TSA305基因制造技术

本发明专利技术提供了一种胰腺特异性基因，该基因包括编码显示于ＳＥＱＩＤＮＯ：１的氨基酸序列的碱基序列，该基因对于胰腺癌的研究、诊断和治疗以及在其它领域是特别有效的。（*该技术在2018年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及命名为TSA305的基因，该基因编码特异性地在胰腺中表达的蛋白质；更具体地说，涉及与线虫sel-1基因具高水平同源性并且预计具有抗癌活性的上述胰腺特异性基因。本专利技术还涉及由这样的基因编码的新蛋白质和该蛋白质的特异性抗体。同时，已有人报道说线虫sel-1基因对Notch／lin-12具有抑制作用，该Notch／lin-12在线虫神经发育过程中抑制了外胚层分化为成神经细胞(遗传学，143(1)，237-247(1996)；发育，124(3)，637-644(1997))。当所述的Notch／lin-12被强制表达时，它引起乳腺癌或白血病并且因此被认为是癌症相关的基因。因此认为上述对所述的该癌症相关基因具有抑制作用的sel-1基因对癌症也具有抑制作用。但是目前，这些基因的作用还没有被完全阐明。对上述基因的生理学作用的阐明和由此获得的信息对阐明疾病如恶性转化和炎症的发病的机理具有重要的意义，不仅在基础科学研究领域而且在药物领域人们都在盼望着对上述基因生理学作用的阐明，以确定如癌症和炎症这样的疾病的病因和研制出用于些疾病的治疗方法。基于上述目的，本专利技术人对来源于各种人组织的基因进行了努力的研究，结果，最近成功地分离出和鉴定了编码特异性地在胰腺中表达的蛋白质的基因并且发现利用该基因可以实现上述目的。结果，现在完成了本专利技术。因此，本专利技术提供了胰腺特异性基因TSA305，它包括编码具有显示于SEQ ID NO1的氨基酸序列的蛋白质的核苷酸序列，特别是TSA305是一个人基因。本专利技术也提供了胰腺特异性蛋白质(TSA305蛋白质)，它包括显示于SEQ ID NO1的氨基酸序列；本专利技术还提供了能与该蛋白质结合的抗体。本专利技术进一步提供了胰腺特异性基因TSA305，它是下面的(a)或(b)中定义的多聚核苷酸，特别是作为人基因的TSA305(a)包括显示于SEQ ID NO2的核苷酸序列的全部或一部分的多聚核苷酸；(b)在严谨条件下能够与具有显示于SEQ ID NO2的核苷酸序列的DNA杂交的多聚核苷酸。另外，本专利技术提供了DNA片段形式的上述基因，它可用作为用于基因检测的特异性探针或特异性引物。在用下面的缩写或标记表述氨基酸、肽、核苷酸、核酸等等时，其缩写或标记使用或遵守了IUPAC-IUB(关于生物学命名的IUPAC-IUB通讯，欧洲生物化学杂志，1389(1984))，“制作含有核苷酸序列或氨基酸序列的说明书的纲要”(由日本专利局编辑)和相关领域使用的常规标记。作为本专利技术基因的具体例子，可以提到的是从命名为“TSA305”的PCR产物的DNA序列推导出的一个基因，它将在后面的实施例部分中被显示。其核苷酸序列显示于SEQ ID NO3。所述的基因含有具有显示于SEQ ID NO2的编码区的人cDNA并且该cDNA编码由显示于SEQ ID NOl的794个氨基酸残基组成的新的胰腺特异性蛋白质(下文称之为TSA305蛋白质)，该基因全长由7885个核苷酸组成。利用FASTA程序(Person，W．R．等人，美国科学院年报，85，2444-2448(1988))在GenBank／EMBL数据库中检索的结果，证实本专利技术的TSA305基因的表达产物，被命名为TSA305蛋白质，与线虫sel-1基因(参见上文中记载的)具有非常高水平的同源性。根据该事实，认为本专利技术的基因如上文提到的sel-1基因一样对Notch／lin-12应具有抑制作用，该Notch／lin-12被认为是参与胚胎形成的癌症相关基因。本专利技术的基因座位是第14染色体的q24．3-q31．1，被认为第14号染色体上存在依赖于胰岛素的糖尿病(IDDM)的致病基因。根据该事实，强烈地暗示本专利技术的基因与糖尿病有关。