D-泛解酸内酯水解酶cDNA及其克隆、表达和应用制造技术

Ｄ－泛解酸内酯水解酶ｃＤＮＡ及其克隆、表达和应用，涉及Ｄ－泛解酸内酯水解酶ｃＤＮＡ结构基因技术领域。本发明专利技术利用反转录ＰＣＲ技术，以串珠镰孢霉（Ｆｕｓａｒｉｕｍｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ）ＣＧＭＣＣ　　０５３６菌株总ＲＮＡ为模板合成ｃＤＮＡ第一链，再在引物１、引物２作用下扩增得到长度为１．５ｋｂ的片段，经切胶回收并纯化处理后同Ｔ载体连接得到克隆载体重组质粒ｐＭＤ１８－Ｔ－ＬＡＣ，在引物３、引物４作用下以该克隆载体为模板扩增，获得长为１１４６ｂｐ的编码Ｄ－泛解酸内酯水解酶ｃＤＮＡ的结构基因。构建表达载体重组质粒ｐＴｒｃ９９ａ－ＬＡＣ或ｐＹＸ２１２－ＬＡＣ及对应的含有以上重组质粒的重组菌。应用重组菌生物转化Ｄ－泛解酸内酯或Ｄ，Ｌ－泛解酸内酯制备Ｄ－泛解酸。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种来源于串珠镰孢霉（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　　ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ）ＣＧＭＣＣ　　０５３６菌株中的Ｄ－泛解酸内酯水解酶ｃＤＮＡ，其结构基因核苷酸序列为：　　　　ＡＴＧＧＣＴＡＡＧＣ　　ＴＴＣＣＴＴＣＴＡＣ　　ＧＧＣＣＣＡＧＡＴＴ　　ＡＴＴＧＡＣＣＡＧＡ　　ＡＧＴＣＣＴＴＴＡＡ　　ＴＧＴＣＴＴＧＡＡＧ　　６０　　　　ＧＡＴＧＴＧＣＣＧＣ　　ＣＴＣＣＣＧＣＡＧＴ　　ＧＧＣＣＡＡＴＧＡＣ　　ＴＣＴＣＴＧＧＴＧＴ　　ＴＣＡＣＴＴＧＧＣＣ　　ＴＧＧＴＧＴＧＡＣＴ　　　１２０　　　　ＧＡＧＧＡＧＴＣＴＣ　　ＴＴＧＴＴＧＡＧＡＡ　　ＧＣＣＴＴＴＴＣＡＴ　　ＧＴＣＴＡＣＧＡＴＧ　　ＡＡＧＡＧＴＴＴＴＡ　　ＣＧＡＣＧＴＣＡＴＣ　　１８０　　　　ＧＧＡＡＡＧＧＡＣＣ　　ＣＣＴＣＴＴＴＧＡＣ　　ＣＣＴＣＡＴＣＧＣＡ　　ＡＣＡＴＣＧＧＡＣＡ　　ＣＣＧＡＣＣＣＡＡＴ　　ＣＴＴＣＣＡＴＧＡＧ　　２４０　　　　ＧＣＴＧＴＣＧＴＡＴ　　ＧＧＴＡＴＣＣＴＣＣ　　ＴＡＣＴＧＡＡＧＡＧ　　ＧＴＣＴＴＣＴＴＴＧ　　ＴＣＣＡＧＡＡＴＧＣ　　ＴＧＧＣＧＣＴＣＣＣ　　３００　　　　ＧＣＴＧＣＴＧＧＣＡ　　ＣＴＧＧＣＴＴＧＡＡ　　ＣＡＡＧＴＣＴＴＣＣ　　ＡＴＣＡＴＴＣＡＧＡ　　ＡＧＡＴＴＴＣＣＣＴ　　ＣＡＡＧＧＡＧＧＣＣ　　３６０　　　　ＧＡＣＧＡＧＧＴＣＣ　　ＧＣＡＡＧＧＧＣＡＡ　　ＧＡＡＧＧＡＴＧＡＧ　　ＧＴＣＡＡＧＧＴＣＧ　　ＣＧＧＴＴＧＴＴＧＡ　　ＣＴＣＡＡＡＣＣＣＴ　　４２０　　　　ＣＡＧＧＴＣＡＴＣＡ　　ＡＣＣＣＣＡＡＴＧＧ　　ＴＧＧＣＡＣＴＴＡＣ　　ＴＡＣＡＡＧＧＧＣＡ　　ＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴ　　ＴＧＣＴＧＧＴＧＡＧ　　４８０　　　　ＧＧＣＣＡＡＧＧＣＧ　　ＡＣＧＡＴＧＴＴＣＣ　　ＣＴＣＣＧＣＣＣＴＧ　　ＴＡＣＣＴＧＡＴＧＡ　　ＡＣＣＣＴＣＴＣＣＣ　　ＴＣＣＴＴＡＣＡＡＣ　　５４０　　　　ＡＣＣＡＣＣＡＣＣＣ　　ＴＣＣＴＣＡＡＣＡＡ　　ＣＴＡＣＴＴＴＧＧＴ　　ＣＧＣＣＡＧＴＴＣＡ　　ＡＣＴＣＣＣＴＣＡＡ　　ＣＧＡＣＧＴＣＧＧＴ　　６００　　　　ＡＴＣＡＡＣＣＣＣＡ　　ＧＧＡＡＣＧＧＴＧＡ　　ＣＴＴＧＴＡＣＴＴＣ　　ＡＣＣＧＡＴＡＣＣＣ　　ＴＣＴＡＴＧＧＡＴＡ　　ＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣ　　６６０　　　　ＴＴＣＣＧＴＣＣＴＧ　　ＴＴＣＣＴＧＧＴＣＴ　　ＧＣＧＡＡＡＣＣＡＡ　　ＧＴＣＴＡＴＣＧＴＴ　　ＡＣＡＡＣＴＴＴＧＡ　　ＣＡＣＣＧＧＣＧＣＣ　　７２０...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：孙志浩，柳志强，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]