磷酸受纳蛋白基因腺相关病毒载体及构建和应用制造技术

本发明专利技术提供磷酸受纳蛋白基因腺相关病毒载体及构建和应用，构建方法为：（１）ＰＬＢ基因片断的扩增，（２）反义ＰＬＢ重组质粒载体ｐＡＡＶ－ａｓＰＬＢ的构建和鉴定，（３）腺相关病毒载体ｒＡＡＶ－ａｓＰＬＢ的制备，（４）腺相关病毒载体ｒＡＡＶ－ａｓＰＬＢ的收集、纯化、鉴定和滴度测定。本发明专利技术构建载体时去掉了ＡＡＶ病毒本身的基因，避免了病毒带来的免疫反应等副作用，所涉及的质粒等均为药理学可接受材料，安全无毒，应用范围广，感染效率高，使治疗基因在体内获得长期、稳定的表达，可在制备治疗心功能不全、糖尿病的基因药物中的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物技术，主要涉及磷酸受纳蛋白(受磷蛋白，磷酸兰苯，phospholamban)基因反义RNA重组腺相关病毒载体(rAAV-asPLB，rAAV-asPLN，rAAV-asPL)及构建，以及在制备心血管疾病、糖尿病心肌病以及钙调节异常等疾病药物中的应用。
技术介绍
随着人类基因组计划的开展和分子生物学研究的逐步深入，众多疾病的分子机制的阐明和致病基因不断发现，基因治疗已经从单基因遗传性疾病的治疗发展到多基因常见多发病的治疗，尤其在心脑血管疾病及各种肿瘤的治疗中展现出良好应用前景。基因治疗中的三个关键问题为1、人类疾病病因和致病机理的进一步明确，尤其是从分子机制角度来研究并提出有效的基因治疗方案。2、基因治疗及相应的治疗策略的优化和合理配伍，以提高整体上对疾病的治疗效果。3、安全、高效、稳定的基因表达系统即理想的载体的构建和应用。据此，合理的基因治疗方案必须具备三个要素目的基因、靶细胞以及基因传递的方法。选择合适的靶基因、合适的载体以及合适的治疗策略是基因治疗研究中的热点和难点。心脏收缩和舒张障碍的一个主要原因是由于心肌细胞的兴奋-收缩偶联的异常。钙离子(Calciu本文档来自技高网...

【技术保护点】
磷酸受纳蛋白基因腺相关病毒载体，是指受磷蛋白，磷酸兰苯基因反义ＲＮＡ重组腺相关病毒载体，ｒＡＡＶ－ａｓＰＬＢ，ｒＡＡＶ－ａｓＰＬＮ，ｒＡＡＶ－ａｓＰＬ，ＳＥＱＩＤＮＯ：１为是编码上述蛋白质的ＤＮＡ的核苷酸序列。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：胡申江，李江，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]