进一步的研究表明本专利技术的基因的表达产物是含有纤维结合素Ⅱ型胶原结合域的蛋白质。这样的胶原结合位点紧接N末端，这一点暗示该蛋白质参与纤维形成，并且基于这一点，强烈地暗示本专利技术的基因参与纤维变性。另外，由于受测试的所有胰腺癌制剂均没有显示表达了本专利技术的基因并且该基因主要在正常胰腺中表达，这暗示本专利技术的基因可能对预测恶性转化有极大的价值。因此作为本专利技术提供TSA305基因和其表达产物的结果，本文亦给出了非常适用于阐明、了解、诊断、预防和治疗各种疾病例如乳腺癌、白血病、纤维变性、糖尿病和胰腺癌症，特别是胰腺癌的信息和手段。本专利技术的基因亦可用于研制诱导本专利技术的基因表达的新的药物，该药物可用于治疗上文提到的各种疾病。此外，据认为在单个动物或具体组织中，本专利技术基因的表达的检测或所述基因表达产物的检测或该基因突变(缺失或点突变)的检测或其异常表达的检测可适当地用于阐明或诊断上述疾病。本专利技术的基因具体地用含有编码显示于SEQ ID NO1的氨基酸序列的蛋白质的核苷酸序列的基因或是作为含有显示于SEQ ID NO2的核苷酸序列的多聚核苷酸的基因代表。但是，本专利技术的基因不特定地局限于此，例如可以是在上述特异性氨基酸序列导致某一修饰或具有与上述特异性核苷酸序列有一定水平的同源性的基因。因此本专利技术的基因也包括含有编码具有如下衍生的氨基酸序列的蛋白质的核苷酸序列的基因，所述衍生的氨基酸序列来源于通过将显示于SEQ ID NO1的氨基酸序列缺失、取代或叠加一个或多个氨基酸残基并且仍具有与TSA305同样的活性。如果被修饰的蛋白质是具有与含有显示于SEQ ID NO1的氨基酸序列的蛋白质的功能相同作用的产物，那么对“缺失、取代或叠加一个氨基酸残基或几个氨基酸残基”的程度和位点没有特别的限制。上面使用的术语“多个”是指2或2个以上，通常是指几个。在上述氨基酸序列的修饰(突变)等等可天然发生的同时，例如通过突变或转译后的修饰，在天然衍生的基因(例如本专利技术基因的具体例子)的基础上也可能进行人工修饰。本专利技术覆盖了具有其它这样的修饰或突变的具有上述特性的所有被修饰的基因，不管其原因和手段如何。作为上述人工手段的例子，可以提及的有位点特异性诱变(酶学方法，154350，367-382(1987)；文献同上，100468(1983)；核酸研究，129441(1984)；Zoku Seikagaku Jikken Koza(生物化学实验，第二系列)1“Idensi Kenkyubo(基因研究方法)Ⅱ”，由日本生物化学协会编辑，第105页(1986))和其它遗传工程技术、化学合成手段例如磷酸三酯法或磷酰亚胺方法(美国化学协会杂志894801(1967)文献同上，913350(1969)；科学，150178(1968)；四面体通讯，221859(1981)；文献同上，24245(1983))，和其结合。对于本专利技术基因的体现方式，可以提到的基因包括含有显示于SEQ ID NO3的全部或部分核苷酸序列的多聚核苷酸。该核苷酸序列所含的开放读码框(显示于SEQ ID NO:2的核苷酸序列)也用作为在上述氨基酸序列(SEQ ID NO1)中限定各氨基酸残基的密码子集合体的实例。本专利技术的基因不限于这一实例，而可以具有其中选定密码子的任意组合的核苷酸序列。可以以常规的方式进行密码子的选择，例如可以考虑在所使用的宿主中惯用的密码子(核酸研究，943(1981))。虽然本专利技术的基因是以单链DNA核苷酸表示的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种胰腺特异性基因，它包括编码具有如ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１所示氨基酸序列的蛋白质的碱基序列。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：原田阳介，尾崎浩一，
申请(专利权)人：大塚制药株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]