一种根瘤菌浓缩液体菌剂的制备方法技术

本发明专利技术属于农业微生物根瘤菌制剂技术领域。其特征是，提出一种制备浓缩液体根瘤菌剂的方法。根瘤菌发酵培养液经离心洗涤后的菌体，用２倍量灭菌生理盐水再悬浮并分装青霉素小瓶，压盖后抽真空并再充以氮气即成。本菌剂具有活菌数高、保存期长、生产工艺简单和易于实现自动化生产等优点，适用于以微生物活菌为产品的多种微生物制剂的生产。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于农业微生物根瘤菌制剂领域。传统的微生物活菌制剂主要采用液体与固体两种剂型。液体剂型直接采用发酵培养液，虽然生产工艺简单、使用方便，但有效期较短，运输成本较高。固体菌剂在用离心或扳框过滤法分离微生物细胞的基础上添加适量塑性剂后加工成粉剂、片剂或胶囊剂。该剂型适用于芽胞杆菌、霉菌和酵母等活菌制剂，具有保存期较长、运输和使用方便等优点，但生产工艺复杂，成本较高。经检索仅在国内找到5个与本申请有关的专利申请，在中国专利88105821“苏云金杆菌颗粒混剂”专利技术专利中，专利技术者将苏云金杆菌(Bacillus thuringensis)发酵液浓缩后吸附在20-40目的河砂上，再与化学农药颗粒剂混合成杀虫剂(朱邦雄1988)。在中国专利90108094“含乳糖酶干酵母制剂的制备方法”中，专利技术者将产乳糖酶8的活酵母冰冻干燥后，将半透性和疏水性材料通过低温喷雾蒸发将含酶酵母包膜成粒，再压片包衣成药用微生物酶制剂(邵靖宇等，1990)。在中国专利97117033“沼泽红假单胞菌(Rhodopseudmonas palustris)制剂的制备方法及用途”中，提出了直接采用该菌本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种根瘤菌菌剂的制备方法，其特征在于，所述的方法包括以下步骤：（１）根瘤菌的液体深层通气培养：根瘤菌用一种编号为ＹＭＡ的甘露醇酵母汁培养基，经斜面菌种培养、液体三角瓶振荡培养、种子罐液体深层通气培养和发酵罐液体深层通气培养并经涂片作 革兰氏染色镜检无杂菌污染后即得到所述的根瘤菌工业发酵培养液；（２）根瘤菌培养细胞的离心浓缩、洗涤与再悬浮：上述发酵培养液经４℃，５０００ｒｐｍ，２０分钟离心后弃上清，按重量加入２０倍量无菌水再悬浮洗涤后，依上法再离心并弃去上清液，按 重量加入２倍量的无菌生理盐水后制成菌悬液；（３）浓缩细胞液的分装、抽真空与充氮气：上述浓缩细胞液按每瓶１...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：周俊初，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：83[中国|武汉]