含乳铁蛋白及其肽的全蚕蛹粉的生产方法技术

本发明专利技术的含乳铁蛋白及其肽的全蚕蛹粉的生产方法是采用杆状病毒为载体，以家蚕蚕蛹为宿主生产与天然乳铁蛋白及其肽生物学活性相似的基因工程产品的。其生产、使用过程安全，不存在对人畜和环境的潜在危险。将本发明专利技术生产的全蚕蛹粉用作饲料添加剂，在补充饲料蛋白的同时起到杀菌抗病毒、提高动物自身的免疫力的作用，可有效地防治断乳仔猪的腹泻，以生产出无抗生素残留的高品质畜产品。（*该技术在2024年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及含乳铁蛋白及其肽的全蚕蛹粉的制备方法。
技术介绍
乳铁蛋白(Lactoferrin简称LF)，1960年从牛乳中分离获得，它是一种铁结合性糖蛋白，分子量80KDa左右，LF具有转运铁离子和杀菌抗病毒的功效，它在乳腺中的表达量最高，而且以人乳中的含量最高，牛乳中的含量相对较少。其独特的作用机理引起人们的高度重视，并将其从牛奶中分离纯化后加入婴儿奶粉。乳铁蛋白肽(Lactoferricin，简称Lfcin)是乳铁蛋白在动物消化道内经蛋白酶降解后的产物，其某些生物学活性比乳铁蛋白还要强。全蚕粉营养价值丰富，具有一些特殊的功效，是一种优良的蛋白源，但是含有乳铁蛋白或乳铁蛋白肽的全蚕蛹粉目前尚无相关报导。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种能生产含乳铁蛋白及其肽的全蚕蛹粉的方法。本专利技术的生产含乳铁蛋白及其肽的全蚕蛹粉的方法，包括以下步骤1)取泌乳母畜乳腺腺泡，液氮冷冻，研磨成粉末，提取总RNA并通过反转录得到乳铁蛋白或乳铁蛋白肽的cDNA，根据乳铁蛋白或乳铁蛋白肽基因特征设计一对各带一个酶切位点的引物，利用RT-PCR技术得到DNA，定向克隆入大肠杆菌克隆载体，转化大肠本文档来自技高网...

【技术保护点】
含乳铁蛋白及其肽的全蚕蛹粉的生产方法，包括以下步骤：１）取泌乳母畜乳腺腺泡，液氮冷冻，研磨成粉末，提取总ＲＮＡ并通过反转录得到乳铁蛋白或乳铁蛋白肽的ｃＤＮＡ，根据乳铁蛋白或乳铁蛋白肽基因特征设计一对各带一个酶切位点的引物，利用ＲＴ－ ＰＣＲ技术得到ＤＮＡ，定向克隆入大肠杆菌克隆载体，转化大肠杆菌克隆菌株，筛选阳性克隆；２）将以上筛选出的阳性菌株抽提质粒，用ＤＮＡ内切酶切出目的基因并纯化之，将目的基因定向克隆进杆状病毒转移载体，得到含乳铁蛋白重组转移载体，同时线性 化杆状病毒表达载体，在透明的聚苯乙烯灭菌管中加入下列试剂：浓度１．０μｇ／μＬ的重组杆状病毒转移载体１５...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：汪以真，许梓荣，黄海青，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]