单核细胞来源的核酸和相关的组合物及方法技术

描述了编码多种单核细胞来源蛋白质的核酸以及有关的组合物，包括纯化的蛋白质和特异性抗体。还提供了应用这种组合物的方法。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术是针对与在免疫系统中具有功能作用的单核细胞内发现的某些基因有关的组合物。这些基因在控制哺乳动物免疫系统的发育、分化和/或生理作用中发挥功能。特别是本专利技术提供了几种核酸、蛋白质、抗体，以及应用它们的方法。专利技术背景单核细胞是吞噬细胞，属于单核吞噬细胞系统，存在于循环系统中。这些细胞在骨髓中发生，它们一旦开始分化就只能在骨髓腔隙内停留短时间。然后它们进入循环系统，在这里可以保持相对长的一段时间，例如几天。通过被称为血细胞渗出的过程单核细胞可进入组织和体腔，在此它们分化成巨噬细胞，并可能分化成树状细胞。在炎症反应中，循环系统中单核细胞的数量可能倍增，增加数量的单核细胞许多都渗出进入炎症部位。关于单核细胞及其功能的评述见例如Gallin等(编著)1988，炎症基本原理和临床相关性，Raven出版，NY；vanFurth(编著)1985，单核吞噬细胞特征，生理学和功能，MartinusNijhoff，Dordrecht，Netherlands。抗原呈递(Antigen Presentation)指的是蛋白质抗原被抗原呈递细胞(APC)吸收、加工，然后被识别而启动免疫应答的细胞过程。最具活性的抗原呈递细胞已被鉴定是巨噬细胞，巨噬细胞是从单核细胞，树状细胞和某些B细胞直接发育而成。在大多数组织中都发现有巨噬细胞，此细胞具有内在化广泛多种蛋白质抗原和微生物的高度活性。它们具有高度发展的内吞活性，并分泌许多对启动免疫应答具有重要作用的产物。因此认为，许多由单核细胞表达或由单核细胞激活而诱导的基因对抗原的摄取、加工、呈递，或对所导致免疫应答的调节是重要的。尽管单核细胞对免疫系统的功能具有意义，但对这些细胞的特征，不论是对于它们所表达的蛋白质还是对于它们的许多功能方面都仍然了解甚少，特别是对于与免疫应答启动有关的过程和机制，包括抗原的加工和呈递。因此本领域需要有一种作用剂，用于诊断和治疗由例如抗原呈递细胞的不适当调节、发育或生理作用所引起的疾病状态。专利技术概述本专利技术通过提供几种组合物和方法实现了这种需要，用于确定某些基因产物的存在，含量、分布和正常状态，并用于促进发现治疗某些疾病状态的作用剂。本专利技术是基于发现了从激活的单核细胞中分离的新型基因和基因产物。本专利技术提供了分离的核酸序列，包括完整的蛋白质编码序列，以及它的互补序列，此分离的核酸序列显示在序列SEQ ID NO1、3、5、7或9中，含有至少约12个连续的核苷酸，优选地至少约18个、更优选地至少约20～35个、而最优选地是含有35～55或更多的连续的核苷酸；或者它们编码显示在序列SEQ ID NO2、4、6、8或10中的氨基酸序列。本专利技术包括这些序列的序列-保守性变异体的功能-保守性变异体。这种核酸可能是DNA、RNA、DNA/RNA双螺旋、蛋白质-核酸(PNA)、或者它们的衍生物。本专利技术还包括含有这些序列的重组DNA载体(包括DNA表达载体)；含有这种载体的细胞，包括细菌、真菌、植物、昆虫和哺乳动物细胞；以及几种方法，用于产生包括由这些序列编码的RNA和多肽的表达产物。本专利技术的多肽序列包含来源于SEQ ID NO2、4、6、8或10的至少8个连续的氨基酸残基，优选地至少约10个，而更优选地至少约12个或更多。功能-保守性变异体和同系物包括在本专利技术的范围内。本专利技术进一步提供了结合性组合物，特别是抗体，最特别地是单克隆抗体，它们可特异性地结合具有显示在SEQ ID NO2、4、6、8或10中的氨基酸序列的多肽，或者它们的功能保守性变异体或同系物。还提供了几种方法，用于在宿主动物中产生具有所需结合特异性的抗体。专利技术详述在此评述中所引用的所有专利申请，专利和参考文献在此均被完整地引入作为参考。