农杆菌介导的霉菌特别是属于曲霉菌属的霉菌的转化制造技术

本发明专利技术涉及农杆菌介导的霉菌包括真菌子囊菌、担子菌、半知菌、鞭毛菌和接合菌亚部的霉菌种的转化。实施例证明了泡盛曲霉（原生质体和分生孢子）、构巢曲霉、黑曲霉、盘长孢状刺盘孢、豌豆腐皮镰孢、粗糙脉孢菌、雷西木霉、糙皮侧耳和二孢蘑菇（均为分生孢子）、以及禾本科镰孢（分生孢子和重新水化的ＡＴＣＣ冻干物）的转化。尤其在泡盛曲霉中，转化频率远高于传统的霉菌转化技术。还进一步发现，不仅一个可表达的基因能被导入这些霉菌，甚至这种基因的多个拷贝也可以，而且，如同用泡盛曲霉所举的例子，这种基因可被定向至诸如染色体的ｐｙｒＧ位点中。这些多拷贝可以是一种编码一种所需的、同源或异源的蛋白的基因。（*该技术在2018年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种制备转化的霉菌的方法，其特征为： （１）首先将一种ＤＮＡ片段克隆到一种根癌农杆菌载体上的Ｔ－ＤＮＡ两边界之间，该ＤＮＡ片段含有至少一个要被导入霉菌的可表达基因； （２）将在Ｔ－ＤＮＡ两边界之间含有该ＤＮＡ片段的载体导入一种在其ＤＮＡ中含有一个ｖｉｒ区域的根癌农杆菌菌株； （３）通过加入一种ｖｉｒ诱导化合物使含有所说ＤＮＡ片段的Ｔ－ＤＮＡ从所说的根癌农杆菌中释放，并将根癌农杆菌菌株与需要转化的霉菌一起温育；并 （４）根据导入ＤＮＡ或其表达产物的特征将转化的霉菌从未转化的霉菌中选择出来，并 可任选培养转化霉菌。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：AGM贝耶尔斯伯根，P邦多克，RJ高卡，MJA德赫罗特，PJJ胡伊卡斯，
申请(专利权)人：尤尼利弗公司，
类型：发明
国别省市：NL[荷兰]