高效抗真菌苦瓜几丁酶基因制造技术

从具有抗病性较强的苦瓜中克隆的一种高效抗真菌苦瓜几丁酶的全长ｃＤＮＡ基因，用该基因构建植物表达载体以转化各种植物，蛋白质具有抗真菌活性高，胞外表达等特点，它所编码的信号肽序列可以指导苦瓜几丁酶的正确加工和运输。同时，苦瓜几丁酶具有较强的耐热性和较宽的适宜ｐＨ范围，因此，该蛋白可作为抗真菌蛋白在医药中应用。利用本发明专利技术克隆的基因构建原核表达载体转化大肠杆菌，通过微生物高效稳定的表达来直接生产医药中所需要的抗真菌蛋白。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，特别是涉及一种高效抗真菌苦瓜几丁酶的全长cDNA基因。
技术介绍
真菌病害是作物减产和品质下降的主要原因之一。基因工程是植物抗真菌育种的新途径。几丁质是真菌细胞壁的主要成分。几丁酶能专一催化几丁质的水解，从而抑制真菌的生长增殖。由于在植物和动物中没有几丁质存在，几丁酶对人畜和植物是安全的。正因为如此，几丁酶基因被认为是植物抗真菌基因工程的理想目的基因。将几丁酶基因作为抗病因子，通过遗传转化提高植物抗真菌病害的能力，已有少数成功的例子。但从总体上看，转几丁酶基因植物普遍存在抗性水平低、抗菌谱窄等缺点。造成这种结果的可能原因是，①目的基因所编码的几丁酶活性不强，不能在低浓度时有效抑制病原真菌的生长；②病原真菌在与植物长期的共进化过程中产生了能抑制寄主植物几丁酶的抑制物；③几丁质酶在转基因植物的细胞内表达，不能抑制胞外生长的病原真菌。要在转几丁酶基因植物研究中取得突破，关键在于克隆抗真菌活性强的几丁酶基因。在自然界的几乎所有生物门类中都发现了几丁酶的存在，目前已经克隆了数百种几丁酶基因。在众多已克隆的几丁酶基因中，只有少部分进行了蛋白质活性的研究，大多数是通过本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高效抗真菌苦瓜几丁酶基因，其特征在于，该基因具有如下的核苷酸序列及推断的氨基酸序列：ＡＴＡＴＣＡＡＧＧＡＧＡＡＡＧＴＡＣＴＣＣＧＴＴＧＴＴＧＡＡＧＴＧＡＴＣＴＴＣＴＣＡＴＡＣＡＣＣＡＡＡＣＡＡＣＡＡＴＧ－ＡＡＧ－ＣＴＴ－ＣＡＴ－ ＡＣＧ－ＣＴＴ－ＡＴＴ－ＧＴＣ－ＴＴＡ－ＧＣＣ－ＴＴＴ－ＧＣＣ－ＴＴＣ－ＧＴＴ－ＴＴＧ－ＧＧＡ－ＧＣＣ－ＧＣＡ－ＧＣＡ－ＧＡＧＭ Ｋ Ｌ Ｈ Ｔ Ｌ Ｉ Ｖ Ｌ Ａ Ｆ Ａ Ｆ Ｖ Ｌ Ｇ Ａ Ａ Ａ ＥＣＡＡ－ＴＧＴ－ＧＧＧ－ＣＧ Ｇ－ＣＡＧ－ＧＣＣ－ＡＡＴ－ＧＧＣ－ＧＣＣ－ＣＴＣ－ＴＧＣ－ＣＣＣ...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：裴炎，肖月华，侯磊，罗小英，杨星勇，杨光伟，
申请(专利权)人：西南农业大学，
类型：发明
国别省市：85[中国|重庆]