一种促进和诱导灵芝次生代谢产物产生并积累的方法技术

本发明专利技术涉及一种促进和诱导灵芝次生代谢产物产生并积累的方法。在灵芝分化出菌盖和产生担孢子的生长发育期给予环境因素刺激和调控，如通过不同光质及光照时间、温差变化及湿度变化、ＣＯ↓［２］含量等环境因素刺激诱导灵芝孢子次生代谢产物灵芝三萜类化合物的产生并积累。分析表明，所获得的灵芝孢子所含灵芝三萜类化合物含量高达３．２－４．５％。经进一步加工，可作为抗艾滋病及肿瘤放化疗药物和辅助治疗药物应用于临床。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种在灵芝分化出菌盖和产生担孢子的生长发育期给予环境因素刺激和调控，促进灵芝生长发育和诱导灵芝次生代谢产物灵芝三萜类化合物的产生并积累的方法。
技术介绍
灵芝(Ganoderma lucidum)一年或多年生真菌，为腐生菌，由于可寄生在活树上，故又称为兼性寄生菌。东汉时期的《神农本草经》将灵芝列为上品药物，明代李时珍的《本草纲目》对灵芝的记载更为详尽。历代医学家均认为灵芝能治多种疾病，是滋补强身、扶正固本、延年益寿的珍贵药物。现代医学对灵芝有效成分分析、药理及临床应用研究取得重大进展，对灵芝抗衰老、免疫调节、抗肿瘤及活血化淤的药理作用与作用机制进行大量研究，其中灵芝多糖的免疫刺激作用被认为是灵芝“扶正固本”的奥秘，特别是破壁灵芝孢子应用于肿瘤放化疗辅助治疗的临床疗效，备受国内外学者瞩目。近30年来对灵芝的化学研究发展很快，从灵芝属真菌中已得到近200种化合物，如灵芝三萜类化合物、多糖、核苷类化合物、呋喃类化合物、甾醇类化合物、生物碱及多肽氨基酸类。尤其是灵芝三萜类化合物在药理学研究及临床应用上具有在抑制艾滋病毒载量CD8的同时使免疫指标CD4有效提升，以及具有既抑制肿瘤细胞生长、又增强抗肿瘤放化疗药物疗效并能降低放化疗毒副作用的药理活性被揭示之后，近年对灵芝品质和质量的研究及对灵芝三萜类化合物资源开发和分离提纯课题研究成为新的研究热点。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种在灵芝分化出菌盖和产生担孢子的生长发育期给予环境因素刺激和调控，促进灵芝生长发育和诱导灵芝次生代谢产物灵芝三萜类化合物的产生并积累的方法。研究发现，灵芝三萜类化合物是灵芝生长过程受环境因素激发诱导产生并积累的次生代谢产物，以抵御和适应在极端环境下使其遗传因子稳定不发生变异及维持生命有机体所产生的保护物质。分析表明，自然环境下生长的灵芝含灵芝三萜类化合物主要存在于作为传代种子的灵芝孢子中，视品质差异含量约为0.5-3％；子实体中则主要集中在灵芝菌盖的外周部位，且随着其成熟度的提高而递增；采用深层培养的菌丝体或用木屑栽培的灵芝所含三萜类化合物含量极低。专利技术人经实验发现，人工培育的灵芝及灵芝孢子品质优劣，培养基料的选择及培育环境是关键。在灵芝分化阶段若氧气不足，培育环境CO2含量超过0.1％，灵芝菌盖停止发育，灵芝菌柄快速长高形成“鹿角”灵芝。如利用木屑、玉米轴、甘蔗渣等培养基料培育灵芝，收获的灵芝表象虽与普通灵芝无明显差异，但灵芝子实体质地松瘪，灵芝孢子干瘪轻飘，担孢子萌发率极低；如选用阔叶树坚硬段木及良好的培育环境培育灵芝，收获的灵芝菌盖菌柄质地厚实，韧性强，灵芝孢子饱满充实，所含灵芝三萜类化合物含量高，担孢子萌发率高。本专利技术的方法是在灵芝分化出菌盖和产生担孢子的生长发育期给予环境因素刺激和调控，包括通过调控不同光质及光照时间、温差变化、湿度变化及CO2含量这些环境因素刺激诱导灵芝孢子次生代谢产物灵芝三萜类化合物的产生并积累；所获得的灵芝孢子所含灵芝三萜类化合物含量高达3.2-4.5％。本专利技术的方法的具体步骤如下一、在灵芝分化出菌盖的生长发育阶段，采用桔黄色塑胶绳线材料编织的挡阳网作为灵芝培育大棚顶端挡阳网，以获得桔黄色散射光光照；亦可再用桔黄色光源灯泡照射延长光照时间，光照强度为1500-5000勒克司。二、在灵芝产生担孢子的生长发育阶段，一般是在灵芝菌盖直径达到6cm左右，采用蓝黑色塑胶绳线材料编织的挡阳网更换灵芝培育大棚顶端挡阳网，以获得蓝黑色散射光光照；亦可再用蓝黑色光源灯泡照射延长光照时间，光照强度为2000-6000勒克司。