在实施本专利技术的过程中，应用了分子生物学、微生物学和重组DNA中的许多常规技术。这些技术是已被熟知的，在下列文献中有详细的说明例如Sambrook等1989，分子克隆实验室手册，第二版，冷泉港实验室出版，冷泉港，纽约；DNA克隆实用技术，I和II卷，1985(D.N.Glover编著)；寡核苷酸合成，1984，(M.L.Gait编著)；核酸杂交，1985，(Hames和Higgins)；转录和翻译，1984(Hames和Higgins编著)；动物细胞培养，1986(R.I.Freshney编著)；固相化细胞和酶，1986，(IRL出版)Perbal，1984，分子克隆实用指南；酶学方法丛书(Academic出版公司)；用于哺乳动物细胞的基因转移载体，1987(J.H.Miller和M.P.Calos编著，冷泉港实验室)；以及酶学方法，154和155卷(分别由Wn和Grossman以及Wu编著)。定义1.“单核细胞来源的”核酸或多肽指的是最初从其中分离出此序列的来源。2.“核酸”或“多核苷酸”指的是任何长度的含嘌呤和嘧啶的聚合体，包括聚核糖核苷酸或聚脱氧核糖核苷酸，或者混合的聚核糖-聚脱氧核糖核苷酸。包括单链和双链分子，即DNA-DNA，DNA-RNA和RNA-RNA杂交体，以及由碱基结合于氨基酸主链形成的“蛋白质核酸”(PNA)。还包括含有修饰碱基的核酸。3.“编码序列”或“蛋白质编码序列”是能够被转录成mRNA和/或能够被翻译成多肽的多核苷酸序列。编码序列的界限一般由5′-末端的翻译起始密码子和3′-末端的翻译终止密码子来确定。4.核酸序列的“互补序列”指的是参与同初始序列作Watson-Crick碱基配对的“反义”序列。5.“分离的”核酸或多肽指的是从它原来的环境(例如，如果是天然存在的指其天然环境)中取出的成分。分离的核酸或多肽优选地含有少于大约50％的原来与其相结合的细胞成分，更优选地是少于大约75％，而最优选地是少于大约90％。6.来源于指定序列的核酸或多肽序列指的是与该指定序列的某区域相对应的序列。对于核酸序列这包括与该序列相应的或互补的序列，以及“序列-保守性变异体”和“功能-保守性变异体”。对于多肽序列这包括“功能-保守性变异体”。序列-保守性变异体是其中在给定的密码子位置一个或几个核苷酸的改变不导致在此位置所编码的氨基酸发生改变的变异体。功能-保守性变异体是其中在一个多肽中某一给定的氨基酸残基已改变，而基本上不改变该天然多肽的整体构象和功能的变异体，包括但不局限于用另一具有相似生理-化学特性(例如酸性、碱性和疏水性等)的氨基酸取代某一氨基酸。“功能-保守性”变异体还包括具有诱发对所指定多肽产生特异性抗体能力的任何多肽。7.“探针”指的是能与目标区域内的序列形成杂交结构的核酸或寡核苷酸，是由于此探针内至少一个序列与此目标区域内的序列具有互补性。8.当在限定的严格条件下核酸的至少一条链可对另一核酸的链退火时，此核酸是相互“可杂交的”。由下列因素决定杂交的严格性例如a)进行杂交和/或漂洗的温度；及b)杂交液和漂洗液的离子强度和极性(例如甲酰胺)，以及其它的参数。杂交要求二个核酸含有基本互补的序列，但是取决于杂交的严格性可能容许有错配。适合于使核酸杂交的严格性取决于此核酸的长度和互补性程度，以及本领域熟知的一些可变因素。9.“致免疫性成分”是能够在宿主动物体内诱发体液性和/或细胞性免疫应答的结构部分。10.“抗原成分”是能以足够强的亲和性结合于它的特异本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽，包含来自ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２、４、６、８或１０的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：E巴特斯，N福尼尔，L查卢斯，P加罗尼，
申请(专利权)人：先灵公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]