脱脂棉固定化脂肪酶及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了脱脂棉固定化脂肪酶及其制备方法和应用，依据脂肪酶的水/油界面活化机制为理论基础，以乙醇处理的脱脂棉纤维代替界面上的水分子，并作为固定化载体，通过物理吸附使脂肪酶溶液中的酶吸附在脱脂棉纤维上，经恒温脱水挥发，可使脂肪酶固定在脱脂棉上，得到脱脂棉固定化脂肪酶。该固定化脂肪酶适于催化非水相的酯化反应，特别是转酯反应，典型代表是脂肪酸乙烯酯与醇类之间的反应。相对于脂肪酶粉，相应的脱脂棉固定化脂肪酶的非水相催化活性和稳定性显著增加。

Immobilized lipase in skimmed cotton and its preparation and Application

The present invention discloses cotton immobilized lipase and its preparation method and application, on the basis of lipase in the water / oil interface activation mechanism as the theoretical basis, instead of water molecules on the interface with the cotton fiber ethanol treatment, and as the carrier for immobilization of enzyme in solution, the fat enzyme adsorbed on cotton fiber by physical the constant temperature dehydration adsorption, volatilization, the lipase immobilized on cotton, cotton by immobilized lipase. The immobilized lipase is suitable for catalytic esterification in non aqueous phase, especially transesterification, typically the reaction between fatty acid vinyl esters and alcohols. Compared with the lipase powder, the non-aqueous catalytic activity and stability of the immobilized lipase of the defatted cotton increased significantly.

【技术实现步骤摘要】
脱脂棉固定化脂肪酶及其制备方法和应用
本专利技术涉及非水酶学领域，具体说，涉及一类以脱脂棉为载体的固定化脂肪酶，以及通过简单、安全和有效的方式，制备高非水活性和稳定性的脱脂棉固定化脂肪酶的方法和应用。
技术介绍
脂肪酶是一类有重要工业应用价值的生物催化剂：脂肪酶可以催化合成高级香料、药物中间体、高档液晶材料和生物柴油等，特别是催化合成酯类化合物。近些年来，酯类化合物在食品、饮料、化妆品、医药工业等领域的应用越来越多，纯度要求也越来越高，如乙酸己酯、乙酸癸酯和乙酸肉桂酯等。传统的合成方法是化学合成，使用酸或无机金属化合物作为催化剂，通常要求加热到较高的温度才能使反应能够有效进行，而且会有较多的副产物生成，产物的分离也有一定困难，因此化学法合成酯类化合物消耗能量多，对设备腐蚀严重，且产物的纯度难以达到理想的目标。脂肪酶作为绿色催化剂，可以在常温下进行催化有机化学反应，而且因为脂肪酶对于酯键有相对专一选择性，所以催化反应时，能量消耗少，副产物少，产物易于分离提纯。脂肪酶因有区域选择性和立体异构选择性，也应用于手性醇和羧酸的酶促拆分，为药物中间体领域和手性材料领域提供高化学纯和高光学纯的手性本文档来自技高网...

【技术保护点】
脱脂棉固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于，将30～500mg脂肪酶粉，加入到50～250mL的三角烧瓶或其他器皿中，加入0.5～5mL蒸馏水，摇匀成酶溶液后，加入20～300mg处理过的脱脂棉，随后器皿敞口固定在恒温振荡培养器或放置在烘箱中，在20～50℃、120～220rpm条件下，保持3～30h，至恒重，即得脱脂棉固定化脂肪酶。

【技术特征摘要】
1.脱脂棉固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于，将30～500mg脂肪酶粉，加入到50～250mL的三角烧瓶或其他器皿中，加入0.5～5mL蒸馏水，摇匀成酶溶液后，加入20～300mg处理过的脱脂棉，随后器皿敞口固定在恒温振荡培养器或放置在烘箱中，在20～50℃、120～220rpm条件下，保持3～30h，至恒重，即得脱脂棉固定化脂肪酶。2.根据权利要求1的制备方法，其特征在于，脱脂棉在使用之前，要进行预处理：10g市售脱脂棉放在100～200mL的无水乙醇中浸泡10～30h，然后在同体积的乙醇中洗涤2次，滤除乙醇后，在30～60℃烘干，再用干净的金属丝敲打至蓬松状，备用。3.根据权利要求1的制备方法，其特征在于，制备的脱脂棉固定化脂肪酶，在使用时，可以从固定化操作所用的器皿中取出使用，如果是三角烧瓶，也可以直接使用，将反应液加入此三角烧瓶中催化反应。4.根据权利要求1的制备方法，其特征在于，固定化时，可在三角烧瓶中进行，也可在平口瓶、烧杯和培养皿等器皿配制酶溶液，加入脱脂棉吸附酶溶液，后放置在烘箱中，在20～50℃烘干3～6h，制备脱脂棉固定化脂肪酶。5.根据权利要求1的制备方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：丛方地，康洁，王笑，张莹，周美娟，
申请(专利权)人：天津农学院，
类型：发明
国别省市：天津,12