血管化增强的移植构造物制造技术

提供一种用于修复患病或受损组织的组织移植构造物。所述组织移植构造物包括选自肝基底膜及其提取物和水解产物、和源于脊椎动物非粘膜下层来源的已加工胶原的基质组分，加入的内皮细胞，以及可增强血管样结构在移植物中形成开始的至少一种附加的预选的外源性细胞群。预选的细胞群可以是未－角化或角化的上皮细胞群或选自成纤维细胞、平滑肌细胞、骨骼肌细胞、心肌细胞、多－潜能祖细胞、周细胞、成骨细胞、和任何其它适宜细胞类型的中胚层来源的细胞群，优选以所修复组织为基础选择的细胞群。还提供了用于增强这些组织移植构造物的体内血管化和用于制备这些移植构造物的方法。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及来源于基质组分的血管化增强的组织移植物以及它们修复患病或受损组织的用途。更具体而言，本专利技术涉及血管化增强的组织移植物，它包括已经用内皮细胞和至少一种附加的预选的外源性细胞群接种的基质组分，从而提高组织移植构造物的修复能力。
技术介绍
和概述本专利技术涉及一种用于修复受损或患病组织的组织移植构造物，它包括用内皮细胞和至少一种附加的预选的外源性细胞群接种的基质组分。本专利技术所用的基质组分选自肝基底膜及其提取物和水解产物、和源于脊椎动物非粘膜下层来源的已加工胶原。所述基质组分优选包括高度保守的胶原、糖蛋白、蛋白聚糖、和糖胺聚糖。本专利技术所用的基质组分来源于温血脊椎动物的组织。按照本专利技术制备的组织移植构造物基本上是无细胞的基质，提供类似体内基质环境的良好细胞生长基质。基质组分的天然组成和构型提供了一种独特的细胞生长基质，它可促进体外细胞附着和增殖，并在体内植入移植构造物时诱导组织重塑。作为组织移植材料，肝基底膜及其提取物和水解产物、和源于脊椎动物非粘膜下层来源的已加工胶原可诱导内源性组织在植入到宿主中后生长(即，移植材料诱导重塑)。当用于这类应用中时，组织移植构造物似乎不仅作为被移植构造物替换的组织的生长或再生长的基质起作用，而且可促进或诱导内源性组织的这种生长或再生长。这些移植材料以可植入片的形式或可注射的流体或凝胶形式使用，从而诱导内源性组织的再生长。本专利技术涉及组织移植构造物，它包括选自肝基底膜及其提取物和水解产物、和源于脊椎动物非粘膜下层来源的已加工胶原的基质组分，此外还包括加入的内皮细胞和至少一种附加的预选的外源性细胞群。本专利技术还涉及增强组织移植构造物体内血管化的方法。血管化提高的组织移植构造物是在将组织移植构造物植入或注射到宿主中前，通过用内皮细胞或内皮细胞前体(例如，祖细胞或干细胞)和至少一种附加的预选或预定的细胞类型体外接种基质组分而制备的。其中一个实施方案提供一种用于修复患病或受损组织的组织移植构造物。所述组织移植构造物包括选自肝基底膜及其提取物和水解产物、和源于脊椎动物非粘膜下层来源的已加工胶原的基质组分，加入的内皮细胞，和至少一种附加的预选的外源性细胞群。在另一实施方案中，提供血管化的组织移植构造物用于修复患病或受损组织。所述组织移植构造物包括选自肝基底膜及其提取物和水解产物、和源于脊椎动物非粘膜下层来源的已加工胶原的基质组分，加入的内皮细胞，和至少一种附加的预选的外源性细胞群，其中所述内皮细胞已经在基质组分上培养过一段时间，这段时间足够体外形成血管或血管样结构。在另一实施方案中，提供一种用于增强组织移植构造物体内血管化的方法。该方法包括用内皮细胞群和至少一种附加的预选的外源性细胞群体外接种选自肝基底膜及其提取物和水解产物、和源于脊椎动物非粘膜下层来源的已加工胶原的基质组分，从而形成移植构造物，然后将移植构造物植入到脊椎动物中需要修复的部位的步骤。在另一实施方案中，提供一种用于增强组织移植构造物体内血管化的方法。该方法包括用内皮细胞群和至少一种附加的预选的外源性细胞群体外接种选自肝基底膜及其提取物和水解产物、和源于脊椎动物非粘膜下层来源的已加工胶原的基质组分，体外培养内皮细胞一段时间，这段时间足够诱导血管或血管样结构或成分的形成，然后将移植构造物植入到脊椎动物中需要修复的部位的步骤。在这些方法实施方案的任何一个中，可用内皮细胞接种基质组分后，再用附加的预选的细胞群接种基质组分，也可在用内皮细胞接种基质组分前，用附加的预选的细胞群接种基质组分，或用内皮细胞和附加的预选的细胞群同时或近乎同时接种基质组分。