一种胶孢炭疽菌菌株及其用于生物除草的方法技术

本发明专利技术为一种胶孢炭疽菌菌株及其用于生物除草的方法，属于微生物应用于农业植物保护领域。胶孢炭疽菌菌株（ＱＺ－９７ａ），（保藏单位：中国微生物菌种保藏委员会；保藏日期：２０００年８月２８日保藏号：ＣＧＭＣＣ ＮＯ．０４８３），属婆婆纳专化型。用该专化型菌株的分生孢子以及菌丝的浓度为每毫升１０↑［５］至１０↑［９］，或者用该菌的分生孢子与１／８至１／２０常规用量的化学除草剂配合使用用于生物除草，可以在麦田、油菜田、大豆、棉田和玉米田等旱田中可以安全使用，无污染与残毒，并能同时用于控制上述几种杂草。对目标杂草控制效果可以达到８５％以上。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术为，属于微生物应用于农业植物保护、防除农作物杂草的
，专用于农田杂草的防除。随着人们对化学除草剂残留、环境污染以及耐药和抗药性杂草发展的认识，绿色食品和有机农业的大力推广，研制生物除草剂防除杂草已成为生产实际的迫切需求；也是一个新兴的技术和杂草防除最活跃的研究领域。它具有投资少、研制周期短、专一性强、对环境安全和不产生污染等优点。被认为是未来化学除草剂的替代产品。目前，商业化的生物除草剂品种有80年代初研制出的DeVine和Collego以及90年代末推出的Comperico和Biochon。这些除草剂在控制相应的目标杂草上起到了重要作用，甚至是唯一的选择。如DeVine的持效性可以保证使用一次，2-3年无须再除草。有希望商业化的生物除草剂项目有数十项，其中稗草、野荸荠等具有十分诱人的前景。波斯婆婆纳(Veronica persica Poir)是麦类、油菜等夏熟作物田的恶性杂草，对棉、玉米、大豆等幼苗生长也危害严重，蔬菜田、果园、草坪和园艺作物田中也常有发生。波斯婆婆纳的分布范围广泛，我国长江流域及华北地区均有其发生和危害的报道，另外它也是欧洲、西亚和美洲农田的恶性杂草。该杂草繁殖能力强，生长速度快，生长期长，耐药性强，人工、机械和化学防除比较困难。研制生物除草剂防除波斯婆婆纳不仅可以有效防除该杂草，而且对环境安全性高。目前，国内外尚无有关波斯婆婆纳的生物除草剂的研究报道，而该生物除草剂的开发将有极为显著的经济和社会效益。本专利技术的目的是针对麦类、油菜等夏熟作物田以及棉、玉米、大豆等苗期的恶性杂草波斯婆婆纳(Veronica persica Poir)以及猪殃殃等，筛选一种胶孢炭疽菌菌株，用于生物除草，能安全有效地控制和防治恶性杂草波斯婆婆纳、大婆婆纳(Veronicadidyma)、直立婆婆纳(Veronica arvense)和猪殃殃等，成本低，无污染，对农作物安全。本专利技术，其内容和实施方案如下胶孢炭疽菌菌株(QZ-97a)，(保藏单位中国微生物菌种保藏委员会；保藏日期2000年8月28日保藏号CGMCC NO.0483)，婆婆纳专化型(Colletotrichumgloeosporioides Penz.f.sp veronicae Sheng Qiang et Qing Zeng)，半知菌类(FungiImperfecti)，黑盘孢目(Melanconiales)，炭疽菌属(Colletotrichum Corda.)，胶胞炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides Penz.)，PDA培养基上菌株QZ-97a的菌落呈桔红色或粉红色，菌丝体埋生，菌丝分隔、分枝，气生菌丝未见或极少；培养中不产生分生孢子盘，于基面菌丝及分枝上产生大量分生孢子，分生孢子梗短，单细胞，5-20×2-5μm。分生孢子单细胞无色，圆筒形或卵形，孢子大小为2-4×5-15μm，新产生的孢子具1-2个油球，产生时间较长的孢子具有若干大小不等的液泡；培养过程中常形成桔红色的粘孢子团；附着胞圆形或椭圆形，3-5×3.5-6μm，在发病寄主上分生孢子盘生于角质层下，圆形或近圆形，直径50-240μm，盘中无刚毛；条件不适时在培养基内产生菌核，直径20-120μm。将上述胶孢炭疽菌菌株用于生物除草的方法为利用该专化型菌株的分生孢子以及菌丝的浓度为每毫升105至109，或者用该菌的分生孢子与1/8至1/20常规用量的化学除草剂配合使用。上述胶孢炭疽菌菌株用于生物除草的方法为上述化学除草剂主要指使它隆、高特克、苯磺隆、2甲4氯、2，4-D、百草敌等。专利技术人在对波斯婆婆纳的生物防治研究过程中发现了田间波斯婆婆纳的自然发病现象，故对其寄生真菌进行筛选研究。首先分离获得胶胞炭疽菌婆婆纳专化型(Colletotrichum gloeosporioides Penz sp.f.veronicae Sheng Qiang et Qing Zeng)菌株，研究发现其专化性强，对作物和其它绝大多数植物安全，但对波斯婆婆纳、直立婆婆纳、大婆婆纳和猪殃殃有很强的感染致病率，一周后的控制效果在85％以上。菌剂的培养条件、大批量生产方法均已进行了详细的研究；该菌的感染致病条件也进行了专门的研究工作。