三、在灵芝子实体成熟阶段，一般是在灵芝菌盖直径达到8cm左右，可在每日傍晚时分将灵芝培育大棚通风口及挡风门帘敞开，使通风对流促进灵芝培育大棚内室温迅速下降，以便调控夜晚灵芝培育大棚内室温为4-12℃；可在每日清晨将灵芝培育大棚通风口及挡风门帘垂放关闭，使灵芝大棚内室温回升，以便调控白天灵芝培育大棚内室温为25-32℃；同时，调控白天灵芝培育大棚内相对湿度为65-75％，并可通过在每间隔60-80分钟采用通常熏炉点燃稻草熏烟产生CO2的方法，调控灵芝培育大棚内弥漫CO2浓度达到0.1-0.3％。四、采收灵芝孢子期间调控灵芝培育大棚内昼夜间室温为24-27℃。最好是将当日喷射的新鲜灵芝孢子在当日傍晚前及时采收及干燥。分析表明，收获的灵芝孢子所含灵芝三萜类化合物含量高达3.2-4.5％。本专利技术方法是在常规人工大棚培育灵芝的方法的基础上，通过上述技术改良达到本专利技术的目的。按照上述本专利技术的方法，灵芝培育的其它具体程序如灵芝菌种制种、段木选材及检测、段木菌桩接种及发菌培育、场地选择及搭建灵芝培育大棚、灵芝培育管理、灵芝孢子采收等可参照常规方法。按照上述本专利技术的方法，场地选择可利用海拔较高山地，选择远离人烟及路边的无污染源的向阳通风高地搭建灵芝培育大棚，便于昼夜间灵芝培育大棚内形成较大温差；最好是选用阔叶树如米槠、栲树、枫树、栎树、梅等木质坚硬的段木培育灵芝，并取样检测段木木质中重金属及农残含量，严格控制选用的段木符合通常培育有机食用菌培养基料重金属及农残含量指标；控制用于调控灵芝培育大棚内相对湿度及灵芝培育期间的喷淋水选用无污染的山泉水或清水。本专利技术的试验表明，不同光质及光照时间、温差变化及湿度变化、CO2含量等环境因素对刺激灵芝生长发育及灵芝三萜类化合物含量变化呈现差异性。在灵芝分化出菌盖的生长发育阶段，提供桔黄色散射光光照并延长光照时间，可促进灵芝菌盖增大增厚，灵芝产量显著增产；在灵芝产生担孢子的生长发育阶段，改变光质为蓝黑色散射光并延长光照时间，可促进灵芝产生大量担孢子；在采收灵芝孢子期间调控灵芝培育大棚内室温为24-27℃，可促进灵芝孢子喷射旺盛；在灵芝子实体成熟阶段，调控灵芝培育环境中昼夜间温差幅度、湿度及CO2含量并形成极端环境，可刺激诱导灵芝孢子次生代谢产物灵芝三萜类化合物的产生并积累，灵芝孢子质量显著提高，灵芝孢子中灵芝三萜类化合物含量高达3.2-4.5％。经进一步加工，可作为抗艾滋病及肿瘤放化疗药物和辅助治疗药物应用于临床。具体实施例方式下面结合实施例对本专利技术作进一步详细说明。实施例一1、采用常规人工大棚培育灵芝的方法及程序的基础上进行下述技术改良。2、场地选择海拔较高的远离人烟的无污染源的向阳通风高地搭建灵芝培育大棚；培育灵芝段木选择经检测合格的栲树坚硬段木；取无污染的山泉水作为调控灵芝培育大棚内相对湿度及灵芝培育期间的喷淋水。3、在灵芝分化出菌盖的生长发育阶段，采用桔黄色塑胶绳线材料编织的挡阳网作为灵芝培育大棚顶端挡阳网，可获得桔黄色散射光光照；夜晚采用桔黄色光源灯泡照射延长光照时间，光照强度为4000-4500勒克司。4、在灵芝菌盖直径达到5.9cm左右，采用蓝黑色塑胶绳线材料编织的挡阳网更换灵芝培育大棚顶端挡阳网，可获得蓝黑色散射光光照；夜晚采用蓝黑色光源灯泡照射延长光照时间，光照强度为3500-4000勒克司。5、在灵芝菌盖直径达到8cm左右，在每日傍晚时分将灵芝培育大棚通风口及挡风门帘敞开，调控灵芝培育大棚内室温为4-7℃；每日清晨将灵芝培育大棚通风口及挡风门帘垂放关闭，调控白天灵芝大棚内室温为26-27℃；同时，调控白天灵芝培育大棚内相对湿度为65-70％，并本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种促进和诱导灵芝次生代谢产物产生并积累的方法，在灵芝分化出菌盖和产生担孢子的生长发育期给予环境因素刺激和调控，包括通过调控不同光质及光照时间、温差变化、湿度变化及ＣＯ↓［２］含量这些环境因素刺激诱导灵芝孢子次生代谢产物灵芝三萜类化合物的产生并积累；所获得的灵芝孢子所含灵芝三萜类化合物含量高达３．２－４．５％。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘昕，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]