表达传染性囊病病毒VP2蛋白的重组T4噬菌体的构建及其应用制造技术

含有传染性囊病病毒ＶＰ２蛋白的重组Ｔ４噬菌体的构建方法，其特征在采用基因重组的方法获得的，其方法是：用ＥｃｏＲ　　Ｉ在３７℃分别消化ｖｐ２基因的ＰＣＲ产物和质粒ｐＲ，接着在Ｔ４连接酶的作用之下，连接消化的ｖｐ２的ＰＣＲ产物和质粒ｐＲ，用连接产物转化大肠杆菌ＤＨ５α，经Ａｍｐ↑［ｒ］抗性筛选，获得插入了ｖｐ２基因的重组子，然后用１对特异性引物ＳＯＣ－Ｓ／ＶＰ２－Ａ进行ＰＣＲ筛选；对ＰＣＲ筛选阳性的细菌，挑取单菌落接种于３ｍＬ　　ＬＡ培养基中，３７℃，２００ｒ／ｍ振摇培养１６－２０小时，抽提质粒，再经限制性内切酶消化和序列测定，获得含有传染性囊病病毒ｖｐ２基因的重组整合质粒ｐＲ－ＶＰ２；用重组整合质粒ｐＲ－ＶＰ２和缺陷性Ｔ４噬菌体Ｔ４－Ｚ１进行同源重组，获得表达ＶＰ２蛋白的重组Ｔ４噬菌体。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：曹永长，毕英佐，史泉城，马静云，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：