含有肿瘤细胞和提取物的组合物及其使用方法技术

本发明专利技术涉及含有经半抗原修饰的肿瘤细胞及其提取物的组合物，以及通过给需要治疗的受试者施用治疗有效量的组合物以治疗癌症的方法，所述组合物含有肿瘤细胞或肿瘤细胞提取物。本发明专利技术的肿瘤细胞和提取物及其组合物能引发Ｔ淋巴细胞，该Ｔ淋巴细胞具有浸润哺乳动物肿瘤的特性；能引发针对哺乳动物肿瘤的炎性免疫应答；引发针对哺乳动物肿瘤的迟发型超敏反应和／或在体外刺激Ｔ淋巴细胞。本发明专利技术还涉及有效接种方案，该方案可通过诱导下列中的至少一个而用于诱导患有癌症的哺乳动物患者的抗肿瘤反应：肿瘤坏死，肿瘤消退，肿瘤炎症，肿瘤被激活的Ｔ淋巴细胞浸润，迟发型超敏反应和患者生存期的延长。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及含有经半抗原修饰的肿瘤细胞及其提取物的组合物，和通过给需要治疗的受试者施用治疗有效量的组合物以治疗癌症的方法，所述组合物含有肿瘤细胞或肿瘤细胞提取物。本专利技术还涉及可用于诱导癌症患者的抗肿瘤反应的有效免疫接种方案。Fujiwara等，免疫学杂志，1984,132,1571表明只要首先在缺乏半抗原-特异性的抑制性T细胞时用半抗原致敏小鼠，某些半抗原化的肿瘤细胞，即与半抗原三硝基苯基(TNP)缀合的肿瘤细胞即能在鼠系统中诱导针对未经修饰的肿瘤细胞的全身性免疫力。得自经治疗小鼠的脾细胞能完全和特异性地防止未经治疗的受体动物中的肿瘤生长。Flood等，免疫学杂志，1987,138,3573表明用与TNP-缀合并经紫外光-诱导的“消退性”肿瘤免疫的小鼠能排斥与TNP-缀合的，原本为非免疫性的“进行性”肿瘤。另外，这些小鼠随后能抗未缀合的“进行性”肿瘤的攻击。在另一个实验系统中，Fujiwara等，免疫学杂志，1984,133,510阐明经环磷酰胺预治疗之后被三硝基氯苯(TNCB)致敏的小鼠能通过肿瘤细胞的原位半抗原化来消除大(10mm)肿瘤；随后，这些动物能特异性地抗未缀合的肿瘤细胞的攻击。因包括下列方面的几个原因，Fujiwara等人的教导与本专利技术的有所不同A.Fujiwara所述组合物中所用的细胞得自经诱导的可移植鼠肿瘤，而不是自发性的人肿瘤；B.Fujiwara所述组合物用于免疫预防，本专利技术用于免疫治疗；C.Fujiwara所述组合物作为局部治疗被施用，本专利技术的组合物通过全身性接种被施用；和D.Fujiwara所述组合物不会导致肿瘤消退，本专利技术的组合物能导致肿瘤消退和/或能使接受治疗的至少大部分患者的生存期延长。最近已阐明了能与未经修饰的组织发生交叉反应的T细胞的存在。Weltzien及其同事阐明用经TNP-修饰的同系淋巴细胞免疫的小鼠所产生的Ⅰ类MHC-限制的T细胞克隆能与MHC-相关的，经TNP-修饰的“自身”肽反应。Ortmann,B等，免疫学杂志，1992,148,1445。另外，已证实用经TNP-修饰的淋巴细胞免疫小鼠会导致产生脾T细胞，所述细胞在体外表现出针对经TNP-修饰之细胞的细胞毒应答和再次增殖。Shearer,G.M.欧洲免疫学杂志，1974,4,527。用经DNP-或TNP-修饰的自身细胞进行免疫所产生的淋巴细胞应答未经修饰的自身细胞的潜力相当重要，因为它与两个临床难题相关1)药物-诱导的自身免疫病，和2)癌症免疫治疗。关于前者，有人建议将摄取的药物用作半抗原，该药物与正常的组织蛋白质联合形成能由T细胞识别的免疫原性复合物，Tsutsui,H等，免疫学杂志，1992,149,706。随后，会产生诸如全身性红斑狼疮的自身免疫病，甚至在停止服用令人不舒服的药物之后仍会继续发病。也就是暗示最后产生了与未经修饰的组织交叉反应的T淋巴细胞。这些实验的共同特征是在抑制性细胞未被诱导的环境中用半抗原致敏。得自用环磷酰胺预治疗并经TNCB-致敏之小鼠的脾细胞表现出抗辐射的“放大辅助细胞功能”，即它们能特异性增强体外抗-TNP细胞毒性的产生。另外，一旦这些放大的辅助细胞通过体外暴露于与TNP缀合的自身淋巴细胞而被激活，它们也能增强针对不相关的抗原(包括肿瘤抗原)的细胞毒性(Fujiwara等，1984)。Flood等(1987)，文献同上表明该放大辅助细胞活性是由具有Lyt-1+,Lyt-2-,L3T4+,I-J+表型的T细胞介导的，该文献认为这些细胞是一类新的免疫调节性T细胞，即反抑制细胞。