显示出该菌有较大的潜力开发成商品化生物除草剂。可用于油菜、棉花、小麦和蔬菜地控制上述4种杂草。目前，国内外尚没有有关研究波斯婆婆纳的真菌除草剂的报道，这方面的研究对解决该草的防除将提供一个新的优良的途径。本专利技术采集到的波斯婆婆纳罹病植株茎叶上均可见大小不等的褐色病斑，病斑初为圆点状，直径约0.5-2.0mm，病斑扩大后为圆形或不规则形状，严重时多个病斑联合，致使叶片整个坏死。茎上的病斑先为圆点状，然后逐渐发展为椭圆形或条形，严重者茎整段坏死。在光镜下观察病叶可见粗细不等的菌丝从叶片中伸出，还发现3种不同形态特征的分生孢子。经过分离后得到4种真菌，其培养特征与致病特征如下经观察，PDA培养基上菌株QZ-97a的菌落呈桔红色或粉红色，菌丝体埋生，菌丝分隔、分枝，气生菌丝未见或极少；培养中不产生分生孢子盘，于基面菌丝及分枝上产生大量分生孢子，分生孢子梗短，单细胞，5-20×2-5μm。分生孢子单细胞无色，圆筒形或卵形，孢子大小为2-4×5-15μm，新产生的孢子具1-2个油球，产生时间较长的孢子具有若干大小不等的液泡；培养过程中常形成桔红色的粘孢子团；附着胞圆形或椭圆形，3-5×3.5-6μm，在发病寄主上分生孢子盘生于角质层下，圆形或近圆形，直径50-240μm，盘中无刚毛；条件不适时在培养基内产生菌核，直径20-120μm。自然界采回的罹病波斯婆婆纳茎叶自上而下病症逐渐加重，上部茎叶具水渍状褐色病斑，圆点状，下部茎叶大片至整片烂死，病斑深褐色，表面可见桔红色或粉红色的孢子层。做病叶横切后镜检可见不具刚毛的分生孢子盘和大量与培养条件相同的分生孢子。炭疽菌QZ-97a纯培养产生的孢子在波斯婆婆纳上的致病症状为茎叶上最初水渍状褐色病斑，圆点状，随后数量增加似麻斑，最后叶大片或整片烂死，茎则大段或全部烂掉，呈深褐色，其上可见粉色的分生孢子层，分生孢子盘密集排列。经观察，病斑表面的孢子与所喷施的炭疽菌孢子一样。以上实验条件下的发病症状与自然病症相似。按其特征鉴定为半知菌类(Fungi Imperfecti)，黑盘孢目(Melanconiales)，炭疽菌属(Colletotrichum Corda.)，胶胞炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides Penz.)。该专化型主要侵染婆婆纳属(Veronica L．)植物以及猪殃殃(Galium aparine L.var.tenerum(Gren.et Godr.)Rehb.)，对水稻、小麦、棉花、玉米、大豆、油菜和大麦等主要作物高度免疫，以及供试的其它19科32种植物，26种高度免疫、6种免疫(表1和表2)，故可以用于小麦、棉花、玉米、大豆、油菜、白菜和大麦等作物田，防除杂草。其培养方法为该菌可用下列培养基培养，并诱导产生分生孢子PDA培养基--马铃薯葡萄糖琼脂培养基马铃薯 200g葡萄糖 20g琼脂20g水 1LLEPDA培养基--波本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种胶孢炭疽菌菌株，其特征在于： 胶孢炭疽菌菌株（ＱＺ－９７ａ），（保藏单位：中国微生物菌种保藏委员会；保藏日期：２０００年８月２８日；保藏号：ＣＧＭＣＣ ＮＯ．０４８３），婆婆纳专化型（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ Ｐｅｎｚ．ｆ．ｓｐ ｖｅｒｏｎｉｃａｅ Ｓｈｅｎｇ Ｑｉａｎｇ ｅｔ Ｑｉｎｇ Ｚｅｎｇ），半知菌类（Ｆｕｎｇｉ Ｉｍｐｅｒｆｅｃｔｉ），黑盘孢目（Ｍｅｌａｎｃｏｎｉａｌｅｓ），炭疽菌属（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ Ｃｏｒｄａ．），胶胞炭疽菌（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ Ｐｅｎｚ．），ＰＤＡ培养基上菌株ＱＺ－９７ａ的菌落呈桔红色或粉红色，菌丝体埋生，菌丝分隔、分枝，气生菌丝未见或极少；培养中不产生分生孢子盘，于基面菌丝及分枝上产生大量分生孢子，分生孢子梗短，单细胞，５－２０×２－５μｍ；分生孢子单细胞无色，圆筒形或卵形，孢子大小为２－４×５－１５μｍ，新产生的孢子具１－２个油球，产生时间较长的孢子具有若干大小不等的液泡；培养过程中常形成桔红色的粘孢子团；附着胞圆形或椭圆形，３－５×３．５－６μｍ，在发病寄主上分生孢子盘生于角质层下，圆形或近圆形，直径５０－２４０μｍ，盘中无刚毛；条件不适时在培养基内产生菌核，直径２０－１２０μｍ。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：强胜，曾青，朱春林，戴宝江，
申请(专利权)人：南京农业大学，南通江山农药化工股份有限公司，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]