“成熟的GF-2H”。在优选的实施方案中，第二蛋白质是成熟的GF-2H。本文所用的重组蛋白质是通过使用重组的核酸技术得到的蛋白质。这种重组蛋白质的一级结构可以与其天然形式的一级结构相同，或可含有另外的氨基酸残基。另外的残基可存在于例如蛋白质的N-末端和/或C-末端。分离的蛋白质是指具有含50％以下蛋白质杂质之化学环境的任何蛋白质。在一个实施方案中，分离的蛋白质具有含10％以下蛋白质杂质的化学环境，在优选的实施方案中，分离的蛋白质具有含1％以下蛋白质杂质的化学环境。在本文中，序列如图4所示的蛋白质的“功能衍生物”蛋白质，是与序列如图4所示的蛋白质具有结构(即氨基酸序列)和功能(即选择性抑制雄激素非依赖型前列腺癌细胞增殖)上的相似性的蛋白质。结构上相似的蛋白质包括例如通过基本上不消除蛋白质选择性抑制雄激素非依赖型前列腺癌细胞增殖之能力的氨基酸残基缺失，插入或保守的取代而与图4之蛋白质有所不同的蛋白质。保守氨基酸取代的例子是用亮氨酸残基取代异亮氨酸残基。本文所用的“雄激素非依赖型”前列腺癌细胞是可在缺乏雄激素时存活以及增殖的前列腺癌细胞。本文所用的“增殖”指的是细胞群体通过细胞分裂而生本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：M·埃兰德，S·M·黄，M·杰克森，P·彼德森，
申请(专利权)人：奥索·麦克尼尔药品公司，
类型：发明
国别省市：