对黑素瘤患者的免疫治疗表明施用高剂量(1000mg/M2)或低剂量(300mg/M2)的环磷酰胺，3天后用初始抗原匙孔嘁血蓝蛋白致敏，可显著增强针对该抗原的迟发型超敏反应的获得(Berd等，癌症研究，1982,42,4862；癌症研究，1984,44,1275)。低剂量环磷酰胺预治疗使转移型黑素瘤患者对注射的自身黑素瘤疫苗作出反应，针对自身黑素瘤细胞产生了迟发型超敏反应(Berd等，癌症研究，1986,46,2572；Cancer Invest.,1988,6,335)。施用环磷酰胺导致外周血淋巴细胞非特异性T抑制功能降低(Berd等，癌症研究，1984,44,5439；癌症研究，1987,47,3317)，这可能是通过耗尽CD4+,CD45R+抑制型诱导性T细胞来实现的(Berd等，癌症研究，1988,48,1671)。这一免疫治疗方式的抗肿瘤效果似乎受开始施用疫苗至产生针对肿瘤细胞的迟发型超敏反应之间过长的时间间隔所限制(Berd等，美国癌症研究协会进展(Proc.Amer.Assoc.Cancer Res.),1988,29,408(#1626))。因此，仍需要增强上述疫苗的治疗效力，使其免疫原性更强。目前，大多数肿瘤免疫学家同意下列观点，即免疫系统破坏肿瘤的前提条件是负责肿瘤免疫力的T淋巴细胞白细胞浸润至肿瘤块。因此，大量注意力集中于由Stephen Rosenberg博士在NCI开创的“TIL”疗法。Rosenberg博士和其他研究人员从人转移癌中提取到一些天然存在的T淋巴细胞，通过在体外用T淋巴细胞生长因子白介素2(IL-2)培养，所述细胞的数目大大提高，Topalian等，临床肿瘤杂志(J.Clin.Oncol.),1988,6,839。然而，由于注射的T细胞“定居”于肿瘤位点的能力有限，此疗法不是非常有效。已在多项研究中治疗性地利用了高浓度的IL2将淋巴细胞诱导成为非特异性细胞毒杀伤细胞的能力(Lotze等，生物反应杂志，1982,3,475；west等，新英格兰医学杂志，1987,316,898)。然而，高剂量静脉内IL2的严重毒性使得该方法具有局限性。人们很少注意到下列观察结果即较低浓度的IL2能通过诱导能抗原激活的T细胞的扩展而用作免疫佐剂(Talmadge等，癌症研究，1987,47,5725；Meuer等，柳叶刀，1989,1,15)。因此，仍需要了解并尝试利用IL2作为免疫佐剂的用途。据信，人黑素瘤能表达独特的表面抗原，所述抗原可被T淋巴细胞识别，Old,L,癌症研究，1981,41,361；Van der Bruggen,P等，科学，1991,254,1643；Mukherji,B等，免疫学杂志，1986,136,1888；和Anichini,A等，免疫学杂志，1989,142,3692。然而，体内诱导针对该抗原的有效的T细胞-介导之反应的困难限制了在本专利技术人所做工作之前的免疫治疗方法。人们提出几个模型用于解释什么情况下对人肿瘤-相关抗原似乎具有耐受性，它们包括1)下调早期抗肿瘤反应的肿瘤抗原-特异性抑制细胞，Mukherji等，文献同上；Berendt,M.J和R.J.North.,实验医学杂志，1980,151,69。2)人肿瘤细胞无法引发T辅助细胞或为所述T细胞提供共刺激信号，Fearon,E.R等，细胞，1990,60,397；Townsend,S.E和J.P.Allison,科学，1993,259,368；和3)肿瘤细胞上主要组织相容性产物的表面表达减少，从而限制T细胞对它们的识别，Ruiter,D.J.,癌症生物学研讨会，1991,2,35本文档来自技高网...

【技术保护点】
在患有肿瘤的哺乳动物患者中诱导抗肿瘤反应的方法，所述方法包括：给所述患者施用含有治疗有效量的肿瘤细胞或肿瘤细胞提取物的组合物，所述肿瘤细胞或肿瘤细胞提取物：（ｉ）与半抗原缀合；（ｉｉ）其肿瘤类型与患者肿瘤的类型相同；（ｉｉｉ）对 所述患者而言，不是同种异体的，且（ｉｖ）注射后不能在患者体内生长；且以每周为间隔重复给药。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：D伯德，
申请(专利权)人：托马斯杰斐逊大学，
类型：发明
国别省市：US[美国]