可将内皮细胞在基质组分上体外培养一段时间，这段时间足够诱导血管或血管样结构的形成，或将内皮细胞在基质培养物上培养一段时间，这段时间足够在没有体外形成血管或血管样结构的情况下，使内皮细胞扩增(即，使内皮细胞分裂至少一次)。可选择性地，可在内皮细胞没有扩增的情况下植入移植构造物。在这些实施方案的任何一个中，在植入移植构造物前，附加的预选的细胞群可以扩增或没有扩增(即，允许发展经过至少一个细胞分裂周期)。在另一实施方案中，提供一种制备用于修复患病或受损组织的组织移植构造物的方法。该方法包括用内皮细胞群和至少一种附加的预选的外源性细胞群接种选自肝基底膜及其提取物和水解产物、和源于脊椎动物非粘膜下层来源的已加工胶原的基质组分，从而形成移植构造物的步骤。该方法还可进一步包括在基质组分上体外培养内皮细胞一段时间的步骤，这段时间足够诱导血管或血管样结构的形成。在这些实施方案的任何一个中，至少一种附加的细胞群包括未角化或角化的上皮细胞群或选自成纤维细胞、平滑肌细胞、骨骼肌细胞、心肌细胞、多-潜能祖细胞(例如，干细胞)、周细胞和成骨细胞的中胚层来源的细胞群。在各种实施方案中，可用内皮细胞和一种或多种这些附加的细胞类型接种基质组分(即，可用内皮细胞和这些附加的细胞类型的一种、两种、三种等接种基质组分)。附图简述附图说明图1提供描述本专利技术移植构造物的可选的制备方法的流程图。专利技术详述本专利技术涉及一种组织移植构造物，它包括选自肝基底膜及其提取物和水解产物、和源于脊椎动物非粘膜下层来源的已加工胶原的基质组分，而且还包括加入的内皮细胞和至少一种附加的预选的外源性细胞群。所述基质组分是用内皮细胞和预选的外源性细胞群接种的，并用于修复患病或受损组织。按照本专利技术，“受损组织”是指受到损害的、撕裂的、切断的组织，或已经手术除去或以其它方式从需要修复的部位失去的组织(例如，先天缺乏或畸形)。所述基质组分可从来源于肝基底膜及其提取物和水解产物的胞外基质组分制备。然而，所述基质组分还可从其它工程化的组织制备形成，例如，分离的基底膜层，或从可商业得到的已加工胶原组分、或纯化的胶原组分制备。用于本专利技术的可商业得到的已加工胶原组分的例子是MATRIGEL、ALLODERM、INTEGRA、APPLIGRAF、DERMAGRAFT、和PERI-GUARD。MATRIGEL基底膜基质(BectonDickinson)是肿瘤-衍生的基底膜组分，其是Engelbreth-Holm-Swarm肿瘤的可溶性基底膜提取物，胶凝化形成重构的基底膜。ALLODERM(Life Cell，Inc.)是来源于已被加工除去细胞的尸体真皮的组分。INTEGRA(Integra Life Sciences)是牛胶原和硫酸软骨素的无细胞真皮组分。APPLIGRAF(Novartis)是已经用人成纤维细胞和其它细胞和非细胞组分接种的含合成聚乳酸的组分，DERMAGRAFT是Vicryl筛骨架上人成纤维细胞的同种异体真皮移植物。PERI-GUARD(Bio-Vascular，Inc.)是从化学交联的牛心包制备的组分。纯化和已加工的胶原还可通过本领域已知的技术生产。(见，例如，美国专利6,127,143、5,814,328、5,108,424、和4,883,864)。用于本专利技术的内皮细胞可来源于任何类型的内皮细胞群，包括大血管、微血管、动脉、和静脉内皮细胞。不论是成熟的内皮细胞(例如，从器官或血管采集的)还是内皮细胞前体(例如，祖细胞或干细胞)都可用于本专利技术。此外，内皮细胞可从幼年或老年动物中采集，但优选从幼年动物采集的内皮细胞。在其中本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于修复患病或受损组织的具有血管样结构的组织移植构造物，所述组织移植构造物包括选自肝基底膜及其提取物和水解产物、和源于脊椎动物非粘膜下层来源的已加工胶原的基质组分，加入的内皮细胞，及至少一种附加的预选的外源性细胞群，其中所述附加的细胞群可增强所述血管样结构在所述移植构造物中形成的开始。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：SF巴戴拉克，
申请(专利权)人：普渡研究基金会，
类型：发明
国别省市：US[美国]